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A curcumina atenua os déficits cognitivos e o estresse oxidativo em animais sobreviventes a sepse
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-12-15) Reis, Letícia; Paiva, Alexandre Giusti; Costa, Heloisa Helena Vilela; Ribeiro, Deidiane Elisa; Garcia, Tayllon Dos Anjos; Lima, Graziela Domingues De Almeida
A sepse é caracterizada por um conjunto de reações sistêmicas em resposta ao agente infeccioso. O seu desfecho clínico induz lesões cerebrais irreversíveis, as quais podem culminar em danos cognitivos de longo prazo em pacientes sobreviventes à sepse. A propriedade neuroprotetora da Cúrcuma longa (curcumina), tem sido amplamente investigada em diversos distúrbios neuropsiquiátricos. Frente a isso, o presente trabalho propôs avaliar o efeito da curcumina sobre as alterações cognitivas e neurodegenerativas induzidas pela sepse. Inicialmente, dividimos aleatoriamente ratos Wistar machos em dois grupos experimentais: controle (Sham) e sépticos (CLP), os quais foram submetidos a indução da sepse pela cirurgia de ligação e perfuração cecal. A caracterização do comportamento cognitivo foi realizada 10, 20 ou 30 dias após a indução da sepse por meio dos testes comportamentais de campo aberto, reconhecimento de objetos e labirinto aquático de Morris. Outra leva de animais foi submetida à cirurgia de ligação e perfuração cecal e ao tratamento por gavagem com veículo ou curcumina (50 mg/kg) durante sete dias consecutivos, e o comprometimento cognitivo foi avaliado no décimo dia após a indução da sepse por meio dos testes comportamentais supracitados. Imediatamente após o término desses testes, os animais foram eutanasiados, e o hipocampo discecado para avaliação do estado redox por meio dos níveis de ROS (pela técnica de fluorescência relativa de lucigenina), nitrosilação proteica, porcentagem de trap, GSH livre e total, TBARS e GSSG (pela técnica de captura de resíduos S-nitrosotióis). As análises do comportamento exploratório mostraram a ausência de prejuízo locomotor nos testes de campo aberto e labirinto aquático de Morris em todos os grupos e dias testados. Como resultado da caracterização do comportamento cognitivo, foi observado um acentuado déficit de cognição e das memórias de reconhecimento e espacial 10 dias após a indução da sepse, os quais permaneceram de forma tempo-dependete a essa condição clínica. Esse déficit cognitivo foi caracterizado pelo aumento do tempo de exploração ao objeto familiar e uma redução do tempo de exploração ao objeto novo e do índice de reconhecimento após 2h e 24h no teste de reconhecimento de objetos, além do aumento das latências para chegar à plataforma e para chegar ao quadrante alvo e pela redução do tempo de permanência no quadrante alvo no teste de labirinto aquático de Morris, quando comparado ao grupo Sham. Quanto aos animais que receberam o tratamento oral com curcumina (50 mg/kg), foi notada uma redução significativa dos prejuízos cognitivos e das memórias de reconhecimento e espacial, 10 dias após a indução da sepse quando comparado ao grupo CLP+veículo. Além disso, foi observado um intenso estresse oxidativo em animais CLP tratados com veículo, apontado pelo aumento expressivo de ROS, nitrosilação proteica e TBARS, além da redução dos parâmentros antioxidantes Trap e GSH livre e total quando comparado ao grupo controle, e o tratamento com curcumina foi eficazmente capaz de atenuar esses parâmetros. A análise do parâmetro GSSG não apontou diferença estatisticamente significativa entre os grupos testados.
Acesso aberto (Open Access)
Ação do nitróxido tempol sobre a atividade do complexo enzimático NADPH oxidase (Nox2) em neutrófilos
(Universidade Federal de Alfenas, 2016-09-02) Santos, Gérsika Bitencourt; Brigagão, Maísa Ribeiro Pereira Lima; Moretti, Ana Iochabel Soares; Colepicolo Neto, Pio; Pereira, Marília Gabriella Alves Goulart; Paula, Fernanda Borges De Araújo
A identificação de novos alvos para controlar o processo inflamatório é, provavelmente, o principal desafio que dificulta o desenvolvimento de novas drogas anti-inflamatórias. Assim, a modulação das vias de sinalização intracelulares em fagócitos desponta como uma forma interessante de alcançar este objetivo. No entanto, isso pode trazer como consequência a diminuição da defesa do hospedeiro contra patógenos. Este estudo teve como objetivo examinar se o nitróxido 4-hidroxi-2,2,6,6-tetrametil-1-piperidiniloxi (Tempol) exerce efeito sobre produção de oxidantes por neutrófilos inflamatórios através da regulação da atividade de proteínas quinases e da proteína dissulfeto isomerase (PDI), uma chaperona cujos sítios ativos contêm o motivo Cys-Gly-His-Cys (CXXC) e está envolvida na montagem do complexo enzimático NADPH oxidase (Nox2) de fagócitos. Vias bioquímicas diferentes foram ativadas para a liberação de espécies reativas de oxigênio por neutrófilos inflamatórios, e, paralelamente, a atividade de proteínas quinases foi determinada sob efeito de Tempol nos fagócitos. O nitróxido inibiu significativamente o burst oxidativo dos neutrófilos de maneira dependente da concentração. Este efeito foi detectado pelo consumo de oxigênio, onde a IC50 encontrada foi de 45±4 μM. Utilizando-se ensaios de quimioluminescência dependente de luminol ou de isoluminol, mostramos que o Tempol provocou um atraso no período de resposta latente da ativação de Nox2 dos neutrófilos sob diferentes estímulos. Coerentemente, o nitróxido inibiu a atividade de proteínas quinases de neutrófilos estimuladas por diferentes vias bioquímicas, como quantificado por ensaios quimioluminescentes e por teste dot blot. Nas mesmas condições, Tempol reduziu a atividade fungicida de neutrófilos contra Candida albicans. Na presença de Tempol a atividade redutase de PDI foi reversivelmente afetada tanto in vitro como em neutrófilos inflamatórios estimulados, cuja IC50 de 35±3,3 μM foi calculada através de metodologia de espectrofluorescência. Esta atividade inibitória foi confirmada com o método espectrofotométrico de enovelamento de insulina. Foi utilizada PDI recombinante para ser estudado o mecanismo de inibição que o Tempol exerce sobre a esta tiol óxido-redutase, através de espectrometria de massa. Na análise da proteína total, 1 e 4 moléculas de Tempol foram detectadas ligadas à proteína. No entanto, somente uma molécula do nitróxido foi encontrada ligada covalentemente à PDI. Mais especificamente, a Cys400 foi modificada por Tempol. Em conjunto, os resultados revelam um novo mecanismo do Tempol sobre a regulação de enzimas associadas à atividade do complexo Nox2 de neutrófilos inflamatórios, os quais apresentam aplicações clínicas potenciais para intervenção terapêutica em processos patológicos. Entretanto, o possível uso do Tempol como agente anti-inflamatório deve ser cauteloso, uma vez que este nitróxido diminuiu a resposta microbicida de neutrófilos.
The identification of new targets for controlling inflammatory processes is, almost certainly, the major challenge that hampers the development of new anti-inflammatory drugs. Thus, the modulation of intracellular signaling pathways in phagocytes emerges as an interesting way to achieve this goal. However, this strategy can bring the effect of lowering the host defense against pathogens. This study aimed to examine whether the nitroxide 4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethyl-1-piperidinyloxy (Tempol) has an effect on production of oxidants by inflammatory neutrophils through regulation of protein kinase activity and protein disulfide isomerase (PDI), a chaperone whose active sites containing the motif Cys-Gly-His-Cys (CXXC) and is involved in the assembly of the NADPH oxidase enzyme complex (Nox2) on phagocytes. Different biochemical pathways were activated for the release of reactive oxygen species by inflammatory neutrophils, and, in parallel, the protein kinase activities were determined under Tempol treatment of phagocytes. The nitroxide significantly inhibited oxidative burst of neutrophils in a concentration dependent manner. This effect was detected by oxygen consumption, where the IC50 was found to be 45±4 µM. By means of chemiluminescence luminol- or isoluminol-dependent assay, we showed that Tempol caused a delay in the lag period of neutrophils Nox2 activation under different stimuli. Accordingly, the nitroxide inhibited the activity of protein kinases in neutrophils stimulated by various biochemical pathways, as quantitated by chemiluminescent assays and dot blot test. Under the same conditions, Tempol reduced neutrophil fungicidal activity against Candida albicans. In the presence of Tempol, PDI reductase activity was reversibly affected both in vitro and in stimulated inflammatory neutrophils, whose IC50 of 35±3.3 µM was calculated by fluorescent methodology. This inhibitory activity was confirmed by the spectrophotometric insulin method. Recombinant PDI was used for the purpose of studying the mechanism of inhibition that Tempol exerts on this thiol oxide reductase enzyme, by mass spectrometry. In the analysis of total protein, 1 and 4 molecules of Tempol were detected bound to the protein. However, only one molecule of the nitroxide was found covalently linked to PDI. More specifically, Cys400 has been changed by Tempol. Together, these results reveal a novel mechanism of Tempol on the regulation of enzymes associated with Nox2 complex inflammatory activity of neutrophils, which have potential clinical applications for therapeutic intervention in pathological processes. However, the promising use of Tempol as an anti-inflammatory agent must be taken with caution, since this nitroxide decreased neutrophil microbicidal response.
