Análise da replicação de fagos que infectam Pseudomonas aeruginosa na presença de mucina.

Abstract

Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria Gram-negativa patogênica que acomete indivíduos imunossuprimidos com fibrose cística, carcinomas ou queimaduras. Devido à ineficácia dos antibióticos frente às cepas multirresistentes, a fagoterapia tem demonstrado resultados promissores em ensaios clínicos contra infecções bacterianas. Otimizar o isolamento de fagos com potencial proteção de mucosas infectadas, possibilita a criação de medidas profiláticas, sanitizantes e formulações terapêuticas. O estudo buscou desenvolver uma metodologia de triagem in vitro, utilizando como controle bacteriófagos fenotipicamente conhecidos, VAC1.1 não ligante e VAC3.1 ligante a mucina, desta maneira classificando bacteriófagos líticos com replicação diferencial frente à esta glicoproteína que compõe o muco. A cepa de P. aeruginosa PA14 foi incubada e utilizada como hospedeiro para os fagos controles, em uma multiplicidade de infecção (MOI) de 1, utilizando caldo Luria Bertani (LB) 0,5× em mucina 0,5%, concentração definida por apresentar alteração fenotípica significativa e aumento das UFC/mL bacteriana. Diante disto, com os testes estatísticos realizados com os controles, foi determinado que fagos ligantes, seriam aqueles que apresentam aumento biológico significativo de 3 casas logarítmicas na UFP/mL frente ao controle com ausência de mucina. Portanto, através deste teste diferencial, foi possível isolar 5 fagos com replicação diferencial em mucina, sendo eles VAC1.1.1.1, VAC2.2, VAC 8.1 e VAC2.1.1.1, VAC2.1.2.1, determinando sua viabilidade e efetividade para usos em trabalhos posteriores para isolar bacteriófagos de interesse. Dessa forma, conclui-se que, esta metodologia in vitro permitiu a classificação dos bacteriófagos de acordo com sua ligação à mucina de maneira eficaz. A identificação e classificação de bacteriófagos é importante para compreensão da interação fago-mucosa e para o uso racional da fagoterapia frente a infecções por P. aeruginosa e outras bactérias multirresistentes.