Navegando por Autor "Rosa, Mariana Azevedo"

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Acesso aberto (Open Access)
Nanotubos de carbono magnéticos funcionalizados: Avaliação da proteína corona em soro humano, estudos de citocompatibilidade e permeação em modelo biomimético
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-07-10) Rosa, Mariana Azevedo; Figueiredo, Eduardo Costa De; Jesus, Jemmyson Romario De; Virtuoso, Luciano Sindra; Azevedo, Luciana; Fernandes, Christian
Os nanotubos de carbono (CNTs) têm se destacado em aplicações nanomédicas devido às suas características favoráveis e possibilidades de funcionalizações. Quando esses nanomateriais entram em contato com a corrente sanguínea assumem uma nova identidade devido à formação da proteína corona. Além disso, ensaios para assegurar a citocompatibilidade dos sistemas devem ser realizados. Nessa tese foram sintetizados três materiais: CNTs magnéticos (M-CNTs), M-CNTs recobertos por albumina sérica bovina (M-CNTs-BSA) e M-CNTs funcionalizados com os monômeros hidrofílicos hidroxietilacrilato e glicerol dimetacrilato (M-CNTs-HL). Esses materiais foram amplamente caracterizados e o perfil de adsorção de albumina foi avaliado, obtendo-se valores entre 13,2 e 19,9 mg g -1 , com isotermas de Freundlich e Sips explicando o comportamento adsortivo. Ensaios mostraram que os nanotubos exerceram um efeito de supressão na fluorescência de uma solução de albumina, indicando que essa proteína pode mudar seu estado conformacional após a interação com a superfície dos materiais. Diferentes concentrações de nanotubos foram aplicadas para os estudos de citotoxicidade, metabolismo celular, estresse oxidativo e apoptose utilizando Caco-2 como modelo celular. Citocompatibilidade para concentrações de até 100 µg mL-1 foram obtidas para todos os materiais. Ensaios de permeação em modelo biomimético foram conduzidos sob ação de ímãs por até 8 h e as nanopartículas magnéticas presentes nos nanotubos foram utilizadas para estimar a concentração de materiais que atravessaram as Caco-2. Valores entre 0,50 e 7,19 e entre 0,27 e 9,30 ng foram obtidos para as células expostas e não expostas aos ímãs, respectivamente. Ensaios de eletroforese em gel foram realizados para comparar o perfil de proteínas eluidas dos materiais, após a exposição deles a amostras de soro humano diluído. Mudanças na concentração de proteínas totais foram verificadas, além de alterações discretas no perfil observado no gel de eletroforese. A otimização de condições distintas para a eluição de proteínas de cada nanotubo foi uma outra evidência de que os materiais interagem de forma diferente com as proteínas. Estudos mais conclusivos, utilizando um espectrômetro de massas, ainda estão sendo realizados. Juntos os resultados obtidos indicam que os materiais sintetizados são promissores para as áreas biomédicas e biotecnológicas. Ademais, ainda não há na literatura a comparação desses dois tipos de funcionalização para nanotubos.
Acesso aberto (Open Access)
Síntese e caracterização de micropartículas de albumina sérica bovina para emprego em preparo de amostras
(Universidade Federal de Alfenas, 2019-04-22) Rosa, Mariana Azevedo; Figueiredo, Eduardo Costa De; Silva, José Alberto Fracassi; Virtuoso, Luciano Sindra
O preparo de amostras é a etapa do procedimento analítico que apresenta maiores possibilidades de erros e na qual é dispendido o maior tempo. Técnicas empregando materiais de acesso restrito (RAMs) estão sendo desenvolvidas para minimizar as dificuldades presentes no preparo de matrizes complexas. A albumina sérica bovina (BSA) vem sendo amplamente utilizada para o preparo de RAMs, uma vez que associada com outros materiais confere a capacidade de excluir macromoléculas por mecanismos físicos e químicos. Nesse contexto, têm-se os objetivos principais do trabalho: a síntese de partículas de BSA (sem materiais suporte) e o seu uso inédito como RAM em sistemas de extração em fase sólida para a determinação de anti-hipertensivos em plasma humano. As micropartículas foram obtidas por processo de coacervação, usando-se BSA, solução fosfato 0,2 mmol L-1 (pH=5,00), etanol, glutaraldeído 25% e borohidreto de sódio 1% como reagentes de síntese. Estudos de caracterização do material envolveram testes de exclusão de proteínas (resultados superiores a 96% foram obtidos) e avaliações quanto à cinética e às isotermas de adsorção (modelos de Elovich e de Sips foram melhor ajustados para os analitos e esses estudos ainda mostraram a capacidade do material sintetizado em interagir tanto com fármacos de alta quanto com os de baixa taxa de ligação a proteínas plasmáticas). Caracterizações do material foram obtidas empregando testes de solubilidade, espectroscopia de infravermelho, microscopia eletrônica, microscopia de força atômica, potencial zeta, espalhamento de luz dinâmico, porosimetria e análises termogravimétricas. Dois métodos distintos para a extração de fármacos foram desenvolvidos, um referente a extração online e o outro à microextração em fase sólida (SPME). Ambos evidenciaram a capacidade extrativa das micropartículas de BSA, e o segundo foi validado apresentando linearidade (r ≥ 0,99), precisão e exatidão (respeitando limites propostos por guias de validação), além de robustez para sete parâmetros distintos e limites de quantificação adequados (variando de 15 a 100 μg L-1). Ainda sobre a SPME, fibras de micropartículas de BSA foram confeccionadas e as mesmas apresentaram características favoráveis como: resistência, baixo custo (R$ 0,20/fibra), possibilidade de reuso, reprodutibilidade entre diferentes lotes (n=3) de síntese (desvios padrão relativos inferiores a 10%), fácil manuseio e portabilidade. Amostras de plasma de pacientes que faziam o uso de anti-hipertensivos foram analisadas por SPME LC-MS/MS e concentrações quantificáveis dos fármacos foram encontradas.