Acesso aberto (Open Access)
Alterações neuroendócrinas e cardiorrespiratórias durante o choque séptico induzido pela ligadura e perfuração cecal (CLP)
(Universidade Federal de Alfenas, 2014-03-21) Santiago, Michael Brian; Paiva, Alexandre Giusti; Ventura, Renato Rizo; Passos Jr, Daniel Badauê; Reis, Luis Carlos
A síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SRIS), culminando com o choque séptico é uma das principais causas de morbidade e mortalidade nas unidades de tratamento intensivo (UTI). Diante disso, a busca por um completo entendimento da fisiopatologia desta SRIS, possibilitando o desenvolvimento de novas terapias, ainda é questão de grande interesse no meio científico. Portanto, o objetivo do trabalho foi verificar as alterações neuroendócrinas e cardiorrespiratórias, identificando as causas, durante o choque séptico experimental induzido pela ligadura de perfuração cecal (CLP; Cecal ligation and puncture). Durante o choque séptico induzido pela CLP houve um aumento da secreção de vasopressina (AVP) e ocitocina (OT) nas primeiras 4 horas após a cirurgia de CLP quando comparado com grupo controle (Sham), no entanto, 6 horas após a cirurgia de CLP a secreção desses hormônios diminui para valores basais apesar da queda da pressão arterial média (PAM) quando comparado com Sham, resultando em um quadro de deficiência da secreção de vasopressina. Angiotensina (ANG II) e peptídeo natriurético atrial (ANP) permaneceram aumentados durante as 6 horas observadas. O tratamento com salina hipertônica (SH) (NaCl 7,5%, 4 ml /kg) 6 horas após o CLP ou Sham, proporciou aumento na secreção de OT e ANP e queda da concentração plasmatica de ANG II, sem diferenças quando comparado ao Sham. A secreção de AVP foi maior durante 10 minutos após a aplicação de SH, restaurando transitoriamente a PAM, no entanto, 30 minutos após, a secreção de AVP permaneceu menor quando comparado com Sham, mesmo com o aumento da osmolalidade (sem diferença entre CLP e Sham). O tratamento intracerebroventricular (i.c.v.) com o bloqueador inespecífico da óxido nítrico sintase (NOS) (L-Name) promoveu aumento da secreção de AVP durante os 30 minutos após a administração de SH no grupo submetido a cirurgia de CLP quando comparado com Sham. Após uma segunda aplicação de SH, 30 minutos após a primeira aplicação, não foi observada diferença na secreção de AVP entre CLP e Sham. Tais resultados evidenciaram que neste quadro de choque séptico experimental a secreção de AVP está sendo bloqueada pela síntese de NO. O tratamento com hidroxietilamido isotônico (HES 4ml/kg; 8 ml/kg; 16 ml/kg) e hipertônico (Hyper-HES, 4 ml/kg) seis horas após a CLP não promoveu diferença na PAM e frequência cardíaca (FC) após 24 horas da cirurgia de CLP. No entanto, imediatamente após administração, o Hyper-HES promoveu aumento da PAM por 1 hora e aumentou a secreção de AVP e OT 5 minutos após a aplicação. A administração do HES não promoveu aumento da PAM imediatamente após a aplicação e também não alterou a secreção de AVP e OT, exceto a dose 16 ml/kg que promoveu aumento da secreção de OT. O tratamento prévio com antagonista de AVP (V1), aboliu a resposta pressora desencadiada pela administração de Hyper-HES. Do mesmo modo, o tratamento prévio com antagonista de OT, não alterou as respostas da PAM após aplicação e Hyper-HES e HES, sugerindo que apenas as soluções hipertônicas (cristaloides ou colóides) são eficazes em restabelecer a pressão arterial durante o choque séptico por aumentar a secreção de AVP. Após 24 horas da cirurgia de CLP a PAM permaneceu baixa e sem alterações na FC quando comparado com grupo Sham. Neste mesmo tempo, observamos uma atenuação das respostas barorreflexas e quimiorreflexas acompanhada por um menor número de neurônios positivos para cFOS no núcleo do trato solitário comissural (NTSc) e intermediário (NTSi) após intermitente ativação do quimiorreflexo quando comparado com o grupo Sham, que persiste mesmo restaurando a PAM. O pré-tratamento com L-Name e Aminoguanidina i.c.v. (Ag, bloqueador específico da NOS induzida) promoveram uma atenuação dos déficitis da resposta quimiorreflexa. Além do mais, o tratamento com Ag promoveu atenuação da queda no número de neurônios positivos para cFOS (NTSc e NTSi) após intermitente ativação quimiorreflexa, sugerindo o envolvimento do NO na deficiência da resposta quimioreflexa durante o choque séptico experimental.
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Amostragem direta de sorvente sólido magnético em espectrometria de absorção atômica com chama para a determinação de chumbo em água.
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-10-27) Costa, Lucimara Mendonça; Figueiredo, Eduardo Costa De; Luccas, Pedro Orival; Santos, Mariane Gonçalves; Rodrigues, Jairo Lisboa; Lopes, Aline Soriano
Esta tese propõe um sistema inédito de amostragem direta de sorvente sólido magnético para análises por espectrometria de absorção atômica por chama (DMSS- FAAS, do inglês direct magnetic solid sampling flame atomic absorption spectrometry). Um aerogel magnético de óxido de grafeno (M-GOA) foi sintetizado e caracterizado por microscopia eletrônica de transmissão, porosimetria de sorção de gases, espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourrier, Raman, análise termogravimétrica, raio-X e magnetômetro de amostra vibratória. O material foi então empregado na extração em fase sólida dispersiva magnética (d-MSPE) de chumbo em amostras de água. Em seguida, uma haste metálica magnetizada por um ímã de neodímio foi mergulhada no frasco de amostras e as partículas de M-GOA foram capturadas em sua ponta. A haste metálica foi então inserida na base da chama do FAAS, as partículas foram aquecidas perdendo a suscetibilidade magnética, arrastadas pelo fluxo da chama, e o chumbo foi atomizado, absorvendo radiação proporcional a sua concentração. pH e volume da amostra, massa de sorvente e tempo de agitação foram otimizadas por planejamento fatorial 2 4 e matriz de Doehlert. O estudo dos íons interferentes foi conduzido por planejamento fatorial 24 e 23 para avaliar a influência de Al3+, Cr3+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Mn2+, Ba2+, Mg2+ , Li+ , Na+ , K+ , Ca2+, F- , NO3 - , SO4 2- , NO2 - , CN- e Cl- na determinação de chumbo. Nenhuma interferência foi significativa nas concentrações dos respectivos íons em amostras reais. O método foi validado e os seguintes parâmetros analíticos foram obtidos: faixa linear de 5 a 180 μg L-1 ; LD de 1,30 μg L -1 e LQ de 4,34 μg L -1 . A sensibilidade do método DMSS-FAAS foi 41 vezes maior quando comparada a análise de chumbo pelo método convencional em que o chumbo foi eluído e analisado por FAAS via sistema de nebulização sem a etapa de pré- concentração. A detectabilidade do método proposto foi suficiente para a determinação de chumbo em águas, de acordo com os limites estabelecidos pela portaria GM/MS, no 888/2021, Ministério da Saúde (10 μg L-1 para água potável), podendo ser equiparada a outras técnicas analíticas com sensibilidades superiores como GFAAS e TS-FF-AAS. O desempenho do método também foi avaliado para íons cádmio, cobre e chumbo empregando os materiais nanotubos magnéticos de carbono (M-CNTs), nanotubos magnéticos de carbono de acesso restrito (M-RACNTs), ácido metacrílico-co- etilenoglicol dimetacrilato) (M-PMA), nanopartículas magnéticas revestidas com casca de laranja em pó (M-OPP) e nanopartículas cobertas com SiO2 (M-TEOS). Os sinais analíticos obtidos aumentaram significativamente quando comparados ao método tradicional de detecção por FAAS evidenciando alta aplicabilidade do método proposto. As principais vantagens apresentadas por este método foram simplicidade, baixo custo, alta frequência analítica, alta detectabilidade, reprodutibilidade e alto potencial para a determinação de metais em amostras de água.
