Navegando por Autor "Moraes, Thamyris Reis"

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Acesso aberto (Open Access)
Investigação da participação da quimiocina CXCL1 associada às células da glia na gênese da dor neuropática
(Universidade Federal de Alfenas, 2018-07-13) Moraes, Thamyris Reis; Sousa, Giovane Galdino De; Pereira, Daniele Sirineu; Romero, Thiago Roberto Lima
A dor neuropática é originada a partir de uma lesão ou disfunção do sistema nervoso somatossensorial, acometendo entre 6,9% a 10% da população mundial e está relacionada a diminuição da qualidade de vida e do sono, além de, os pacientes serem pouco responsivos aos tratamentos atuais. Estudos têm demonstrado que não só os neurônios têm participação na modulação da dor neuropática, mas que as células da glia possuem papel fundamental neste processo pela da liberação de substâncias pró inflamatórias, como as quimiocinas, modulando o processo nociceptivo. Assim, o presente estudo investigou o envolvimento da quimiocina CXCL1 e das células da glia, sendo elas micróglia e astrócitos, na gênese da dor neuropática. Para tal, foram utilizados ratos machos Wistar, pesando entre 250g a 300g. Foi utililizado o aparato Von Frey filamentos para avaliação do limiar nociceptivo e para a indução da dor neuropática foi utilizado o modelo de constrição crônica do nervo ciático (CCI). Para avaliar a expressão dos marcadores de micróglia (Iba1), astrócitos (GFAP) e da quimiocina CXCL1 foi utilizado o ensaio de Western Blot. O envolvimento dos receptores CXCR2 foi investigado utilizando o antagonista seletivo SB225002 e a participação de micróglia e astrócitos foi avaliada utilizando os inibidores minociclina e fluorocitrato, respectivamente. Além disso, o CXCL1 recombinante foi administrado i.t. para investigar o envolvimento dessa quimiocina na nocicepção. Os resultados demonstraram que os animais pré-tratados com o SB225002 apresentaram diminuição da nocicepção, indicando o envolvimento destes receptores na dor neuropática. Além disso, a CXCL1 recombinante foi capaz de causar nocicepção a nível espinal e a minociclina e o fluorocitrato reduziram a alodínia mecânica causada pela CXCL1 e pela CCI. Em adição, houve um aumento da expressão da quimiocina CXCL1 em animais submetidos à indução da neuropatia, demonstrando seu papel na dor neuropática. Nos animais submetidos à CCI houve aumento da expressão do marcador de micróglia Iba1, mas não do marcador de astrócito GFAP e o antagonista para CXCR2 foi capaz de diminuir a expressão dos marcadores de micróglia e astrócitos nestes animais. Sendo assim, o presente estudo sugere a presença dos receptores CXCR2 nas células da glia durante a dor neuropática, assim como o envolvimento da quimiocina CXCL1 na gênese dessa dor.
Acesso aberto (Open Access)
Investigação da participação do HMGB1 na ativação dos receptores RAGE e TLR4 em células da glia espinais durante a dor neuropática induzida por Paclitaxel
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-09-08) Moraes, Thamyris Reis; Souza, Giovane Galdino De; Silva, Morgana Duarte; Duarte, Igor Dimitri Gama; Marinho, Bruno Guimarães; Garcia , Tayllon Dos Anjos
A dor neuropática induzida por quimioterapia é o principal efeito adverso de fármacos quimioterápicos e está relacionada à diminuição da qualidade de vida dos pacientes acometidos por câncer, podendo levar até à descontinuação do tratamento. A nível espinal, a modulação desse tipo de dor envolve não só neurônios, como também as células da glia que quando ativadas aumentam a expressão de receptores e sinalizações intracelulares resultando na liberação de mediadores pró-inflamatórios. A proteína de alta mobilidade do grupo box-1 (HMGB1) é liberada durante a dor neuropática e seu papel no desenvolvimento da dor consiste em sua interação com receptores ativando vias de sinalização. Deste modo, o presente estudo investigou o papel do HMGB1 em células da glia, nos receptores RAGE e TLR4 e na sinalização de MAPK p38 e NFkB, bem como o envolvimento destas vias na dor neuropática