Administração de s-equol, um modulador seletivo do receptor de estrogênio beta (er-β), em fibras musculares de camundongos mdx, modelo murino da distrofia muscular de Duchenne

Abstract

A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) apresenta um comportamento anormal do cálcio intracelular, que se concentra principalmente nas mitocôndrias. Com isso, ocorre um fenômeno chamada de Transição de Permeabilidade Muscular (TPM) e, simultaneamente, alta produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), promovendo estresse oxidativo, inflamaçãocrônica, indução apoptótica e necrose da fibra muscular. A modulação do receptor estrogênico beta (ER-ß), demostrou inibição da CyoD e regulação da TPM em estudos prévios, o que torna as mitocôndrias resistentes ao influxo de cálcio. Assim, a modulação específica do ER-β apresentou ação benéfica no perfil morfológico e metabólico do músculo distrófico e no padrão de sinalização de suas fibras musculares. Sendo assim, no presente estudo realizou-se a administração de S-equol, um modulador seletivo do ER-β, em células musculares de camundongo mutante distrófico mdx (modelo experimental da DMD). Para o estudo in vitro preliminar, foram realizadas culturas primárias de células musculares de camundongos mdx e camundongos saudáveis com 28 dias de vida e foram tratadas por 24 h com 5, 10, 20, 40 e 80µM de S-equol. O teste MTT foi realizado para determinar a dose do estudo in vitro complementar. A partir do teste MTT observou-se aumento da viabilidade celular nas células distróficas dos camundongos mdx proporcional ao aumento da dose e superior à viabilidade celular apresentada nas células musculares do grupo controle saudável. Em complemento, utilizou-se a dose 40 µM de S-equol para o tratamento de novas linhagens celulares para análise de marcadores apoptóticos, miogênicos, antioxidantes e inflamatórios por Western Blotting. A análise dos marcadores mostrou aumento do processo proliferativo e de diferenciação das células musculares, redução do estresse oxidativo e dos processos inflamatórios.