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Análise da ação do canabidiol no modelo experimental de distrofia muscular de Duchenne
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-07-03) Ferreira, Laís Leite; Gamero, Angel Mauricio Castro; Ionta, Marisa; Silva, Marcelo Aparecido Da; Aissa, Alexandre Ferro; Moraes, Luís Henrique Rapucci
A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é um distúrbio genético grave, ligada ao cromossomo X, que causa degeneração progressiva da musculatura esquelética. O canabidiol (CBD) exerce diversos efeitos benéficos, incluindo propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes. Diante do potencial ação benéfica do CBD, neste estudo verificamos o efeito in vitro do óleo de CBD full spectrum na viabilidade da fibra muscular distrófica e do efeito in vivo na hepatoxicicidade, mionecrose, inflamação e estresse oxidativo do modelo de DMD. Para análise in vitro, utilizouse células distróficas de camundongos mdx, tratadas com CBD full spectrum e foi avaliada a viabilidade celular por MTT. Na análise in vivo utilizou-se duas linhagens de camundongos sendo uma C57BL/10 (BL10) e a outra linhagem de camundongo mdx, esta última dividida em três grupos, sendo o primeiro grupo tratado com salina (mdxSAL; n=7), o segundo grupo tratado com óleo de semente de uva (mdxOU; n=7) e o terceiro grupo tratado com óleo de CBD full spectrum (mdxCBD; n=7) 10mg/Kg durante 14 dias. Após o tratamento, foi analisado o biomarcador Creatina quinase (CK) pelo sangue, a histomorfometria dos hepatócitos e os níveis de glicogênio hepático, além da histopatologia dos músculos diafragma (DIA) e quadríceps (QUA), analisando fibras mionecróticas, processos inflamatórios e o estresse oxidativo. No estudo in vitro, óleo de CBD full spectrum produziu efeito citotóxico de maneira dosedependente nas células musculares de camundongos distróficos. No estudo in vivo, o tratamento com óleo de CBD full spectrum aumentou o glicogênio hepático produzindo melhorias do fenótipo distrófico do camundongo mdx. Na análise dos músculos DIA e QUA, o tratamento com óleo de CBD full spectrum, preveniu o processo da mionecrose, reduzindo os níveis séricos de CK, a presença de núcleos centrais e marcação positiva ao IgG no tecido muscular distrófico. Preveniu a inflamação, reduzindo a área inflamatória, a presença de macrófagos e os níveis de NF-κB. Além disso, preveniu o estresse oxidativo, aumentando a ação antioxidante das moléculas CAT e GSH e evitou a instalação e exacerbação precoce do estresse oxidativo ainda em estágios iniciais da doença, com a diminuição da lipofuscina no músculo distrófico dos camundongos mdx. O tratamento com de óleo de CBD full spectrum demonstrou ser seguro e eficaz na redução dos parâmetros diretos e indiretos de avaliação da miopatia da DMD em estágio iniciais da doença. Os resultados indicam que o óleo de CBD full spectrum pode representar uma nova abordagem promissora para tratamento da DMD.
Acesso aberto (Open Access)
Análise da microbiota em fase aguda da esquistossomose hepática e intestinal e a possível interação de espécies de Schistosoma e bactérias
(Universidade Federal de Alfenas, 2021-03-02) Araújo, Matheus Pereira De; Marques, Marcos José; Dias, Amanda Latércia Tranches; Rodrigues, Maria Rita; Caldas, Ivo Santana; Colombo, Fabio Antonio
A esquistossomose, causada por espécies do trematódeo Schistosoma, é uma doença negligenciada, muito comum em países em desenvolvimento, e mais de 200 milhões de pessoas necessitam de tratamento. Na evolução da esquistossomose há um comprometimento da estrutura morfológica e funcional do trato gastrointestinal. Nestas condições, as bactérias da própria microbiota intestinal podem chegar à corrente sanguínea, ou se associar ao verme adulto e ovo. Assim, no presente trabalho, foi realizada uma revisão literária a respeito da interação microbiota, geohelmintos e esquistossomose. Experimentalmente, a composição da microbiota de camundongos BALB/c em fase aguda da esquistossomose mansônica e japônica e os eventuais impactos da infecção no intestino e no fígado foram analisados. Houve divisão de 5 grupos de animais: CBr controle do Brasil e SmBr infectado com S. mansoni do Brasil; CJp controle do Japão; SmJp infectado com S. mansoni no Japão e SjJp infectado com S. japonicum no Japão. Desta forma, a análise da microbiota intestinal foi realizada a partir da obtenção do DNA das fezes de camundongos e posterior sequenciamento metagenômico. Embora a contagem de Unidades Formadoras de Colônia (UFC) nas fezes dos infectados (SmBr) foi maior que no controle, esta diferença não foi estatisticamente significativa (p = 0,3637), assim como nos grupos SmJp e SjJp (p = 0,5564). Os resultados de metagenômica para SmBr indicam um aumento no número de bactérias pertencentes ao filo Bacteroidetes (56,6% para 77%) e diminuição do filo Firmicutes (37,5% para 13,9%) na microbiota intestinal. Os resultados do PCR quantitativo para o filo Bacteroidetes confirmaram os resultados obtidos na metagenômica, encontrando maior quantidade no grupo SmBr, assim como diminuição de Firmicutes. Os fígados dos animais dos grupos controle e infectado foram obtidos também para avaliar a composição da microbiota, e somente os animais infectados apresentaram bactérias no fígado. A análise molecular mostra a presença de bactérias do filo Firmicutes, Bacteroidetes e Proteobacterias. Quatro espécies de bactérias foram isoladas do fígado dos animais SmBr e a identificação dessas foi realizada pela técnica de MALDI-TOF (Bordetella hinzii, Haemophilus haemolyticus, Lactococcus garvieae e Escherichia coli); SmJp (Staphylococcus nepalensis e Staphylococcus sciuri) e SjJp (Enterococcus galinarum, Staphylococcus sciuri e Paenibacillus). Ensaios para determinar o perfil de sensibilidade das bactérias à diferentes antibióticos (Clindamicina, Doxiciclina, Eritromicina, Gentamicina, Levofloxacino e Sulfametoxazol + Trimetoprima) mostraram que todas as espécies estudadas apresentaram sensibilidade para Gentamicina. Este antibiótico apresentou maior eficácia tanto pela análise de Concentração Inibitória Mínima como pela Concentração Microbicida Mínima. Para Eritromicina, as bactérias B. hinzii, L. garvieae, S. nepalensis e S. sciuri apresentaram sensibilidade. Já para o Levofloxacino, H. haemolyticus, E. coli, L. garvieae, S. nepalensis e S. sciuri foram sensíveis. Nos cortes histológicos, foi possível observar granulomas esquistossomóticos do tipo exsudativo no fígado; e no intestino foram identificados retenção de ovos dos parasitos na camada mucosa e aumento da celularidade, a qual foi constituída por acúmulo de células mononucleares e polimorfonucleares. Foi possível verificar também que algumas bactérias são capazes de aderir à superfície dos vermes adultos (E. coli) e dos ovos (L. garvieae) de S. mansoni. Os resultados obtidos indicam uma alteração na microbiota intestinal com possível disseminação das bactérias para outros órgãos, tais como o fígado, evidenciando uma possível translocação bacteriana
Schistosomiasis, caused by species of the trematode Schistosoma, is a neglected disease, very common in developing countries, and more than 200 million people need treatment. In the evolution of schistosomiasis there is a compromise in the morphological and functional structure of the gastrointestinal tract. Under these conditions, bacteria from the intestinal microbiota itself can reach the bloodstream, or associate with the adult worm and egg. Thus, in the present work, a literary review was carried out regarding the microbiota, geohelminth and schistosomiasis interaction. Experimentally, the composition of the BALB/c mice microbiota in the acute phase of mansonic and japanese schistosomiasis and the possible impacts of the infection on the intestine and liver were analyzed. There was a division of 5 groups of animals: CBr control from Brazil and SmBr infected with S. mansoni from Brazil; CJp control of Japan; SmJp infected with S. mansoni in Japan and SjJp infected with S. japonicum in Japan. Thus, the analysis of the intestinal microbiota was performed by obtaining the DNA from the feces of mice and subsequent metagenomic sequencing. Although the count of Colony Forming Units (CFU) in the feces of the infected (SmBr) was higher than in the control, this difference was not statistically significant (p = 0.3637), as well as in the SmJp and SjJp groups (p = 0.5564). The results of metagenomics for SmBr indicate an increase in the number of bacteria belonging to the phylum Bacteroidetes (56.6% to 77%) and a decrease in the phylum Firmicutes (37.5% to 13.9%) in the intestinal microbiota. The results of the quantitative PCR for the phylum Bacteroidetes confirmed the results obtained in the metagenomics, finding a greater quantity in the SmBr group, as well as a decrease in Firmicutes. The livers of the animals in the control and infected groups were also obtained to evaluate the composition of the microbiota, and only the infected animals had bacteria in the liver. Molecular analysis shows the presence of bacteria from the phylum Firmicutes, Bacteroidetes and Proteobacterias. Four species of bacteria were isolated from the liver of SmBr animals and their identification was performed using the MALDI TOF technique (Bordetella hinzii, Haemophilus haemolyticus, Lactococcus garvieae and Escherichia coli); SmJp (Staphylococcus nepalensis and Staphylococcus sciuri) and SjJp (Enterococcus galinarum, Staphylococcus sciuri and Paenibacillus). Tests to determine the sensitivity profile of bacteria to different antibiotics (Clindamycin, Doxycycline, Erythromycin, Gentamicin, Levofloxacin and Sulfamethoxazole + Trimethoprim) showed that all species studied showed sensitivity to Gentamycin. This antibiotic showed greater efficiency both by the analysis of Minimum Inhibitory Concentration and by the Minimum Microbicide Concentration. For Erythromycin, the bacteria B. hinzii, L. garvieae, S. nepalensis and S. sciuri showed sensitivity. As for Levofloxacino, H. haemolyticus, E. coli, L. garvieae, S. nepalensis and S. sciuri were sensitive. In histological sections, it was possible to observe exudative schistosomal granulomas in the liver; and in the intestine, egg retention of parasites in the mucous layer and increased cellularity were identified, which consisted of accumulation of mononuclear and polymorphonuclear cells. It was also possible to verify that some bacteria are able to adhere to the surface of adult worms (E. coli) and eggs (L. garvieae) of S. mansoni. The results obtained indicate a change in the intestinal microbiota with possible spread of bacteria to other organs, such as the liver, showing a possible bacterial translocatio