induzida por paclitaxel. Para tal, foram utilizados camundongos machos C57BL/6 e C57BL/6 TLR4 (-/-) pesando entre 20 e 25g. Foi utilizado o aparato von Frey filamentos para avaliação do limiar nociceptivo. Para a indução da dor neuropática foi utilizado o agente quimioterápico paclitaxel, o qual foi administrado em dias alternados por 6 dias. A proteína recombinante HMGB1 foi administrada i.t. para investigar o efeito da mesma sobre o limiar nociceptivo. A participação dos receptores RAGE e TLR4 foi investigada por meio dos respectivos antagonistas FPS-ZM1 e LPS-RS administrados via intratecal (i.t). A participação de micróglia, astrócitos, da MAPK p38 e do NFkB foi avaliada utilizando os inibidores minociclina, fluorocitrato, SML0540 e PDTC, respectivamente, também por via i.t. Foi feito o ensaio de Western blot para avaliar os níveis proteicos de HMGB1, RAGE, TLR4, Iba1 e GFAP e o ensaio de Elisa para avaliação dos níveis de HMGB1, TNF-α e IL1-β. Os resultados indicam a participação dos receptores RAGE e TLR4, da micróglia, astrócitos e da sinalização MAPK p38 e NFkB tanto na nocicepção induzida por HMGB1 como na dor neuropática induzida por paclitaxel. Também foi observado o aumento dos níveis proteicos de HMGB1 na gênese da dor neuropática, e o envolvimento dos receptores TLR4 na ativação microglial. O bloqueio dos receptores RAGE e TLR4 levou à diminuição das citocinas pró-inflamatórias. Os resultados indicam que o HMGB1 liberado na fase inicial da do tratamento com paclitaxel ativa receptores RAGE e TLR4 na micróglia, aumentando níveis de citocinas pró- inflamatórias e contribuindo para a dor neuropática.
Chemotherapy-induced neuropathic pain is the main adverse effect of chemotherapeutic drugs and is related to a decrease in the quality of life of cancer patients, which can even lead to treatment discontinuation. At the spinal level, the modulation of this type of pain involves not only neurons but also glial cells that, when activated, increase the expression of receptors and intracellular signaling, resulting in the release of pro-inflammatory mediators. The high- mobility box-1 protein (HMGB1) is released during neuropathic pain and its role in pain development consists of its interaction with receptors activating signaling pathways. Therefore, the present study investigated the role of HMGB1 in glial cells, RAGE, and TLR4 receptors, and MAPK p38 and NFkB signaling, as well as the involvement of these pathways in paclitaxel-induced neuropathic pain. For this, C57BL/6 and C57BL/6 TLR4 (-/-) male mice weighing between 20 and 25g were used. The von Frey filaments apparatus was used to assess the nociceptive threshold. For the induction of neuropathic pain, the chemotherapy agent paclitaxel was used, which was administered every other day for 6 days. Recombinant HMGB1 protein was administered i.t. to investigate its effect on the nociceptive threshold. The participation of RAGE and TLR4 receptors was investigated using the respective antagonists FPS-ZM1 and LPS-RS administered intrathecally. The participation of microglia, astrocytes, MAPK p38 and NFkB was evaluated using the inhibitors minocycline, fluorocitrate, SML0540, and PDTC, respectively, also by i.t. The Western blot assay was performed to assess the protein levels of HMGB1, RAGE, TLR4, Iba1, and GFAP and the Elisa assay to assess the levels of HMGB1, TNF-α, and IL1-β. The results indicate the participation of RAGE and TLR4 receptors, microglia, astrocytes, and MAPK p38 and NFkB signaling in both HMGB1-induced nociception and paclitaxel-induced neuropathic pain. It was also observed an increase in HMGB1 protein levels in the genesis of neuropathic pain, and the involvement of TLR4 receptors in microglial activation. Blockade of RAGE and TLR4 receptors led to a decrease in pro-inflammatory cytokines. These results indicate that HMGB1 released in the initial paclitaxel treatment activates RAGE and TLR4 receptors in microglia, increasing levels of pro-inflammatory cytokines and contributing to neuropathic pain.