Mestrado em Ciências Farmacêuticas

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Navegando Mestrado em Ciências Farmacêuticas por Orientador(a) "Luccas, Pedro Orival"

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    ItemAcesso aberto (Open Access)
    Avaliação de procedimentos para contagem de Saccharomyces cerevisiae em sistemas de análise por injeção em fluxo (FIA)
    (Universidade Federal de Alfenas, 2008-08-04) Pessôa, Gustavo De Souza; Luccas, Pedro Orival; Pereira Filho, Edenir Rodrigues; Silva, Paulo Márcio Faria E
    A contagem celular é uma técnica empregada para se monitorar a reprodução de células em meios de cultivo de interesse em ensaios biológicos. Um sistema de análise por injeção em fluxo foi desenvolvido para a contagem de células como uma alternativa ao sistema convencional, câmara de Neubauer. O método é baseado na proporcionalidade entre o sinal de sulfato de bário e das células. Apesar das diferenças nas propriedades físicas, foi possível estabelecer uma relação entre os sistemas de fluxo. No sistema FIA para determinação de sulfato, foi obtida a seguinte equação para curva analítica: S = 0,0087Csulfato + 0,000458. Para o Saccharomyces cerevisiae a curva analítica obtida foi S = 4,01 x 10-11CS.cerevisiae + 0,0018 e a relação entre os sistemas foi CS.cerevisiae = 2,17 x 108CSulfato + 0,002258. Os limites de detecção e quantificação foram, respectivamente, 2,37 x 108 células L-1 e 7,90 x 108 células L-1. O método foi comparado com os resultados obtidos na câmara de Neubauer e não existiram diferenças significativas a um nível de confiança de 95% (teste-t pareado). A determinação com a câmara de Neubauer apresentou menor precisão que o sistema FIA. Além disso, o método permite a monitoração do crescimento microbiano. As principais vantagens do sistema FIA foram a alta freqüência, a seletividade, exatidão e repetibilidade satisfatórias
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    ItemAcesso aberto (Open Access)
    Construção e caracterização de um minibiossensor potenciométrico para determinação de adrenalina em amostras de interesse farmacêutico
    (Universidade Federal de Alfenas, 2007-12-21) Mataveli, Lidiane Raquel Verola; Luccas, Pedro Orival; Tarley, César Ricardo Teixeira; Silva, José Maurício Schneedorf Ferreira Da
    A polifenoloxidase (PFO) é uma enzima cúprica que catalisa a oxidação de difenóis em quinonas e tem ampla distribuição entre os vegetais. A atividade dessa enzima foi medida para a construção de um biossensor, para determinação de adrenalina, e os melhores resultados foram obtidos com a banana (Musa sp.). O cálculo da atividade enzimática proporcionou um valor de 974 UA (Unidades de Atividade). O biossensor foi construído com pasta de carbono, 50 UA em tampão fosfato (pH= 7,00) suportada em agulha de aço inoxidável ou tubo de polietileno. Constatou-se morosidade no restabelecimento da linha base a qual foi corrigida com a adição de H2O2 na solução diminuindo o tempo para 10 minutos. O biossensor (com polietileno) apresentou resposta linear para adrenalina, em solução tampão, entre 8,00x10-9 e 8,00x10-4 mol L-1 (LD = 8,00x10-9 mol L-1). Para amostras de medicamentos os resultados obtidos com o método proposto e com o método descrito na Farmacopéia Brasileira (1977) foram concordantes. Para amostras de sangue, usando calibração por ajuste de matriz, a faixa linear foi de 8,00x10-7 a 8,00x10-3 mol L-1 (LD = 8,00x10-7 mol L-1). Obteve-se 89,4 % nos testes de recuperação. Testes in vivo, onde os eletrodos foram inseridos na veia jugular de ratos Wistar, apresentaram resultados promissores.
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    ItemAcesso aberto (Open Access)
    Pré-concentração em sistema em fluxo acoplado In-line à GFAAS para especiação de selênio em amostras de interesse farmacêutico
    (Universidade Federal de Alfenas, 2009-09-15) Paiva, Ana Lúcia Silva Figueiredo De; Luccas, Pedro Orival; Arruda, Marco Aurélio Zezzi; Tarley, César Ricardo Teixeira
    Selênio é um elemento essencial para os organismos, no entanto, há uma faixa estreita entre a sua concentração essencial e tóxica, a qual depende da espécie envolvida. Neste trabalho, uma minicoluna “homemade”, contendo a resina LC-SAX® foi acoplada ao autoamostrador do GFAAS, para realizar pré-concentração in-line. A pré-concentração, eluição e limpeza da minicoluna foram sincronizadas com o programa de aquecimento do GFAAS. Para especiação dos compostos de selênio, 6 mL de amostra, contendo as duas espécies, selenito e selenato, foram preparadas nos valores de pH de 2,0 e 8,8. A eluição foi realizada usando 20 μL de ácido nítrico diretamente dentro do tubo de grafite. Foi empregado planejamento fatorial 23 para verificar as variáveis significativas do sistema e a otimização final foi feita utilizando matriz de Doehlert com superfície de resposta. Os valores otimizados para pH, vazão de pré-concentração e concentração do eluente foram 8,8; 4,0 mL min-1 e 2,8 mol L-1, respectivamente. Um estudo do pH de adsorção foi realizado na faixa de 2 a 8, sendo que em pH 2,0 somente Se(VI) foi pré-concentrado, por outro lado, em pH acima de 6,0 ambas as espécies Se(VI) e Se(IV) puderam ser determinadas. Na ordem de determinar a concentração de cada espécie, um sistema com três equações foi proposto, o mesmo foi baseado na soma das absorbâncias obtidas em dois diferentes valores de pH. A primeira equação foi obtida em pH 2,0 com a curva analítica de Se(VI); a segunda também para Se(VI), porém em pH 8,8 e a terceira obtida com Se(IV) em pH 8,8. O sistema apresentou para Se(IV) e Se(VI) respectivamente, as seguintes características: fatores de pré-concentração de 108 e 74 vezes, índices de consumo de 5,6 x 10-2 e 8,1 x 10-2 mL, eficiências de concentração de 37,0 e 25,4 FP min-1 e limites de detecção de 49 e 31 ng L-1. Foram obtidos resultados satisfatórios para precisão com coeficiente de variação até 5,5% para Se(IV) na concentração de 2,0 μg L-1 (n=6). A exatidão foi testada em material de referência certificado de Dogfish e com testes de recuperação, sendo que não houve diferença significativa entre o valor certificado e obtido com 95% de confiança (teste-t); e valores de recuperação na faixa de 99 – 110%. O método foi aplicado em amostras de águas e farmacêuticas e os resultados foram satisfatórios.