Embargo
Análise do feedforward, eletromiografia e força muscular em voluntários do grupo de risco para covid-19 submetidos a um protocolo de exercícios domiciliares: ensaio clínico randomizado, controlado, cross over
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-09-22) Silva, Roberta De Oliveira E; Carvalho, Leonardo César; Hermes, Tulio De Almeida; Oliveira, Fabricio Borges; Pegorari, Maycon Sousa; Iunes, Denise Holanda
Introdução: O Diabetes Mellitus (DM) é um distúrbio metabólico grave que leva à hiperglicemia crônica, condição patogênica que pode incluir defeitos na secreção e/ou ação da insulina. O DM tipo 2 (DM2) pode induzir a neuropatia e consequente redução da força muscular. Este estudo foi dividido em quatro etapas. Na primeira etapa objetivou-se aplicar o Questionário de Atividades de autocuidado com o Diabetes (QAD) em voluntários portadores de DM2 durante a pandemia do COVID-19; na segunda etapa foi proposto um instrumento para mensurar a força isométrica dos músculos flexores dos pododáctilos individualmente por meio de um dinamômetro isométrico específico de fácil reprodutibilidade e baixo custo; na terceira etapa o objetivo foi comparar os resultados da termografia, oximetria e baropodometria dos pés antes e após um programa de exercícios para a musculatura intrínseca dos pés em voluntários portadores de DM2; e na quarta etapa o objetivo foi avaliar os efeitos de dois protocolos de exercícios domiciliares de fortalecimento para os pés sobre os sintomas neuropáticos e as atividades de autocuidado em DM2, avaliar o tempo de resposta motora por meio do PhysioPlay e avaliar a força do músculo flexor curto dos dedos através da eletromiografia e dinamometria de ambos os pés de voluntários portadores de DM2. Método: 109 voluntários com diagnóstico prévio de DM2 foram randomizados em dois grupos: Controle (GC) e Intervenção (GI). Ambos realizaram dois protocolos de exercícios domiciliares por 30 minutos três vezes na semana para fortalecimento da musculatura intrínseca dos pés, sendo avaliados antes e após cada protocolo. Houve um período de washout de dois meses, após esse período as intervenções foram realocadas de modo cross-over. Resultados: O QAD apresentou alterações significativas no GI; no instrumento proposto os resultados demonstraram ICC excelente em todos os dedos; houve diferença estatística em alguns parâmetros da termografia principalmente no GI; a oximetria apresentou aumento no terceiro e quarto dedos esquerdo no GC e diminuição no primeiro e quarto dedos direito no GI; na baropodometria, houve aumento da pressão média em ambos os pés nos dois grupos com os olhos abertos, a pressão máxima com os olhos fechados diminuiu no pé direito no GI, os dados estabilométricos apresentaram diferença estatística na maioria dos parâmetros em ambos os grupos; o ESN apresentou sintomas leves com diminuição após exercícios em ambos os grupos; no ECN houve aumento do escore no GI; no tempo de resposta motora do GC com os olhos abertos houve diminuição do tempo na abdução do quadril direito à 10° e aumento à 20°, com os olhos fechados houve diminuição no quadril esquerdo à 10°, no GI houve aumento no quadril direto à 10°; a eletromiografia não apresentou resultados significativos; na dinamometria a força dos músculos flexores dos dedos aumentou no GC no hálux e quarto dedo direito e, no segundo, terceiro e quarto dedos esquerdo e no GI aumentou no segundo, quarto e quinto dedos direito e, segundo, terceiro e quarto dedos esquerdo. Conclusão: Os achados atendem ao objetivo do estudo evidenciando que os exercícios para o fortalecimento da musculatura intrínseca dos pododáctilos foi um fator primordial para a mudança dos parâmetros avaliados. Podemos perceber que pequenas mudanças na rotina de cuidado de voluntários diabéticos são essenciais para a melhora do enfrentamento da doença e prevenção de lesões associadas.
Acesso aberto (Open Access)
Análise dos efeitos agudos e tardios da cirurgia de reconstrução do ligamento cruzado anterior com tendão flexor na cinemática, ativação muscular, equilíbrio e funcionalidade subjetiva dos membros inferiores
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-12-09) Oliveira, Marcelo Lima De; Carvalho, Leonardo César; Iunes, Denise Hollanda; Simão, Adriano Prado; Carvalho, Eduardo Elias Vieira De
A ruptura do ligamento cruzado anterior (LCA) tem sido cada vez mais comum em esportes recreacionais e de alto desempenho. Existem algumas técnicas que foram desenvolvidas para a reconstrução de LCA, todas elas com seus pontos positivos e negativos. Dentre elas vão se destacar a técnica com enxerto autólogo do terço medial do tendão patelar, e a técnica com enxerto autólogo de tendão da musculatura flexora de joelho, mais especificamente dos músculos grácil e semitendinoso. Apesar de uma literatura abundante a respeito da cirurgia de reconstrução de LCA e seus resultados, existem poucos dados comparando diretamente os efeitos agudos de ambas às técnicas cirúrgicas em se tratando de eletromiografia, principalmente da musculatura proximal de quadril, cinemática de membros inferiores e sua funcionalidade. Foram realizados 3 estudos, onde, o objetivo do estudo 1 foi investigar as alterações cinemáticas agudas, estratégias de equilíbrio corporal e distribuição de peso nos membros operados e não operados no seguimento de curto prazo, no período pósoperatório (15 dias). O estudo 2 teve como objetivo investigar os efeitos imediatos ou agudos da reconstrução do LCA na ativação muscular dos membros inferiores. O objetivo do estudo 3 foi investigar as alterações cinemáticas, eletromiográficas, do equilíbrio e funcionalidade subjetiva no período de 3 meses após cirurgia de reconstrução do LCA. A avaliação simultânea da cinemática tridimensional, eletromiografia e equilíbrio dos membros inferiores em apoio bipodal (por baropodometria) foi realizada durante o miniagachamento com os olhos abertos e fechados, em três momentos: pré e pós-operatórios (15 dias e 3 meses). Os resultados destes estudos indicam que após a lesão do LCA e, posteriormente a reconstrução cirúrgica, foram encontradas importantes alterações biomecânicas de membros inferiores, tanto na articulação do quadril quanto na articulação do joelho, no membro operado e no membro não operado. Ao longo do processo de reabilitação, foi demonstrado uma melhora no padrão de movimento, melhora na ativação muscular, melhora do equilíbrio, menor distribuição de peso no membro operado e uma melhora na função subjetiva e sintomatologia do joelho.
Acesso aberto (Open Access)
Análise metabolômica e biológica de óleos essenciais de espécies da família myrtaceae com ação anti-T.cruzi.
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-09-23) Maiolini, Tatiane Cristina Silva; Soares, Marisi Gomes; Ambrozin , Alessandra Regina Pepe; Oiano Neto , João; Santos, Regina Maria Geris Dos; Groote, Suzanne Christine Therese Soares De
A Doença de Chagas (DC), causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi, é uma Doença Tropical Negligenciada (DTN) que acomete aproximadamente sete milhões de pessoas em todo o mundo com um arsenal terapêutico restrito, sendo o medicamento benzonidazol, o único utilizado para este tratamento no Brasil. A família Myrtaceae é uma das mais importantes da flora brasileira, uma vez que apresenta espécies comestíveis e, principalmente, por apresentar relatos de diversas atividades biológicas. No presente estudo, os óleos essenciais de 18 espécies desta família foram submetidas à técnica de destilação por arraste à vapor para que os mesmos fossem extraídos. Além disso, foram desreplicados 177 compostos diferentes com concentrações compreendendo a 90,4 - 98,1% da composição total. As amostras dos óleos foram submetidas ao método estatístico multivariado não supervisionado PCA, onde foi possível verificar a similaridade e dissimilaridade das diferentes espécies em estudo. Além do mais, foi realizado o ensaio de atividade anti- T.cruzi in vitro. Destes, oito óleos essenciais foram considerados promissores (IC 50 < 10 µg/mL e SI > 10) contra o protozoário: Calyptranthes brasilienses, Calyptranthes widgreniana, Campomanesia xanthocarpa, Eugenia acutata, Eugenia florida, Eugenia widgrenii, Plinia cauliflora, e Psidium guajava. A análise pelo método estatístico multivariado supervisionado PLS-DA, permitiu identificar compostos (pelo tempo de retenção e índice de Kovats) e apontou (E)-cariofileno, α-humuleno, limoneno, óxido de cariofileno e α-copaeno desempenhando um papel importante na ação anti-T. cruzi. Por fim, foi realizado o estudo sazonal de seis espécies do estudo inicial, ao qual foram desreplicados 184 compostos diferentes com concentrações compreendendo entre 90.1 – 98.15% da composição total dos OEs. Além disso, também foi realizado ensaio para atividade anti-T.cruzi ao qual verificou que em diferentes estações do ano, uma espécie pode ser considerada promissora para tal atividade biológica ou não. Concomitante à sazonalidade, pode-se inferir que a temperatura e índice pluviométrico são fatores importantes e que influenciam na composição química e concentração dos OEs. Assim temos que, deste estudo três espécies produziram OEs promissores (CI 50 < 10 µg/mL e SI > 10) contra o protozoário em diferentes estações do ano: E. uniflora, nas estações primavera, verão e outono; P. cauliflora, nas estações outono e inverno e P. guajava, nas estações primavera e inverno. Os resultados obtidos demonstraram o potencial dos óleos essenciais de espécies de Myrtaceae como fontes valiosas de compostos bioativos contra o T. cruzi.
