Mestrado em Biociências Aplicadas à Saúde

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Acesso aberto (Open Access)
Avaliação da qualidade do sono e níveis séricos de serotonina e cortisol em pacientes com dor crônica
(Universidade Federal de Alfenas, 2023-05-31) Mesquita, Lays Fernandes; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Nascimento, Carlos Giovani De Oliveira; Souza, Guilherme Rabelo De
A dor crônica pode acometer indivíduos de qualquer idade e está atribuída a maior morbidade, declínio cognitivo e imobilidade. Nos pacientes com dor cônica, ocorrem alterações importantes na neurotransmissão, além de alterações endócrinas relacionadas ao estresse. Além do mais, a má qualidade do sono leva a alterações cognitivas, irritabilidade e fadiga durante o dia e está, comumente, presente em pacientes com dor crônica. Assim, o presente estudo avaliou, por meio da aplicação de questionários a indivíduos adultos com diagnóstico de dor crônica, atendidos em ambulatório de reumatologia da microrregião de Alfenas-MG, a qualidade de vida, o padrão da dor e a qualidade do sono, além da análise da dosagem sérica de serotonina e cortisol. Dos 57 pacientes que fizeram parte da amostra, a maioria era composta por mulheres (91,2%), com idade maior de 40 anos (87,7%). Os principais diagnósticos envolvidos foram fibromialgia (35%), osteoartrite (21%) e artrite reumatoide (14%). Os resultados obtidos apontaram moderada intensidade da dor e interferência das atividades diárias, regular estado de saúde geral e má qualidade do sono nestes indivíduos. De acordo com os dados, não houve correlação estatisticamente relevante entre a severidade da dor e a qualidade de sono, tampouco entre a severidade da dor e o estado de saúde geral. Por outro lado, houve correlação positiva moderada entre a severidade da dor e a interferência nas atividades diárias, e correlação negativa moderada entre a severidade da dor e a saúde mental do indivíduo. Também ficou claro que a interferência da dor nas atividades diárias impacta negativamente na saúde mental. Não foi possível constatar uma relação entre a má qualidade do sono e maior intensidade da dor, mas sim entre qualidade de sono e saúde mental, impactando significativamente também no estado geral de saúde. A qualidade do sono impacta ainda na relação das atividades do cotidiano e influencia negativamente a saúde mental. Por fim, no presente estudo não foi evidenciada correlação significativa entre o diagnóstico de dor crônica e alterações de níveis séricos de serotonina e cortisol. Em conclusão, os achados demonstram a complexidade do tratamento de pacientes com dor crônica. Considerando que a dor crônica desencadeia um amplo espectro de alterações orgânicas e cognitivas, torna-se essencial compreender como essas alterações se associam, para que sejam desenvolvidas abordagens preventivas e terapêuticas mais efetivas.
Acesso aberto (Open Access)
Efeito do time-restricted feeding de curto prazo sobre os tecidos adiposos branco e marrom e perfil glicêmico em camundongos
(Universidade Federal de Alfenas, 2019-09-27) Franco, Priscila De Paula; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Paula, Hudsara Aparecida De Almeida; Reis, Luis Carlos
Nos últimos anos, modificações dietéticas têm sido cada vez mais promovidas como potenciais auxiliares na prevenção e tratamento da obesidade e disfunções metabólicas. Uma delas é a alimentação com restrição de tempo (time-restricted feeding, TRF) que restringe os períodos de alimentação diária para determinadas horas do dia, estendendo o típico jejum noturno por várias horas. Este trabalho visou elucidar os efeitos do TRF em curto prazo sobre a ingestão alimentar, massa corporal total, massa e histologia dos tecidos adiposos branco periepididimal (pTAB) e marrom interescapular (iTAM), glicemia de jejum e tolerância oral à glicose. Foram utilizados 40 camundongos Swiss machos divididos em grupos de TRF de 12 horas por dia por uma ou quatro semanas com seus respectivos controles. Os dados foram analisados no software de análises estatísticas GraphPad Prism®. Os animais TRF após uma e quatro semanas não demonstraram alterações no ganho de massa corporal total e ingestão alimentar comparados aos respectivos animais ad libitum (p > 0,05). Entretanto, houve um aumento da massa de iTAM após uma (0,44 ± 0,01 vs. 0,36 ± 0,02g/100g MC; p < 0,01) e quatro (0,53 ± 0,03 vs. 0,39 ± 0,03g/100g MC; p < 0,001) semanas de TRF, além de uma diminuição do tamanho dos adipócitos e da massa de pTAB na primeira (1,70 ± 0,09g/100g MC vs. 2,03 ± 0,16g/100g MC; p < 0,05) e na quarta (2,02 ± 0,20g/100g MC vs. 2,46 ± 0,31g/100g MC; p > 0,05) semana. A glicemia de jejum aumentou nos animais TRF após a primeira semana (175,90 ± 6,59 vs. 153,20 ± 5,77 mg/dL; p < 0,05), mas não após a quarta semana (p > 0,05). O teste de tolerância oral à glicose demonstrou menor elevação da glicemia após quatro semanas (85,50 ± 10,33 vs. 121,80 ± 15,82 mg/dL; p < 0,05). Os resultados apontam para um possível aumento da termogênese e consequentemente do metabolismo energético, provavelmente utilizando-se das reservas energéticas de TAB. Além disso, ocorre uma adaptação inicial da glicemia de jejum dos animais submetidos ao TRF na primeira semana, mas na quarta semana há uma possível melhora no clearance de glicose plasmática, evidenciada pela menor elevação de glicemia do grupo TRF4, sugerindo um possível aumento da sensibilidade à insulina. Portanto, o TRF representa uma abordagem promissora para a prevenção e terapia de distúrbios metabólicos como a obesidade e o diabetes tipo II.
