Navegando por Autor "Junqueira, Cristina Mazzeu"

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Acesso aberto (Open Access)
Partição da Lipase de Geotrichum candidum em sistemas aquosos bifásicos
(Universidade Federal de Alfenas, 2014-04-30) Junqueira, Cristina Mazzeu; Virtuoso, Luciano Sindra; Mendes, Adriano Aguiar; Denadai, Ângelo Márcio Leite
Este trabalho teve por objetivo estudar a partição da Lipase de Geotrichum candidum (LGc) em sistemas aquosos bifásicos (SAB) formados por PEG 1500 ou 4000 ou 6000 g mol-¹ + citrato de sódio + água e por copolímero tribloco L35 1900 g mol-¹ + citrato de sódio + água. A lipase extracelular foi produzida pelo microrganismo Geotrichum candidum NRRL Y - 552 por fermentação a 30,0 oC, pH 7,0 e sob agitação de 250 rpm. Os estudos de partição foram conduzidos com o sobrenadante do caldo fermentado, rico em lipase, após filtração para eliminação dos microrganismos. Estudos cinéticos e de eletroforese SDS-PAGE confirmaram a obtenção da lipase na etapa de fermentação. A influência da temperatura, pH, adição de NaCl, massa molar do polímero, hidrofobicidade do sistema e composição de mistura de PEG e do citrato de sódio sob o coeficiente de partição da lipase foram estudadas. Em todos os experimentos realizados a enzima particionou preferencialmente para a fase inferior com valores de KLGc em torno de 0,05-0,6. Medidas da atividade da lipase nas fases dos SAB mostraram que houve significativa perda da atividade enzimática durante o processo. Os valores médios da atividade nas fases superior e inferior foram de 1,5 U/ml e 5,5 U/ml, respectivamente, enquanto que no caldo bruto filtrado a atividade foi de 11,75 U/ml. Parâmetros termodinâmicos do processo de transferência de material entre as fases foram obtidos usando a aproximação de Van't Hoff nos estudos de partição realizados em diferentes temperaturas. O elevado valor negativo obtido para a variação de entalpia de transferência constituem evidência da existência de fortes interações entre a LGc e o PEG, contudo, os baixos coeficientes de partição encontrado nos SAB sugerem que o processo de transferência da LGc nestes sistemas seja entropicamente dirigido. Os SAB formados pela mistura de PEG 1500 g mol-¹ + citrato de sódio + água em pH 7,0 foram otimizados pela metodologia de superfície resposta. As condições que maximizam a partição do LGc na fase inferior foram determinadas nas concentrações extremas de PEG e citrato de sódio dentro das faixas de concentrações estudadas.
Acesso aberto (Open Access)
Surfactantes como agentes moduladores da partição e formadores de novos sistemas aquosos bifasicos
(Universidade Federal de Alfenas, 2019-07-29) Junqueira, Cristina Mazzeu; Virtuoso, Luciano Sindra; Santos, Mariane Gonçalves; Basso, Rodrigo Corrêa; Silveira, Nelson José Freitas Da; Raphael, Ellen
Dentro do estudo de sistemas aquosos bifásicos (SABs) destaca-se os sistemas aquosos bifásicos micelares (SABM) formados por surfactantes não iônicos, como os da classe Triton X. Esses são ideais para extração de biomoléculas com fortes características hidrofóbicas, devido a sua capacidade de gerar ambientes hidrofóbicos no interior das fases do sistema. Assim foram caracterizados novos SABM a partir de combinações de soluções aquosas de Triton X-114 com soluções aquosas de polímeros do tipo polietilenoglicol (PEG) em diferentes condições de composição e temperatura. A separação de fases leva à formação de fase superior enriquecida no polímero com cerca de 18,0 % de PEG, 0,50 % de Triton X-114 e 81,5 % de água enquanto que os valores observados para a fase inferior variam em torno de 15,73 % de PEG, 7,84 % de Triton X-114 e 76,43 % de água em porcentagem mássica. Observou-se que os novos sistemas não possuem forte dependência da temperatura dentro da faixa de temperatura de 278,15 a 293,15 K. Adicionalmente, os dados de equilíbrio e as curvas binodais foram ajustadas as expressões lineares Othmer-Tobias, Bancroft, Hand e Setschenow e aplicados ao modelo de Flory-Huggins. Todos os modelos apresentaram uma correlação significativa entre os dados ao nível de significância de 5 % com coeficientes de correlação superiores a 0,80. Corantes provenientes do extrato bruto das sementes de urucum (Bixa orellana L.) foram particionados em SABs formados por polietileno glicol (1500 ou 4000 ou 6000 g mol-1) ou copolímero tribloco L35 (2000 g mol-1) + citrato de sódio + água na presença de CTAB (brometo de cetiltrimetilamônio). A hipótese investigada foi de que o uso de surfactantes como aditivos em sistemas aquosos bifásicos tradicionais, podem melhorar a solubilidade do extrato de urucum nas fases desses sistemas através de um mecanismo de formação de micelas mistas, o que se mostrou viável pois os corantes bixina e norbixina se concentraram preferencialmente na fase inferior, mostrando uma forte dependência da temperatura e composição do sistema. Na presença do surfactante, os corantes se concentraram mais na fase inferior dos sistemas estudados, demonstrando o potencial dos sistemas aquosos bifásicos micelares como um novo método de extração e/ou purificação dos corantes do extrato de semente de urucum.