Acesso aberto (Open Access)
Análise químico-farmacêutica de rosuvastatina cálcica comprimido e cápsula
(Universidade Federal de Alfenas, 2016-12-09) Ângelo, Marilene Lopes; Araújo, Magali Benjamim De; Cazedey, Edith Cristina Laignier; Chorilli, Marlus; Leite, Mateus Freire; Pereira, Gislaine Ribeiro
Rosuvastatina cálcio é uma estatina sintética utilizada para tratar a hipercolesterolemia, inibindo a 3-hidroxil-3-metilglutaril coenzima A (HMG-CoA) redutase. No Brasil, este fármaco é amplamente comercializado como comprimidos e cápsulas manipuladas. Contudo, não há nenhum método descrito em compêndios oficiais para as formas de dosagem mencionadas. O presente trabalho propôs o desenvolvimento e validação de métodos de análise quantitativa de rosuvastatina cálcica (cromatografia líquida de alta eficiência e espectrofotometria) e ensaios de dissolução (também realizados em meio biorrelevante) para as formas farmacêuticas cápsulas e comprimidos. Foi avaliado também a estabilidade de rosuvastatina cálcica e o impacto do polimorfismo na liberação deste fármaco em formulações de cápsulas. Os métodos de análise quantitativos não apresentaram diferença estatística para o nível de significância de 5%. No estudo de degradação forçada de rosuvastatina cálcica, foi observada sua instabilidade frente às degradações ácida e fotolítica, com caracterização dos produtos formados, seguido de aplicação do método em amostras reais. Diferentes formulações de liberação imediata produzidas com matéria-prima comercial (sólido amorfo) foram analisadas para o desenvolvimento do ensaio de dissolução, empregando a forma cristalina M de rosuvastatina cálcica. Esta forma foi recristalizada em nosso laboratório e mostrou uma menor solubilidade aquosa quando comparada com a forma amorfa. A formulação com esta forma cristalina mostrou uma taxa de dissolução lenta que demonstra o impacto do polimorfismo nesta molécula quando utilizada a forma farmacêutica cápsula. Além de identificar diferentes formas sólidas, o ensaio discriminativo desenvolvido permitiu distinguir formulações com diferentes composições de excipientes. Um ensaio de dissolução foi desenvolvido e validado para a forma farmacêutica comprimido. Este ensaio foi utilizado para comparar produtos similares em relação ao produto referência. Os resultados mostraram que há características de liberação semelhantes para dois dos três produtos similares, em comparação com o produto referência Crestor®. Um estudo empregou como meio biorrelevante leite em pH = 6,4 nas mesmas condições de aparato e rotação definidos para cápsulas e comprimidos no ensaio discriminativo. Os resultados mostraram que ambas as formas farmacêuticas avaliadas apresentaram a mesma especificação sugerida para o meio utilizando tampão fosfato pH = 6,8. Assim, os métodos desenvolvidos neste trabalho contribuem para avaliação da qualidade, segurança e eficácia terapêutica de rosuvastatina cálcica, além de ampliar os conhecimentos científicos relacionados a esta estatina.
Acesso aberto (Open Access)
Análises de um substrato remanescente da mineração de bauxita, produção de vermicomposto a partir de resíduo do cogumelo shimeji e seu potencial sobre Megathyrsus maximus cv. Mombaça associado a adubação fosfatada
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-04-03) Rodrigues, Eduardo De Oliveira; Carneiro, Romero Francisco Vieira; Pinto, Lilian Villela Andrade; Gonçalves, Flávio Aparecido; Tréz, Thales, De Astrogildo E; Souza, Antônio Donizetti Gonçalves De
A mineração é uma atividade econômica importante para o município de Poços de Caldas/MG, onde apesar da sua reconhecida importância econômica, pode trazer sérias consequências para o ambiente, uma vez que necessitam de grandes escavações para a retirada do minério, deixando um substrato remanescente com relevantes restrições para o estabelecimento de plantas, sobretudo em decorrência da perda de matéria orgânica. Neste aspecto, os resíduos sólidos, consistem em outro importante problema ambiental enfrentado pela sociedade, e isso se deve, sobretudo, ao elevado crescimento demográfico mundial. O setor agroindustrial gera quantidades expressivas de resíduos, e se divide em muitos segmentos, áreas, produtos e serviços diversos. Assim, o presente trabalho se dividiu em 3 (três) etapas, sendo que a primeira constituiu na elaboração de um vermicomposto a partir do resíduo da agroindústria do cogumelo shimeji. A segunda na caracterização físico-químicas de um substrato remanescente de mineração de bauxita no município de Poços de Caldas. A terceira foi testar o estabelecimento da forrageira Megathyrsus maximus cv. Mombaça em substrato remanescente de mineração de bauxita com uso de dosagens de fósforo associadas ao vermicomposto produzido. O vermicomposto apresentou as seguintes concentrações em g/kg, respectivamente para os macronutrientes: N, P, K, Ca, Mg e S (15,5; 3,5; 2,7; 54,5; 8,4; 2,5), enquanto que as concentrações dos micronutrientes Zn, Fe, Mn, Cu e B, em mg/kg, foram respectivamente (210,0; 2369,0; 613,0; 52,0; 31,8). Na caracterização do substrato remanescente verificou-se a seguinte composição química média: pH de 5,57; 1,60 mg dm-3 de P; 26,23 de mg dm-3 de K; 0 cmolc dm-3 de Al; 1,57 cmolc dm-3 de Ca, 0,24 cmolc dm-3 de Mg, 3,22 cmolc. dm-3 de H, 5,10 cmolc. dm-3 de CTC, 36,53 % de V, 2,35 dag. dm-3 de MO, 2,43 mg dm-3 de Zn, 109,07 mg. dm-3 de Fe, 49,33 mg. dm-3 de Mn, 0,10 mg. dm-3 de Cu, 0,20 mg. dm-3 de B. Os teores de argila variaram de 50,5% a 64,7 %, areia de 18,6 a 37,0% e silte de 5,2 a 23,4%. Enquanto que a densidade de solo variou de 1,009 a 1,245 g/cm3 , a densidade de partículas de 1,961 a 2,410 g/cm3 e a porosidade total de 38,53 a 57,50. Tais avaliações se concentraram nas profundidades de 0-20; 20-40 e 40-60 cm. No estabelecimento da forrageira os tratamentos avaliados foram T1 (sem composto + 0 fósforo), T2 (com composto + 0 fósforo), T3 (sem composto + 60 ppm de fósforo), T4 (com composto + 60 ppm de fósforo), T5 (sem composto + 120 ppm de fósforo), T6 (com composto + 120 ppm de fósforo), T7 (sem composto + 240 ppm de fósforo) e T8 (com composto + 240 ppm de fósforo). Foram avaliados como resposta produções de matéria seca da parte aérea e acúmulos de macro e micronutrientes na massa seca produzida, em 2 cortes subsequentes (1° corte aos 90 dias e o 2º corte aos 120 dias), bem como a somatória desses cortes. Para a produção de matéria seca da planta, no corte 1, aplicando-se o tratamento com composto e 240 ppm de fósforo promoveu-se incremento de 2.283,3 % em relação ao não uso do composto e 0 de fósforo, e no corte 2 verificou-se um acréscimo de 641,6 % em relação ao não uso do composto e 0 de fósforo. O estabelecimento inicial da forrageira Megathyrsus maximus cv. Mombaça em substrato remanescente de mineração de bauxita no município de Poços de Caldas-MG é limitado, mesmo utilizando doses de fósforo recomendadas para cultura, na ausência de aplicação do vermicomposto orgânico. O acúmulo dos macros e micronutrientes nos tratamentos com uso do composto do Shimeji é maximizado pelas doses de P a exceção do Cobre.
Acesso aberto (Open Access)
Análises metabolômicas e influências de antifúngicos e da interação patógeno-hospedeiro na expressão gênica de adesinas e proteases em Candida albicans
(Universidade Federal de Alfenas, 2020-03-18) Oliver, Josidel Conceição; Dias, Amanda Latercia Tranches; Melhem, Marcia De Souza Carvalho; Padovan , Ana Carolina Barbosa; Dias, Marcos Vinicios Salles; Colombo, Fabio Antonio
As infecções fúngicas são um problema de saúde pública, especialmente em ambientes hospitalares, nos quais Candida spp. são as principais causadoras de infecções fúngicas invasivas. Dentre os fatores associados à virulência desse gênero destacam-se a produção de adesinas e aspartato proteases, que contribuem para a adesão e invasão dos tecidos do hospedeiro. Acredita-se que a exposição de Candida spp. a fagócitos e/ou a concentrações subinibitórias de antifúngicos pode alterar a expressão dessas proteínas e aumentar a virulência do fungo. Esse trabalho objetivou avaliar fatores associados a virulência tais como metabolômica e expressão dos genes SAP2, SAP4, SAP9, SAP10, HWP1 e ALS3, em isolados clínicos de C. albicans em interação com macrófagos e após exposição a concentrações inibitórias e subinibitórias (1/4 ou 1/8) de antifúngicos. Oito linhagens de C. albicans foram testadas quanto à sensibilidade aos antifúngicos anfotericina B, caspofungina e fluconazol e mostraram-se sensíveis, com exceção da 221-V que foi considerada resistente a caspofungina. A identificação dos isolados foi confirmada por MALDI-TOF, e o perfil metabolômico das linhagens foi analisado por RMN 1H. 66 moléculas foram encontradas no metaboloma, as quais estão envolvidas principalmente no ciclo do ácido tricarboxílico (TCA), na glicólise e gliconeogênese, no metabolismo dos aminoácidos, lipídeos e ácidos nucleicos. Ademais, foram encontradas algumas moléculas associadas a virulência fúngica. A linhagem 221-V destacou-se por apresentar altas concentrações de trealose, glicose, fumarato, arabitol e glicerol, essas moléculas estão associadas a resposta ao estresse oxidativo e osmótico. A partir dos resultados de metabolômica e sensibilidade foram selecionadas três linhagens para ensaios de fagocitose e expressão gênica. Após ensaios de interação Candida-macrófagos, foi observado que os macrófagos eliminaram 34,18±5,43%; 35,30±7,12% e 34,81±4,73% das células de leveduras, nas linhagens 121, 221-V e SC5314. Em relação a expressão gênica analisada por qPCR, a interação Candida-macrófago regulou positivamente a expressão dos genes SAP2 (13,85±1,95), ALS3 (5,81±0,91) e HWP1 (15,66±3,29) em comparação com o controle. Em geral, o tratamento com concentrações subinibitórias de anfotericina B, fluconazol e caspofungina aumentou os níveis de expressão dos genes analisados. A linhagem 221-V destacou-se por aumentar os níveis de expressão dos seis genes avaliados após exposição a caspofungina SAP2 (75,85±10,69), SAP4 (32,19±15,93), SAP9 (6,91±0,85), SAP10 (55,38±25,19), ALS3 (11,81±4,60) e HWP1 (41,38±8,69) em comparação com o controle. Esses resultados mostram que a interação com células hospedeiras e, principalmente, a exposição a concentrações subinibitórias de antifúngicos podem correlacionar-se com o aumento da virulência de C. albicans. Concentrações subinibitórias podem ser utilizadas como tratamento sistêmico empírico ou profilático para pacientes com fatores de risco para candidíase invasiva, bem como, pode incorrer em falha terapêutica devido a parâmetros farmacocinéticos e/ou farmacodinâmicos, a não adesão ao tratamento e erros de dosagem ou ao tempo entre as doses. Além disso, compreender a patogênese fúngica pode auxiliar na pesquisa e desenvolvimento de novas possibilidades terapêuticas, tais como novos fármacos para candidíase, contribuindo assim para a redução da incidência de morbidade e mortalidade associada a infecções fúngicas.