Acesso aberto (Open Access)
Efeitos da inibição endógena da produção de h2s nas respostas homeostáticas induzidas pela dieta hipersódica em ratos
(Universidade Federal de Alfenas, 2017-11-20) Moreira, Andréia Mara; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Oliveira, Fabiana Lúcio De; Silva, Josie Resende Torres Da
O sódio (Na+) é o principal soluto osmoticamente ativo do meio extracelular, bem como constitui o principal íon responsável pela manutenção do volume do líquido circulante, essencial à adequada perfusão dos tecidos. Recentemente, tem sido demonstrada a participação de moduladores gasosos na homeostase deste íon, entre eles o sulfeto de hidrogênio (H2S), formado, entre outras vias, por ação da enzima cistationina-γ-liase (CSE). Diante disto, o presente estudo visou avaliar a participação do H2S nas respostas homeostáticas desencadeadas pelo consumo agudo de dieta hipersódica. Após habituação com a ração convencional moída (NUVILAB®), 72 ratos Wistar machos adultos foram mantidos durante sete dias com dieta controle [C (0,27% de sódio)] ou hipersódica [S2 (0,54%)/S3 (0,81%)], e tratados com um inibidor da enzima CSE (DL-Propargilglicina, PAG, 25 mg/kg/dia, i.p., Sigma®) ou veículo (soro fisiológico). Ao final deste período, os animais foram eutanasiados por decapitação. Demonstramos que a ingestão, mesmo que aguda, de uma quantidade aumentada de Na+ na dieta, em valores que tentam mimetizar as variações no consumo humano (2 a 3 vezes o preconizado) modificou de maneira importante o balanço de água e Na+, com repercussões em ao menos dois eixos neuroendócrinos (hipotálamo-neuro-hipofisário e hipotálamo-hipófise-adrenal). Interessantemente, todas essas respostas adaptativas se desenvolveram mesmo na ausência de alterações comportamentais (aumento reflexo da ingestão de água) e plasmáticas (hiperosmolalidade/hipernatremia) evidentes. Esses achados foram acompanhados pelo desenvolvimento de uma clara resposta inflamatória em elementos tubulares e microvasculares renais, resposta esta extensiva, porém menos intensa, em uma grande artéria sistêmica (aorta). Por sua vez, a inibição da produção endógena de H2S pela CSE, por meio do tratamento com PAG, preveniu a inflamação induzida pela dieta hipersódica, além de modular a secreção hormonal. Em suma, nossos dados sugerem que o H2S tenha um papel pró-inflamatório importante, aparentemente contrarregulador do NO, que esteja envolvido nas alterações agudas desencadeadas pelo consumo excessivo de Na+. Essas alterações, se mantidas em longo prazo, podem contribuir para a patogênese de distúrbios locais, principalmente renais, bem como sistêmicos, como a hipertensão arterial.
