A participação de minibrain no desenvolvimento diferencial do cérebro adulto em castas de abelhas apis mellifera
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Resumo
Em colônias de abelhas Apis mellifera, existem dois tipos de fêmeas (castas), rainhas (reprodutivas) e operárias (não-reprodutivas). A trajetória ontogenética que conduz ao surgimento de rainhas e operárias depende da quantidade e da qualidade da dieta recebida durante o desenvolvimento larval. Esta influência ambiental permite o desenvolvimento de características casta-específicas que incluem morfologia, fisiologia e comportamento. O cérebro de abelhas operárias adultas é proporcionalmente maior que o de rainhas, o que permite que as operárias realizem uma gama de atividades necessárias para manter o bem-estar da colônia. Em contrapartida, a neurogênese pós-embrionária em A. mellifera inicia-se logo na fase larval e sofre influência da nutrição diferencial que recebem as fêmeas, resultando em rainhas com cérebros maiores. Análises morfológicas mostram que essa inversão na tendência morfogenética acontece após a metamorfose. Análises transcriptômicas em larga escala utilizando hibridação de microarray de oligonucleotídeos revelaram maiores níveis de transcrição no cérebro de pupas de operárias de 324 genes, entre eles, minibrain (mnb). O presente trabalho objetivou avaliar a participação do gene mnb no desenvolvimento diferencial do cérebro adulto entre rainhas e operárias de abelhas A. mellifera. O primeiro passo foi obter abelhas operárias em desenvolvimento pupal knockdown para mnb, executando experimentos sequenciais de RNAi (knockdown, KD). Foram realizados três experimentos, cada um com 150 pupas, divididas em 3-4 grupos experimentais: pupas que receberam injeções de dsMNB, injeções dsGFP, injeções de NaCl 0,9% e pupas naive. Após um período de tratamento, foram realizadas análises moleculares para avaliar os indicadores de knockdown de mnb e avaliar o fenótipo morfológico dos cérebros. Os resultados obtidos com qPCR mostraram ocorrência de knockdown de mnb e nos possibilitou também analisar o timing do silenciamento deste gene. Os ensaios histológicos mostraram o efeito do knockdown sobre o desenvolvimento do cérebro adulto, que ficou evidenciado pelas menores dimensões apresentadas por regiões cerebrais como corpo cogumelar, lobos ópticos e cérebro (p< 0,05). Estes resultados indicam que o mnb tem um papel chave no desenvolvimento do cérebro de operárias durante o período pupal e confirmam sua participação no desenvolvimento diferencial de castas de A. mellifera.