Avaliação da resposta imune inata após infecção pelo zika virus em macrófagos previamente infectados com dengue virus

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Data

2019-02-11

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Universidade Federal de Alfenas

Resumo

O Dengue virus (DENV) é um vírus de RNA da família Flaviviridae compreendendo quatro sorotipos relacionados, mas antigenicamente distintos. A dengue é a principal doença viral transmitida por artrópodes no mundo e representa um importante problema de saúde humana global, especialmente no Brasil onde em 2016 também foi registrado o maior surto de infecção pelo Zika virus (ZIKV), outro flavivírus com características genômicas e estruturais semelhantes ao DENV. A co-circulação de DENV e ZIKV é realidade no Brasil fornecendo evidências, inclusive, da existência de uma co-infecção. A resposta imune inicial contra ZIKV e DENV em células é mediado pelos receptores da imunidade inata que ativam sinalizações para expressão de genes antivirais ou pró-inflamatórios. Dessa forma, o presente estudo tem por finalidade uma melhor compreensão da resposta imune inata frente à infecção pelo ZIKV em macrófagos previamente infectados pelo DENV. Para isso, células da medula óssea de camundongos C57BL/6 foram diferenciadas em macrófagos (BMDM) e confirmadas por citometria de fluxo, cujo resultado demonstrou que mais de 95% das células diferenciadas eram CD11b+. Os BMDMs foram infectados independentemente com os quatro sorotipos de DENV (MOI 1:1) e após 12 horas essas células foram infectadas com o ZIKV (MOI 0.1:1). Ao final de mais 12 horas, as células foram analisadas quanto à expressão dos marcadores de ativação de macrófagos, CD80 e CD86, por citometria de fluxo e microscopia de fluorescência. A expressão diferencial de genes pró-inflamatórios e anti-viral foi realizada por qPCR. A expressão de IFN- foi diminuída em todos os grupos analisados. Não houve diferença na expressão dos marcadores CD80/CD86 nos BMDMs previamente infectados com DENV seguidos da infecção pelo ZIKV, exceto para o sorotipo 4, foi possível observar um aumento expressivo de ambos marcadores. Contudo, a expressão diferencial tanto de TNF- quanto IL-1 foi drasticamente reduzida nesse grupo. Com essa diminuição observou-se o aumento da viabilidade celular frente à diminuição na produção da citocina TNF-α. Análises de bioinformática indicaram um possível controle da expressão de TNF- e IL-1 pelo mmu-miR-181a-5p, que é induzido pela ativação da via de NF-B. Para isso, a expressão desse microRNA será avaliada com o objetivo de entender melhor a relação entre ativação de BMDMs pelos marcadores de superfície CD80/CD86 juntamente com a modulação da ativação de TNF- e IL-1 no modelo de infecção pelo DENV4 seguido da infecção do ZIKV.



Palavras-chave

Dengue, Zika virus, Imunidade Inata, Macrófagos, MicroRNAs

Citação

BRANCAGLION, Gustavo andrade. Avaliação da resposta imune inata após infecção pelo zika virus em macrófagos previamente infectados com dengue virus. 2019. 81 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Alfenas, Alfenas, MG, 2019.