Acesso aberto (Open Access)
Antiparasitic and cytotoxic effect of benznidazole and new metronidazole/eugenol hybrids on Trypanosoma cruzi-induced infection in vitro and in vivo
(Universidade Federal de Alfenas, 2023-02-17) Santos, Elda Gonçalves Dos; Novaes, Rômulo Dias; Carneiro , Deila Rosély; Costa, Manuella Carvalho Da; Santos, Eliziária Cardoso Dos; Sarandy, Mariaurea Matias
Apesar de sua descoberta há mais de um século, a escassez de fármacos e os efeitos colaterais das terapias disponíveis permanecem como desafios para o tratamento da doença de Chagas. Nossa investigação primária foi por meio de uma revisão crítica detalhada da evidência sobre a relevância e a aplicabilidade do benznidazol em diferentes estágios da doença. Nossos achados demonstraram que o benznidazol exibe alta biodisponibilidade após administração oral em adultos e crianças. Porém, a posologia e o tempo de duração do tratamento recomendados muitas vezes são dissociados dos achados farmacodinâmicos. Além disso, os múltiplos métodos analíticos utilizados em acompanhamento pós-terapêutico de longo prazo suportam a evidência de que a maior eficácia terapêutica é obtida quando o tratamento com benznidazol é administrado em infecções agudas, piorando gradualmente à medida que a infecção se torna crônica. Diante de falha terapêutica, o tratamento com benznidazol nem sempre garante melhor prognóstico, podendo o paciente desenvolver a Cardiomiopatia Chagásica assim como pacientes não tratados. Como a evidência atual indica a necessidade de novas estratégias para o tratamento da doença de Chagas, em nossa abordagem secundária avaliamos a relevância antiparasitária in vitro e in vivo de dois novos híbridos moleculares de metronidazol e eugenol na infecção por T. cruzi. Nossos achados mostraram que os híbridos possuem efeito antiparasitário direto sobre o parasito atenuando o a taxa de infecção celular, a biossíntese de espécies reativas e o estresse oxidativo em cardiomiócitos infectados in vitro. Além disso, os híbridos foram bem tolerados em camundongos infectados por T. cruzi, não sendo relacionados à mortalidade ou hepatotoxicidade. Essas novas moléculas também induziram um efeito antiparasitário relevante ao atenuar a parasitemia e a miocardite in vivo. Diante dos resultados, um dos híbridos, denominado AD07 (híbrido metronidazol/dihidroeugenol nitrado na posição orto à hidroxila), destacou-se como candidato potencialmente relevante para o desenvolvimento de novos regimes medicamentosos mais seguros e eficazes para o tratamento da infecção por infecção T. cruzi.
Acesso aberto (Open Access)
Aplicação de bioindicadores e avaliação clínica em trabalhadores rurais expostos aos praguicidas organofosforados visando subsidiar a implantação de uma rede de atenção primária à saúde
(Universidade Federal de Alfenas, 2016-11-24) Silvério, Alessandra Cristina Pupin; Sakakibara, Isarita Martins; Antunes, Lusânia Maria Greggi; Silva, Jandira Maciel Da; Terra, Fábio De Souza; Azevedo, Luciana
O uso de praguicidas cresceu no Brasil nos últimos anos e, consequentemente, cresceram também os quadros de intoxicação provenientes da exposição à essas substâncias, principalmente em trabalhadores rurais. A classe dos praguicidas organofosforados (OF) é uma das mais utilizadas, todavia sua toxicidade também é elevada colocando, consequentemente, essa população em risco. Em vista disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar a exposição de trabalhadores rurais aos praguicidas OF por meio da determinação de bioindicadores associados à avaliação clínica, visando dar subsídios ao poder público para a implantação de uma rede de atenção primária à saúde. O estudo foi transversal, de base populacional e natureza avaliativa e aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade José do Rosário Vellano (UNIFENAS) e da Universidade Federal de Alfenas (UNIFAL-MG), pareceres nº 149718 e 415856, respectivamente) com uma amostragem total de 1027 trabalhadores rurais da Regional de Saúde de Alfenas, MG, considerando-se variáveis epidemiológicas, clínicas e riscos ocupacionais. Foram aplicados dois questionários estruturados, um para levantamento de dados epidemiológicos e clínicos dos trabalhadores rurais e o Instrumento de Avaliação da Atenção Primária (PCATool), além da determinação das colinesterases plasmática, eritrocitária e total, bem como as provas de função hepática e renal. Posteriormente, dessa população, selecionou-se dois grupos expostos ocupacionalmente à mistura complexa de praguicidas, contendo OF, (n = 94) e expostos ocupacionalmente à mistura complexa de praguicidas, sem OF, (n = 94), para a aplicação dos bioindicadores dialquilfosfatos urinários, testes de genotoxicidade (ensaios do citoma e do cometa) e análise polimórfica da CYP2C9, comparando esses resultados com aqueles obtidos em um grupo de indivíduos não expostos ocupacionalmente aos praguicidas, habitantes de zona urbana (n = 50). A partir das respostas observadas no PCATool (n = 1027), pode ser verificado que a despeito de uma alta cobertura, o risco ocupacional e suas consequências não têm sido detectados, pelos serviços de saúde da família, que se apresentam como não orientados à atenção primária. Quando comparado aos demais grupos de estudo, os resultados obtidos, a partir do levantamento de dados clínicos, mostraram alterações significativas no sistema nervoso central, sistema respiratório e auditivo nos trabalhadores expostos à mistura contendo OF. No tocante à determinação dos bioindicadores propostos, no grupo exposto ocupacionalmente à mistura contendo OF, a atividade da colinesterase plasmática, eritrocitária e total, encontrou-se diminuída em 63,8%, 12,8% e 14,8%, respectivamente, detecção de dialquilfosfatos na urina de 92,6% dos voluntários desse grupo e mudança significativa em todos os parâmetros de ensaio do citoma, quando comparado com o grupo não exposto ocupacionalmente aos praguicidas. O ensaio do cometa mostrou danos ao DNA por meio da diferença significativa entre os grupos expostos e o grupo não exposto ocupacionalmente, por meio da análise do Tail moment. A análise polimórfica de CYP2C9 mostrou maior frequência dos alelos *1/*2 e *1/*3, nos grupos expostos aos praguicidas em relação ao grupo não exposto ocupacionalmente, todavia, não foram observadas relações significativas entre essa e a atividade das colinesterases, a concentração de dialquilfosfatos na urina e os testes de genotoxicidade. Os resultados obtidos nesse pioneiro estudo, com uma população rural brasileira, sugerem que esses trabalhadores estão expostos aos praguicidas de forma arriscada, fato este que associado ao baixo grau de escolaridade e à precariedade de ações programáticas, aumenta a probabilidade de aparecimento de quadros de intoxicação, demonstrando assim a importância do treinamento das equipes de saúde para a promoção, a prevenção e o tratamento dessa população. O emprego de bioindicadores de dose interna, de efeito, de genotoxicidade e de suscetibilidade, em combinação, como utilizado no presente trabalho, é primordial para a avaliação da população rural, diminuindo a probabilidade do aparecimento de doenças advindas da exposição ocupacional aos praguicidas.