Acesso aberto (Open Access)
Efeitos da redução da ninhada e do dimorfismo sexual sobre parâmetros metabólicos e expressão do receptor CB1 no sistema nervoso central de ratos Wistar jovens
(Universidade Federal de Alfenas, 2019-08-30) Mangerona, Bianca Aparecida; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Soncini, Roseli; Kalil, Bruna
A obesidade é uma condição clínica grave que tem se tornado um dos principais problemas de saúde pública da atualidade. Sua origem é multifatorial, envolvendo fatores genéticos, metabólicos e comportamentais, os quais resultam em um desequilíbrio entre a ingestão e o gasto calórico, com consequente balanço energético positivo e ganho de peso. Diversos mecanismos neuronais e endócrinos estão relacionados ao controle da homeostase energética, entre eles o sistema endocanabinóide (SEC), um sistema de neurorregulação cujo desequilíbrio tem sido considerado importante fator para o desenvolvimento e manutenção de quadros de obesidade. Utilizando o modelo experimental de ninhada reduzida [3 filhotes/ninhada (NR) vs 10 filhotes/ninhada (NN)] confirmamos em ratos de 21 e 60 dias a indução da obesidade precoce por superalimentação pós-natal por meio da análise de massa corporal, taxa específica de ganho de peso e massa dos depósitos de tecido adiposo branco perigonadal (TABp) e retroperitoneal (TABr). Também investigamos os efeitos do dimorfismo sexual sobre as ingestões alimentar e hídrica e o ganho de massa corporal, a massa relativa de tecidos relacionados à função endócrina e metabólica (adrenal, hipófise, tecido adiposo marrom – TAM e TABs), os perfis lipídico e glicêmico e a expressão do receptor canabinóide do tipo 1 (CB1) no hipotálamo ou de seu RNA mensageiro no TAB. No grupo de 21 dias, foi observado aumento significativo na massa corporal na prole originada de mães NR, bem como na massa TAM e dos TABp e TABr, menor expressão de CB1 após sobrecarga de glicose e diminuição nos níveis de RNAm para CB1 no TAB. No grupo de 60 dias foram encontrados aumentos na massa corporal, ingestão alimentar, TABp e TAB em ambos os sexos e aumento de RNAm para CB1 no TAB das fêmeas. Não foram encontradas diferenças significativas nas massas relativas da hipófise e da adrenal derivadas da redução da ninhada. Em relação ao perfil lipídico, tanto filhotes fêmeas quanto machos do grupo NR apresentaram apenas aumento nos níveis plasmáticos de colesterol total. No grupo de 60 dias houve aumento nas concentrações plasmáticas de triglicerídeos e aumento na expressão de CB1 após a ingestão de glicose. O dimorfismo sexual, por sua vez, gerou diferenças na massa corporal, ingestão alimentar, e massas de TABp, TABr, hipófise e adrenal, assim como nos níveis de triglicerídeos, glicose e na marcação de CB1 no hipotálamo tanto nas proles NN quanto NR. Portanto, nosso trabalho mostra que o modelo de superalimentação pós-natal é eficaz em induzir a obesidade em animais jovens de ambos os sexos, influenciando nos parâmetros metabólicos estudados. Esses resultados demonstram a importância da nutrição como um fator de programação neonatal, determinando o desenvolvimento da obesidade na prole na vida adulta.
Acesso aberto (Open Access)
Efeitos do uso de lâminas espectrais para tratamento da Síndrome de Meares Irlen em alunos do ensino fundamental do município de Alfenas-MG
(Universidade Federal de Alfenas, 2018-04-27) Leão, Daniela Maggioni Pereira; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Paffaro, Andrea Mollica Do Amarante; Silva, Josie Resende Torres Da
A Síndrome de Meares-Irlen (SMI) é um distúrbio visuoperceptivo decorrente de um déficit no córtex visual primário e/ou na via Magnocelular. A SMI é caracterizada como uma sensibilidade do sistema visual a certos comprimentos de onda espectrais, que podem provocar distorções no processamento pós-retiniano, comprometendo não só a habilidade de leitura e escrita, como a qualidade de vida dos indivíduos. Desta forma, o objetivo desta pesquisa foi identificar, por meio da metodologia desenvolvida por Irlen (1987), o Irlen Reading Perceptual Scale (IRPS), os alunos com SMI em escolas municipais de Alfenas/MG e implementar ações que visem melhorar a leitura e assim a qualidade de vida destas crianças. Das 58 crianças avaliadas ao final do processo de seleção, a maioria apresentou dificuldade moderada (62%) e desconforto leve (43%) para as atividades de leitura. Destas crianças, 42 (72,4%) foram diagnosticadas com SMI moderado a severo, integrando o grupo de intervenção (GI), e as 16 (27,6%) restantes não apresentaram ou relataram sintoma muito leves de SMI, integrando o grupo placebo ativo (GP). As overlays foram selecionadas e distribuídas aos alunos para uso por um período de três meses, ao final do qual as crianças foram reavaliadas. Com base nos resultados obtidos, identificamos uma prevalência da SMI de 18%, com prevalência maior de meninas em nossa amostra. A pesquisa também mostrou um claro benefício do uso das overlays nas crianças do grupo GI, as quais apresentaram média de desempenho maior do que 10% na velocidade de leitura. Dentre as crianças com dificuldade de leitura, 17,2% aumentaram a velocidade de leitura em mais de 15%. Interessantemente, este efeito benéfico não foi observado no grupo GP, indicando a alta especificidade do diagnóstico e da intervenção proposta. Assim, nosso estudo confirma o uso das overlays como método de intervenção de alta eficiência, baixo custo e simples manejo para tratamento da SMI. Contribuiu-se para a difusão do conhecimento sobre esta síndrome entre pais, profissionais de saúde e de educação, além de resgatar a autoestima e valorizar a capacidade de aprendizado das crianças diagnosticadas com SMI.
