Análise de expressão dos genes SAP9 e SAP10, de aspectos bioquímico e ultraestrutural em linhagem padrão de Candida albicans, em estado planctônico e biofilme, antes e após a associação de Fluconazol e Guttiferona A

Introdução: Dentre as espécies de fungos causadoras de infecções na corrente sanguínea, Candida albicans é a prevalente. A compreensão dos fatores associados à virulência deste fungo, dentre eles, a expressão das isoenzimas Aspartato Proteases Secretadas (Sapp) e a formação de biofilmes, são de grande relevância na tentativa de se encontrar possíveis alvos terapêuticos. Objetivos: Avaliar os tipos de interação entre Fluconazol e Guttiferona A, em estado planctônico e biofilmes, por meio de análise morfotopográfica e da expressão gênica de SAP9 e SAP10, afim de verificar possíveis mecanismos de ação do composto Guttiferona A em C. albicans. Metodologia: Avaliamos a expressão gênica de SAP9 e SAP10, quantificamos o ergosterol produzido nas células sob tratamento e avaliamos por meio de microscopia de força atômica (AFM) características ultraestruturais em células planctônicas e biofilmes de Candida albicans, antes e após tratamento isolado e associado entre fluconazol (FLC) e Guttiferona A (GUT). Resultado: A linhagem SC5314, em estado planctônico, foi sensível ao FLC (0,125 μg/mL) e a GUT (7,5 μg/mL). As associações apesentaram efeito sinérgico com inibição de 75% do crescimento, de C. albicans (FICI=0,156). As células sob associação apresentaram alterações morfológicas, como aumento de tamanho (p<0,001), redução na produção do ergosterol (p<0,001), e redução na expressão de SAP9 e SAP10 em células planctônicas, quando comparadas ao controle. Nos biofilmes, o fungo apresentou resistência de mais de 2000 vezes quando tratado com as substâncias isoladamente e não houve atividade nas associações. GUT 1024 μg/mL promoveu um aumento na biomassa dos biofilmes (p<0,001) e, sob tratamentos com 16 μg/mL deste composto, as células apresentaram um aumento de tamanho em relação ao controle (p<0,001). Conclusão: A associação de GUT ao FLC apresenta potencial farmacológico contra C. albicans, promovendo uma atividade sinérgica com alterações significativas na estrutura deste fungo.