Acesso aberto (Open Access)
Aplicações de análises térmicas em fraude de alimentos e estudo de pré-formulação farmacêutica
(Universidade Federal de Alfenas, 2017-01-27) Brondi, Ariadne Missono; Trevisan, Marcello Garcia; Figueiredo, Eduardo Costa De; Luiz, Jaine Honorato Hortolan; Schiavon, Marco Antônio; Carneiro, Renato Lajarim
As técnicas de análise térmica, como a Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Termogravimetria (TG) e Análise Térmica Diferencial (DTA) são técnicas bem conhecidas utilizadas na caracterização físico-química de diferentes materiais. O presente trabalho descreve duas diferentes aplicações das análises térmicas: fraudes de alimentos e estudo de pré-formulação farmacêutica. Na primeira aplicação, em fraude de alimentos, foi realizado o estudo da detecção de adulteração do café por milho. As fraudes em café moído têm a finalidade de gerar mais lucro, mas também afeta a sua qualidade e altera suas propriedades nutricionais. Neste caso a adulteração do café por milho foi detectada e quantificada utilizando DSC e Espectroscopia no Infravermelho juntamente com modelos PCA (Análise de Componentes Principais) e PLS (Quadrados Mínimos Parciais). O nível de adulteração utilizada foi de 0,5 a 40% (m/m). Os modelos PCA foram capazes de diferenciar amostras adulteradas de não adulteradas, inclusive em níveis inferiores a 1% (m/m) de adulterante. Os modelos PLS apresentaram boa correlação entre os valores previstos e de referência, com RMSECV (Erro quadrático médio de validação cruzada) inferior a 3,5% para o modelo construído com os dados de DSC, e 2,7% para o modelo com dados de Espectroscopia no Infravermelho. A segunda aplicação envolve estudos de pré-formulação farmacêutica, tendo como alvos os fármacos besilato de anlodipino e olmesartana medoxomila. Ambos são medicamentos antihipertensivos que podem ser administrados isoladamente, em monoterapia, ou em associação farmacêutica. No desenvolvimento de um novo medicamento é necessário o conhecimento de propriedades físico-químicas do fármaco e dos excipientes envolvidos, e a estabilidade da formulação, a fim de que o novo medicamento não tenha suas propriedades e características alteradas ao longo do tempo, garantindo a segurança, eficácia e qualidade do produto. Primeiramente, os dados obtidos por DSC foram utilizados para determinar os parâmetros termocinéticos e termodinâmicos dos fármacos, e realizar o estudo de compatibilidade fármaco-excipiente, pela análise de misturas binárias 1:1 (m/m) dos fármacos e excipientes. Por FTIR com aquecimento foram analisadas misturas binárias 1:1 (m/m) dos fármacos e excipientes, e misturas ternárias 1:1:1 (m/m) contendo os fármacos anlodipino e olmesartana, e excipientes. Misturas binárias de cada fármaco com os excipientes na proporção 1:1 (m/m), e misturas ternárias, contendo os fármacos: besilato de anlodipino e olmesartana medoxomila, e excipientes na proporção 1:4:5 (m/m/m), foram analisadas por HPLC (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência) logo após o seu preparo e após serem armazenadas em câmara de estabilidade a 40±1 ºC e 75±5% de umidade relativa (UR) por 3 e 6 meses, e a 40±1 ºC a seco por 3 e 6 meses, com a finalidade de confrontar os resultados obtidos por DSC e FTIR. Os excipientes testados foram amido pré-gelatinizado, celulose, croscarmelose sódica, estearato de magnésio, álcool polivinílico, dióxido de titânio, talco, polivinilpirrolidona, lactose e polietilenoglicol. De acordo com os resultados obtidos por DSC, FTIR com aquecimento e HPLC foi possível observar que as condições de armazenamento são cruciais para a estabilidade da formulação. Sendo que em todos os casos o anlodipino se mostrou incompatível com o amido, a olmesartana com o PVP e lactose, e a associação farmacêutica com amido, celulose, croscarmelose, estearato de magnésio, álcool polivinílico, PVP, lactose e PEG.
Acesso aberto (Open Access)
As estratégias de transição agroecológica dos agroecossistemas no sul de Minas Gerais
(Universidade Federal de Alfenas, 2023-05-24) Neves, Janine Ameku; Imperador, Adriana Maria; Hayashi, Carmino; Fernandes, Lêda Gonçalves; Pedini, Sérgio; Botezelli, Luciana
Esta pesquisa buscou investigar, por meio da elaboração de cinco artigos, quais as estratégias utilizadas nos agroecossistemas do sul de Minas Gerais que contribuem com a transição agroecológica. O primeiro artigo, intitulado “A transição agroecológica: desafios para a agricultura sustentável” apresenta um histórico da agricultura alternativa, a teoria crítica da transição agroecológica e analisa os obstáculos para efetivar a transição agroecológica. O segundo artigo, “A certificação orgânica como ferramenta de gestão dos agroecossistemas” levanta as forças, fraquezas, oportunidades e ameaças inerentes ao processo de certificação orgânica. O terceiro artigo, “Perfil da produção orgânica no estado de Minas Gerais e as novas relações entre produção e consumo de alimentos” identifica a distribuição espacial da produção orgânica no estado de Minas Gerais e como são estabelecidas as novas relações de produção e consumo de alimentos a partir da garantia da qualidade orgânica. O quarto artigo, “As correlações entre os mecanismos de garantia da conformidade e a transição agroecológica” analisa dois sistemas com a conformidade orgânica garantida por organismos participativos à luz da teoria da transição agroecológica. O quinto artigo, “Avaliação do desempenho agroecológico de agroecossistemas do sul de Minas Gerais” utiliza a ferramenta criada pela FAO para avaliar quatro agroecossistemas orgânicos da agricultura familiar. O conjunto dos trabalhos destaca a região sul de Minas Gerais na produção de alimentos diversificados, café orgânico e das formas de comercialização em redes. A organização em núcleos de produtores e produtoras regularmente cadastrados favorece a governança responsável e o abastecimento local e regional, gerando confiança e rastreabilidade. Os agroecossistemas estudados estão em avançado processo de transição agroecológica e apresentam como pontos fortes a adoção das práticas e manejo agroecológicos e a identidade cultural mineira. A ferramenta de avaliação de desempenho é útil para o diagnóstico rápido, com custos reduzidos e deve ser adaptada à realidade local. Para alcançar níveis mais complexos, é importante considerar a integração de animais nos agroecossistemas, por exemplo a meliponicultura e os sistemas silvipastoris e buscar a autossuficiência na produção e uso de energia renovável, incluindo o uso irrisório de combustíveis fósseis.
Acesso aberto (Open Access)
Aspectos morfológicos e moleculares do desenvolvimento cerebral casta-específico em Apis mellifera
(Universidade Federal de Alfenas, 2019-10-30) Paula Junior, Delcio Eustaquio De; Barchuk, Angel Roberto; Soncini, Roseli; Simões, Zilá Luz Paulinho; Lourenço, Anete Pedro; Kalil, Bruna
As abelhas Apis mellifera são insetos conhecidos por sua eussociabilidade. Os adultos da espécie; zangões, rainhas e operárias, exibem nítida divisão de trabalho e sobreposição de gerações. Rainhas e operárias são um clássico exemplo de difenismo, o qual é determinado pela alimentação diferencial, geleia real ou geleia de operária, recebida entre o terceiro e quinto ínstar larval. A alimentação influencia o desenvolvimento cerebral em muitas espécies, inclusive em A. mellifera, que apresenta morfogênese cerebral diferencial entre rainhas e operárias. Durante o período larval o cérebro de rainhas mostra-se maior, com maior número de neuroblastos e também com maior taxa de proliferação celular. Todavia, é sabido que o cérebro adulto de operárias é proporcionalmente maior do que o de rainhas, deste modo, hipotetiza-se que ocorra uma inversão do tamanho cerebral durante o desenvolvimento pupal e/ou adulto-farato por intermédio da ação de genes hormonalmente modulados. Foram identificados, por meio de microarranjos de oligonucleotídeos, um conjunto de genes diferencialmente expressos no cérebro rainhas e operárias Pp, dentre os quais podem estar genes primordiais para o desenvolvimento cerebral casta específico. Assim, objetivou-se determinar a dinâmica morfológica e as bases moleculares do desenvolvimento cerebral durante o período pupal e adulto-farato em rainhas e operárias. Os resultados mostraram que o cérebro de operárias se desenvolve mais do que o de rainhas no período pupal e meados do desenvolvimento adulto-farto. Os corpos cogumelares e pedunculares ocupam maior área no cérebro de operárias e há lateralização anatômica relacionada a essas estruturas no cérebro de ambas as castas. Em busca dos determinantes moleculares da morfogênese cerebral, analisamos a expressão de 17 transcritos, tum, mnb, ATPsynβ, ant, InR-1, InR-2, ILP-1, ILP-2, Tor, hex 70a, hex70b, hex 110, lncov-1, LOC 726407, caspase-1, EcR-A e EcR-B, e verificamos que apenas hex 110 não é diferencialmente expressa entre as castas. Analisamos a resposta de 8 (tum, mnb, ATPsynβ, ant, ILP-1, ILP-2, lncov-1e caspase-1) deles aos hormônios HJ e 20E. Todos respondem a pelo menos um dos hormônios. Ademais, imunolocalizamos os produtos proteicos dos genes ATPsynβ e hex 70a e observamos que o primeiro apresenta localização citoplasmática e o segundo citoplasmática e nuclear. Em conjunto, nossos resultados permitem supor que o ambiente hormonal, mais especificamente os altos títulos de ecdisteroides, é interpretado de forma diferencial no cérebro de rainhas e operárias, gerando diferenças no padrão de expressão gênica que favorecem o desenvolvimento do cerebral em operárias. Ensaio de RNAi estão em andamento e verificarão os efeitos do silenciamento pós-transcricional de mnb, um gene que parece protagonizar o processo de morfogênese cerebral diferencial em A. mellifera durante o período pupal e aduto-farato.
