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Acesso aberto (Open Access)
Identificação de candidatos vacinais multivalentes utilizando epítopos conservados de proteínas envolvidas em processos de entrada e saída do gênero Orthopox vírus
(2025-06-25) Araújo, Leonardo Pereira de; Almeida, Leonardo Augusto de; Soares, Siomar de Castro; Silva, Manuela Leal da
O gênero Orthopoxvirus (OPXV) inclui vírus zoonóticos emergentes e reemergentes que representam uma ameaça à saúde global e impactam uma ampla variedade de animais. Entre eles, a varíola causou pandemias no século XX, o vírus Borealpox provocou a primeira morte registrada no Alasca em 2024, e o Monkeypox vírus (Mpox), foi classificado como emergência de saúde pública de importância internacional pela Organização Mundial da Saúde em 2022 e 2024, devido à emergências de uma novas variantes como Clado Ib. As limitações das vacinas de vírus atenuados utilizadas nos dias atuais, especialmente em populações imunocomprometidas, ressalta a urgência de novas estratégias vacinais. Assim, o objetivo deste trabalho foi identificar epítopos conservados proteínas envolvidas nos processos de entrada e saída viral nas células hospedeiras, abrangendo todos os vírus do gênero OPXV e desenvolver in silico uma vacina quimérica multiepítopo imunogênica. Para isso, proteínas envolvidas nos processos de entrada e saída viral foram extraídas do banco de dados do National Center for Biotechnology Information (NCBI). Um total de 160 sequências de todos os vírus descritos do gênero OPXV foram analisadas para identificar epítopos conservados, utilizando o banco de dados Immune Epitope Database (IEDB). Após processos de filtragem de antigenicidade, alergenicidade, toxicidade, bem como de exclusão de regiões transmembranares e sítios de N-glicosilação, os epítopos candidatos foram concatenados para construir uma proteína quimérica multiepítopo, combinada com os adjuvantes β-defensina e PADRE, visando potencializar a resposta imune. Duas proteínas quiméricas foram desenvolvidas: uma contendo oito epítopos conservados abrangendo todos os vírus do gênero OPXV e outra com epítopos específicos para Mpox. Essas proteínas foram avaliadas quanto à antigenicidade, alergenicidade e estabilidade estrutural. Além disso, as vacinas multiepítopos propostas demonstraram boa interação com o receptor do tipo Toll, bem como previsões favoráveis de indução de respostas imunológicas humorais e celulares para três doses dos candidatos vacinais. Os resultados sugerem que essas vacinas podem representar uma nova abordagem multivalente contra vírus zoonóticos do gênero OPXV. As proteínas candidatas apresentam potencial para estudos in vitro e in vivo e, caso sua eficácia seja confirmada, poderão oferecer uma solução eficaz para a prevenção de doenças causadas por esses patógenos, bem como na produção de testes de imunodiagnóstico com os epítopos identificados nestas análises.
Acesso aberto (Open Access)
O papel da invermectina na resposta imune inata em quadroa agudos e de pneumonia causada por Pseudomonas aeruginosa
(2026-02-26) Belo, Thiago Caetano Andrade; Almeida, Leonardo Augusto de; Prudêncio, Carlos Roberto; Marinho, Fábio Antônio Vitarelli; Carvalho, Deyse Cristina Madruga; Azevedo, Luciana
O receptor do tipo Toll 4 (TLR4) é um receptor de reconhecimento de padrões (PRR) amplamente distribuído nos macrófagos, responsável por reconhecer padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs). O complexo MD2 se integra ao TLR4, sendo ambos necessários para o reconhecimento dos lipopolissacarídeos (LPS) presentes na membrana externa de bactérias Gram-negativas, como a Pseudomonas aeruginosa. Estudos demonstraram que o tratamento com ivermectina melhora a sobrevivência de camundongos após a administração de uma dose letal de LPS, embora os mecanismos de ação envolvidos nesse processo ainda não estejam elucidados. Desta forma, foram realizados análises in silico utilizando ancoragem molecular, e foi constatado que a ivermectina se liga ao MD2 do complexo TLR4/MD2. Para avaliar se essa interação afeta a imunofuncionalidade de macrófagos, estes foram derivados de células da medula óssea murina, tratados com ivermectina e infectados com P. aeruginosa PA14. A ivermectina não afetou a viabilidade celular, prejudicou a depuração bacteriana, reduziu a secreção de NO e TNF-α, além de aumentar a ativação de NF-κB em macrófagos RAW 264.7 desafiados com LPS, sendo esses efeitos revertidos após a inibição do MD2. Camundongos C57BL/6 e TLR4-/- foram tratados com ivermectina ou PBS e subsequentemente infectados intratraquealmente com PA14. O tratamento com ivermectina reduziu a carga bacteriana pulmonar em camundongos TLR4-/-, diminuiu o infiltrado inflamatório e os níveis de IL-6 e TNF-α, ao mesmo tempo em que aumentou os níveis de IL-17A e IFN γ nos pulmões dos camundongos infectados, com efeitos mais pronunciados em camundongos TLR4-/-. Em conjunto, esses achados sugerem que a ivermectina ao se ligar ao MD2, suprimiu a atividade microbicida dos macrófagos in vitro. No entanto, in vivo, particularmente em camundongos TLR4-/-, o tratamento com ivermectina melhorou a depuração bacteriana, parâmetros histopatológicos pulmonares e a secreção diferencial de citocinas, destacando uma possível ação imunomodulatória da ivermectina.