Acesso aberto (Open Access)
Efeitos in vitro do tratamento com canabidiol (CBD) sobre a morfologia e atividade de astrócitos expostos a metil-éster de anidroecgonina (subproduto do crack/cocaína)
(2025-04-14) Santos, Simone de Oliveira; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Godoy, Lívea Dornela; Ventura, Renato Rizo
Há décadas o abuso de drogas vem gerando complicações de impacto mundial para o setor de saúde pública. É fato que o uso de crack afeta a cognição, porém não está totalmente claro como o principal produto da droga, o metil-éster de anidroecgonina (MEAE), afeta a função cerebral. Dentro deste contexto, destaca-se o uso terapêutico dos fitocanabinóides, entre eles o canabidiol (CBD), para manejo de síndromes de abuso. Considerando os eventos críticos da neurotransmissão, os astrócitos (células da glia) vêm sendo consideradas possíveis alvos do crack, já que desempenham um papel fundamental na função sináptica. Diante disso, o presente estudo investigou os efeitos do tratamento in vitro com CBD sobre indicadores da função de astrócitos hipocampais expostos a MEAE. Para tanto, foram estabelecidas culturas primárias de astrócitos a partir do hipocampo fresco coletado de ratos neonatos. As células foram pré-tratadas ou não com CBD, e expostas ao metabólito MEAE. Os resultados de viabilidade celular, avaliada pelo método MTT, demonstraram que a incubação com MEAE em três diferentes concentrações (0,1, 0,01 e 0,001 mM) reduziu significativamente a viabilidade celular em comparação ao grupo controle. O pré-tratamento com CBD (10 μM) reverteu este efeito, particularmente no grupo exposto a MEAE 0,1 mM. A exposição à MEAE também aumentou a expressão de GFAP, indicando aumento da área celular. A incubação com CBD, por si só, aumentou a expressão de GFAP, a concentração citosólica de cálcio e a concentração extracelular de lactato, sendo que a exposição concomitante com MEAE inibiu somente os dois últimos efeitos. Portanto, os dados obtidos até o momento demonstram que o CBD tem ação glioprotetora na presença de MEAE, porém esta ação parece não estar relacionada com altos níveis de cálcio intracelular ou liberação aumentada de lactato. Além disso, os resultados indicam que a astrogliose pode estar relacionada não apenas à exposição aos MEAE, mas também aos potenciais efeitos benéficos do CBD.
