Aplicação de bromelina imobilizada em glioxil-agarose na hidrólise de soro albumina bovina

Abstract

A bromelina é uma protease de origem vegetal amplamente utilizada em aplicações farmacêuticas, alimentícias e biotecnológicas. Entretanto, sua instabilidade em solução aquosa, decorrente da suscetibilidade à autólise e desnaturação térmica, limita sua aplicação industrial. Este trabalho teve como objetivo desenvolver um biocatalisador de bromelina estabilizado através da imobilização covalente multipontual em glioxil-agarose 4B-CL. A estratégia envolveu a ativação do suporte via eterificação com glicidol seguida de oxidação com periodato, gerando uma matriz com densidade de grupos aldeído adequada para imobilização seletiva. O processo de imobilização foi monitorado em pH 10,2, acompanhando-se a cinética de desaparecimento da atividade e proteína no sobrenadante. Os ensaios de hidrólise foram conduzidos em meio aquoso sem controle de pH, porém quando testados sob controle de pH (tampão fosfato de sódio pH 4,75), o processo de hidrólise de BSA 2% mostrou-se mais ágil e eficiente, ocorrendo com liberação de grupos α-amino em menor tempo relativamente ao meio aquoso sem controle de pH. A aplicação na hidrólise de BSA confirmou a funcionalidade do biocatalisador, gerando hidrolisados com atividade antioxidante aumentada em 48% (método ABTS). Conclui-se que a imobilização em glioxil-agarose é uma estratégia eficaz para estabilização da bromelina, produzindo um biocatalisador robusto e potencialmente aplicável em processos contínuos de produção de peptídeos bioativos.