Navegando por Autor "Santos, Lauana Aparecida"
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Item Acesso aberto (Open Access) Avaliação da resposta imune in vitro contra antígenos totais de Escherichia coli(Universidade Federal de Alfenas, 2016-05-20) Santos, Lauana Aparecida; Chavasco, Jorge Kleber; Silvério, Alessandra Dos Santos Danziger; Caldas, Ivo SantanaDentre os microrganismos que a compõem a microbiota intestinal, sobressai Escherichia coli, que possui como principal nicho ecológico o intestino grosso de humanos. Sua importância destaca-se em fazer parte dos microrganismos comensais pioneiros na colonização da mucosa intestinal e também o seu papel patogênico causando doenças intra e extra intestinais. O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta imune contra antígenos totais de Escherichia coli. Os resultados desse estudo podem servir como subsídio para o entendimento da resposta imune sistêmica a um microrganismo presente na mucosa. Os antígenos totais de E. coli foram obtidos após lise com solução de guanidina a 8M. Realizou-se a diálise e a dosagem de proteínas. Foi realizado a caracterização eletroforética em gel de poliacrilamida e perfil antigênico por Western Blotting. Avaliou-se a presença de anticorpos IgG total e IgA sérica específicos em 30 soros de humanos e também a resposta de células mononucleares de sangue periférico humano (PBMC) através da metabolização de MTT. Os resultados obtidos demonstraram que a suspenção de antígenos obtida era composta por várias proteínas e o teste de Western Blotting revelou que estas foram reconhecidas por anticorpos presentes nos soros de humanos. Foi possível detectar a presença de anticorpos IgG total e IgA sérica contra os antígenos de E. coli por ELISA. No ensaio de viabilidade e proliferação celular pelo MTT, observou-se que houve proliferação celular em diferentes concentrações do antígeno e a viabilidade não foi inferior a 70%. Os resultados sugerem que os antígenos oriundos de E. coli podem induzir respostas imunes locais e sistêmicas.Item Acesso aberto (Open Access) Influência do tratamento com antifúngico e antiinflamatório na resposta granulomatosa da paracoccidiodomicose experimental murino: pesquisa de anticorpos e citocinas(Universidade Federal de Alfenas, 2022-06-29) Santos, Lauana Aparecida; Burger, Eva; Mendes, Rinaldo Poncio; Coelho, Luiz Felipe Leomil; Dias, Amanda Latercia Tranches; Miranda, Tatiana Teixeira DeO agente etiológico da paracoccidioidomicose (PCM) é o fungo termo-dimórfico Paracoccidioides spp. (Pb). A PCM é uma micose sistêmica de maior prevalência no Brasil. Acomete principalmente indivíduos do sexo masculino que podem estar ligados com o exercício de atividades rurais. Para compreender a interação deste fungo com o hospedeiro estudos utilizaram o modelo experimental murino e foi possível classificar diversas linhagens de camundongos infectados com Pb e os mecanismos que estão envolvidos na resposta imune inflamatória granulomatosa. Vale ressaltar que, a presença de granulomas caracteriza está micose. A expressão de citocinas e presença de anticorpos de vários isótipos nos locais de lesões granulomatosas ainda são pouco estudadas. Portanto, neste estudo, visou verificar a influência do tratamento através do estudo estereológico, pesquisa de anticorpos específicos dos isótipos IgM, IgG, IgG1a, IgG2a, IgG2b, citocinas IL17, KC (IL8) e GM-CSF em granulomas paracoccidioidomicóticos presentes nos órgãos de camundongos infectados com P. brasiliensis e tratados e não tratados com Itraconazol (antifúngico) e Celecoxibe (anti- inflamatório). Para isto, foi considerado ainda que, os tratamentos disponíveis são limitados nos dias atuais e o estudo de novas alternativas pode auxiliar a compreensão dos mecanismos de defesa e os processos inflamatórios agudos ou crônicos atuantes na PCM. Sendo assim, foram utilizados camundongos suíços infectados com a cepa virulenta Pb18 do P. brasiliensis. Realizou-se a necropsia e coletados baço, omento, fígado e pulmões e realizaram-se análises histológicas para verificar a arquitetura, celularidade, presença de leveduras do P. brasiliensis nas lesões granulomatosas e o remodelamento morfológico pelo método estereológico. Além disso, fez a imunolocalização de IgM, IgG, IL-17 e GM-CSF por imuno-histoquímica no omento dos animais infectados e infectados e tratados. Os resultados demonstraram que os animais que receberam tratamentos combinados tiveram menores lesões histológicas e apresentaram melhores padrões histológicos, peso, sobrevida, hipersensibilidade, produção de anticorpos, citocinas e menor número de fungos viáveis. Além disso, os resultados de imunohistoquímica mostraram que houve uma forte marcação para a presença de IgM, IgG, IL-17 e GM-CSF em diferentes estágios da infecção. A partir destes resultados, pode concluir que o tratamento combinado apresentou resultados satisfatórios tanto na fase inicial quanto tardia desta doença. Sugerindo que esta combinação terapêutica reduz a resposta inflamatória intensa nos pacientes e poderá ser utilizada como uma possível estratégia nova de tratamento.