Acesso aberto (Open Access)
Atividade antiparasitária, anti-inflamatória e estudos QSAR de fungos endofíticos obtidos em folhas de Poincianella pluviosa (sibipiruna)
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-11-23) Ferreira, Miller Santos; Soares, Marisi Gomes; Carvalho, José Carlos Tavares; Biavatti, Maique Weber; Lago, João Henrique; Luiz, Jaine Honorata Hortolan
Fungos endofíticos são aqueles que habitam espécies vegetais e estabelecem uma relação de endossimbiose, na qual auxiliam a planta hospedeira quanto a patógenos, doenças, e estresses abióticos em troca de nutrientes. Estes microrganismos são fontes de metabólitos secundários, que são foco de estudo na ciência de produtos naturais devido aos seus potenciais biológicos. O presente estudo realizou uma revisão sistemática sobre fungos endofíticos do gênero Aspergillus sp, o qual apresentou um grande número de metabólitos (230) com propriedades anti-inflamatória descritos na literatura. Dentre os compostos observados, quatro apresentaram inibição multialvo das principais vias pró-inflamatórias. Um banco de dados com moléculas anti-inflamatórias do gênero foi desenvolvido e um modelo de aprendizado de máquina QSAR para prever a inibição do óxido nítrico (NO) na via inflamatória foi criado. As folhas da espécie Poincianella pluviosa (Sibipiruna) foram coletadas e extratos e frações de fungos endofíticos, foram avaliados para a atividade anti-inflamatória (ex vivo) e antiparasitária (in vivo) . Os extratos FPD4 e FPD13 apresentaram moderada atividade anti-inflamatória pela inibição de PGE2 em 87.25% e 77.72%, respectivamente. Os extratos FPD4 e FPD13 foram analisados em HPLC-MS, sendo possível realizar a anotação dos compostos através dos espectros MS1 e MS2. Um total de 81substâncias foram desreplicadas utilizando banco de dados internos e 3 substâncias (Nigrosporolide, tirosol e decarestrictina A) foram isoladas e caracterizadas por técnicas espectroscópicas (RMN) e espectrométricas (UHPLC-MS/MS). Análises realizadas com extrato bruto FPD13 mostraram que as concentrações de 4 e 2 mg/mL do extrato, inibiram a eclosão larval dos ovos de Haemonchus contortus em 100% .A cepa de FPD13 foi isolada e classificada como Nigrospora. Zirmmini através das características morfológicas e sequenciamento da região ITS (―Internal Transcribed Spacer‖) com análise filogenética ( sequências de referência do GenBanK). Uma revisão clássica sobre o gênero de fungo endofítico monofilético Nigrospora demonstrou a existência de 271 metabólitos bioativos descritos na literatura, sendo pertencentes a 21 diferentes espécies/culturas do gênero. Além disso, os policetídeos, alcalóides e butenolídeos demonstraram ser as principais classes de metabólitos secundários descritos em fungos endofíticos.
Acesso aberto (Open Access)
Avaliação da atividade antitumoral de análogos de curcumina sobre células derivadas de câncer de mama
(Universidade Federal de Alfenas, 2019-09-30) Horvath, Renato De Oliveira; Ionta, Marisa; Oliveira, Jaqueline Carvalho De; Ladvocat, Ana Cláudia Chagas De Paula; Azevedo, Luciana; Miyazawa, Marta
O câncer de mama representa a principal causa de morte por câncer entre as mulheres em todo o mundo. Aproximadamente 75% dos tumores mamários diagnosticados expressam receptores para estrogênio (RE+) e, nesse caso, as terapias hormonais representam o tratamento de primeira escolha. Contudo, alguns tumores são resistentes ou tornam-se resistentes aos fármacos convencionalmente disponíveis e, portanto, é necessária a identificação de novos compostos que possam melhorar as propostas terapêuticas no combate ao câncer de mama. Os compostos naturais representam fontes importantes para a identificação de novos compostos com atividade antitumoral, pois produzem uma ampla variedade de metabólitos secundários. Em estudo prévio realizado pelo nosso grupo de pesquisa foi demonstrado que 3 análogos de curcumina (PQM-162, PQM-163 e PQM-164) reduziram significativamente a viabilidade de células derivadas de câncer mama (MCF-7), as quais expressam receptores para estrogênio. No mesmo estudo, foi demonstrado que a substância PQM-162 inibe a progressão do ciclo por modular o perfil de expressão de proteínas que regulam a transição G2/M e progressão pelas fases iniciais da mitose. Contudo, os mecanismos relacionados à atividade citotóxica de PQM-162 sobre células MCF-7 não foram investigados. Além disso, os efeitos de PQM-163 e PQM-164 não foram explorados. Assim sendo, o presente estudo objetivou avaliar o perfil de atividade das substâncias PQM-163 e PQM-164 sobre o comportamento proliferativo de células MCF-7 e compará-los com os observados para a substância PQM-162. Além disso, foi avaliado o perfil de atividade das substâncias sobre linhagens derivadas de tumor mama, classificado como triplo negativo (MDAMB- 231 e Hs578t), o qual é de difícil tratamento devido à ausência de alvos terapêuticos. A atividade pró-apoptótica das substâncias estudas também foi investigada nas linhagens MCF-7, Hs578t e MDA-MB-231. Os dados mostraram que PQM-163 e PQM-164 inibem a progressão do ciclo celular em células MCF-7, de modo semelhante ao observado para a PQM-162. Contudo a potência de PQM-163 e PQM-164 foi inferior a PQM-162. As linhagens triplo negativas mostraram-se mais resistentes aos tratamentos com as substâncias testadas em relação a linhagem MCF-7. Contudo foi possível observar eficiência na inibição do ciclo celular e indução de apoptose. Além disso, a molécula PQM-164 eficientemente sensibilizou a linhagem resistente à doxorrubicina MCF-7 (DXR-R) ao fármaco. Os dados obtidos no presente estudo são promissores e subsidiam novos estudos, usando modelo de roedores, para validar a atividade antitumoral observada in vitro e investigar os perfis farmacocinético e farmacodinâmico das substâncias PQM-162, PQM-163 e PQM-164.
Acesso aberto (Open Access)
Avaliação da atividade e do mecanismo de ação de derivados de pentamidina em diferentes espécies de Leishmania
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-12-12) Sepini, Patrícia Ferreira Espuri; Marques, Marcos José; Laurenti, Márcia Dalastra; Almeida, Letícia De; Lucas, Rosymar Coutinho De; Rodrigues, Maria Rita
A leishmaniose abrange doenças causadas por mais de 20 espécies de protozoários do gênero Leishmania, sendo um problema global de saúde pública. A quimioterapia é o principal tratamento, mas apresenta alta toxicidade, custo elevado, efeitos colaterais e resistência parasitária, destacando a necessidade de novas opções terapêuticas. A pentamidina, embora eficaz, é altamente tóxica, o que motiva a busca por derivados com menor toxicidade. Este estudo avaliou a atividade leishmanicida dos derivados de pentamidina (PQM 250 a PQM 262) em Leishmania (L.) amazonensis e Leishmania (L.) infantum chagasi e sua toxicidade em macrófagos de mamíferos. Além disso, foi investigado o mecanismo de ação dos compostos promissores, focando na bioenergética mitocondrial pelo potencial de membrana mitocondrial e produção de ATP, estresse oxidativo pela produção de peróxido de hidrogênio (H2O2), NADPH e atividade da tripanotiona redutase (TryR), além de apoptose, estudos in sílico e in vivo. Os compostos PQM 250, PQM 254 e PQM 261 mostraram atividade significativa contra formas promastigotas e amastigotas nas duas espécies estudadas e com menor toxicidade, sendo selecionados para estudos de mecanismo de ação. Os resultados com Leishmania (L.) amazonensis mostraram que a pentamidina e o PQM 254 causaram despolarização mitocondrial (10,9 e 10,44%, respectivamente) enquanto o PQM 261 induziu hiperpolarização (13,16%). O PQM 261 também aumentou a produção de ATP e NADPH (32 e 18,35%, respectivamente), enquanto a pentamidina reduziu esses parâmetros (73 e 35,86%, respectivamente), além da redução na produção de H2O2 (37,9%) e promoveu apoptose. O PQM 250 aumentou a produção de H2O2 e NADPH (18,9 e 14,89%, respectivamente), inibindo a TryR em 21%, provocando assim desequilíbrio redox. PQM 254 reduziu a produção de H2O2 em 41,7%, mas inibiu a TryR em 13,38%, prejudicando a homeostase redox. Já com relação a Leishmania (L.) infantum chagasi, os resultados preliminares mostram que os compostos PQM 254 e PQM 261 promoveu aumento de 211,3% e 311,3% na concentração de H2O2, respectivamente, e que apenas o composto PQM 254 apresentou uma redução significativa de 21,6% nas taxas de NADPH em comparação com o grupo controle. Diante os ensaios in vivo, a qPCR demonstrou que com compostos PQM 250 e 254 reduziram significativamente a carga parasitária do fígado e baço dos animais em relação ao grupo controle. Os dados sugerem que derivados da pentamidina mostram-se promissores no desenvolvimento de terapias mais eficazes contra a leishmaniose ao interferirem em mecanismos críticos relacionados à sobrevivência do parasita. Este estudo oferece contribuições valiosas sobre as vias metabólicas nas quais os compostos afetam, proporcionando uma base importante para futuras abordagens terapêuticas.