Desenvolvimento de um teste de diagnóstico sorológico para Orthoflavivirus zikaense utilizando epítopos imunogênicos selecionados por imunoinformática

Abstract

O Orthoflavivirus zikaense (ZIKV) é um arbovírus emergente pertencente ao gênero Orthoflavivirus. Este se espalhou em regiões equatoriais, indo da África à Ásia e foi associado a epidemias em ilhas na região do oceano pacífico e em vários países das Américas, onde causou grandes preocupações devido à associação a inúmero de casos de síndrome de Guillain-Barré e malformações congênitas. A infecção é majoritariamente assintomática e quando presentes, as manifestações clínicas se assemelham a outras arboviroses cocirculantes que compartilham também semelhanças estruturais, especialmente com o vírus Orthoflavivirus deguei (DENV). Essas similaridades estruturais impõem desafios significativos no desenvolvimento de testes de diagnósticos. Nesse contexto, a imunoinformática surge como uma abordagem promissora para a determinação teórica de regiões imunogênicas exclusivas e altamente conservadas do ZIKV de forma a superar o desafio da reatividade cruzada. Foi avaliada a capacidade de cinco peptídeos derivados de proteínas estruturais de ZIKV identificados por imunoinformática em serem reconhecidos por um painel de soros de pacientes previamente infectados por ZIKV. O poder discriminatório dos peptídeos foi de 79,24%, 75%, 91,83%, 87% e 86,38% para os peptídeos 1, 2, 3, 4 e 5 respectivamente. Os resultados demonstram que o soro de pacientes com infecção natural pelo vírus apresenta reatividade (IgG total) contra esses peptídeos indicando-os como bons candidatos para aplicações em diagnósticos sorológicos. A análise de sororeatividade de indivíduos do sul de Minas utilizando Pep03 para detecção de IgG anti-ZIKV demonstrou uma reatividade de 12,46% na região. Pensando em melhorar a acurácia dessas regiões no diagnóstico de ZIKV, modelamos por métodos de computação duas proteínas quiméricas multi-epítopos. As construções obtiveram qualidade estrutural excelentes e se apresentaram estáveis para expressão em modelo procarioto. Além disso, análises in-silico de predição de resposta imunológica sugerem que os epítopos mantém suas características imunogênicas e as proteínas simulam uma infecção por ZIKV. Testes futuros avaliarão a eficácia das proteínas em testes de diagnósticos sorológicos para ZIKV.