Acesso aberto (Open Access)
Participação de canais iônicos na transdução do sinal osmótico em astrócitos hipotalâmicos em cultura
(Universidade Federal de Alfenas, 2019-02-28) Souza, Marina Malerba De; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Ventura, Renato Rizo; Dias, Marcos Vinícios Salles
Evidências recentes mostram que os astrócitos constituem elementos essenciais às respostas adaptativas induzidas por desafios osmóticos. Em neurônios, a transdução do sinal osmótico é mediada pela abertura ou fechamento de canais iônicos, alguns deles expressos por astrócitos, tais como o transient receptor potential vanilloid type 1 (TRPV1), os stretch-innativated channels (SIC) e canais de Ca2+ tipo-L (LTCCs, sigla para L-type calcium channels). Assim, o presente estudo pretendeu avaliar, em presença de hiperosmolalidade e do bloqueio seletivo de canais iônicos, a viabilidade celular, a morfologia dos astrócitos (por meio da expressão da proteína ácida glial fibrilar – GFAP) e a captação de aspartato triciado. Para tanto, as células foram incubadas em condições basais (DMEM Base: ~300 mOsm/Kg H2O, 109 mM de NaCl) e em condições de aumento das concentrações extracelulares de sódio (DMEM Hipertônico: ~360 mOsm/Kg H2O, 132 mM de NaCl), na presença de bloqueadores específicos para os canais iônios listados acima (Verapamil, 10 μM, bloqueador LTCC; Capsazepina, 30 μM, antagonista TRPV1; Gadolínio, 100 μM, bloqueador SIC). Interessantemente, somente o tratamento com Capsazepina teve efeito sobre a viabilidade celular, diminuindo a morte de astrócitos. A incubação com DMEM hipertônico reduziu significativamente a expressão de GFAP em astrócitos hipotalâmicos, bem como a captação de aspartato triciado. Um efeito similar de redução da expressão da GFAP foi observado nas condições basais em resposta à incubação com Verapamil. Contudo, a incubação com Verapamil não alterou a resposta de captação de aspartato, seja em condições basais ou hipertônicas. A incubação com Capsazepina, por sua vez, reverteu a resposta induzida pelo DMEM hipertônico sobre a expressão de GFAP, sem interferir na captação de aspartato. E, finalmente, o bloqueio dos canais SIC pela incubação com Gadolínio, induziu uma resposta aberrante de aumento intenso da expressão de GFAP, apenas em presença do meio hipertônico. Portanto, concluímos que os LTCCs desempenham um papel importante na expressão de GFAP, preferencialmente em condições basais ou não relacionadas ao estimulo osmótico. Por outro lado, os canais TRPV1 e, principalmente, o SIC, parecem desempenhar papéis fundamentais nos rearranjos estruturais observados nos astrócitos em resposta ao estímulo hipertônico. Contudo, os LTCCs e os TRPV1 parecem não mediar as mudanças ocorridas no transporte de glutamato em presença de hiperomolalidade. Já os SIC mostraram aumentar tal transporte.
Acesso aberto (Open Access)
Participação dos canais transient receptor potencial vanilloid type 1 (TRPV1) de astrócitos hipotalâmicos no controle central do balanço de água e sódio
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-08-12) Almeida, Leticia Cruz De; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Ventura, Renato Rizo; Fonseca, Wesley Fernandes
O Sistema Nervoso Central é composto por neurônios e células gliais, sendo os astrócitos essenciais na neurotransmissão. Este estudo investigou os efeitos das variações da osmolalidade do líquido extracelular (LEC) nos parâmetros da função astrocítica. Utilizando um modelo in vitro de cultura primária de astrócitos derivados do hipotálamo médio-basal de ratos neonatos, as células foram pré-incubadas por 30 minutos com meio de cultura convencional, com ou sem Capsazepina. Posteriormente, foram estimuladas por 2 horas com meios Hank de diferentes osmolalidades (230, 290 ou 350 mOsm/Kg H2O). Foi analisada a viabilidade celular e a área celular, esta última estimada pela quantificação da expressão da proteína ácida fibrilar glial (GFAP). A liberação in vitro de lactato, as concentrações intracelulares de cálcio (Ca2+) e a quantificação da proteína total foram determinadas por meio de reações colorimétricas, realizada com o meio de incubação ou com lisados celulares obtidos após 1 ou 2h de estimulação. Os resultados foram avaliados por ANOVA de duas vias, com pós-teste de Sidak. A viabilidade celular permaneceu inalterada diante de variações de osmolalidade ou tratamento com Caps. A expressão de GFAP foi reduzida no grupo incubado com a solução Hank de 230 mOsm/Kg H2O, sendo que o tratamento com Caps reverteu essa resposta (p<0,05). A liberação de lactato não foi alterada após exposição a alterações na osmolalidade do LEC. Entretanto, a incubação com Caps aumentou significativamente as concentrações de lactato no meio após 2h de estimulação (p<0,001), independentemente da osmolalidade do LEC. Na osmolalidade mais baixa (230 mOsm/Kg H2O), o tratamento com Caps também aumentou a liberação de lactato após 1h de estimulação (p<0,01). Não foram encontradas alterações relevantes nas concentrações intracelulares totais de Ca2+ em astrócitos incubados por 2 h sob diferentes osmolalidades do LEC. O tratamento com Caps, por sua vez, reduziu esse parâmetro apenas no grupo incubado com a solução Hank de 290 mOsm/Kg H2O (p<0,01). O bloqueio dos canais TRPV1 afeta a expressão de GFAP e a liberação de lactato, especialmente em condições hipotônicas. Contudo, o equilíbrio de Ca2+ não é significativamente impactado pelo antagonismo ao canal TRPV1 durante desafios osmóticos, exceto em condições isotônicas.

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