Mestrado em Biociências Aplicadas à Saúde
URI Permanente para esta coleçãohttps://repositorio.unifal-mg.edu.br/handle/123456789/2643
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Navegando Mestrado em Biociências Aplicadas à Saúde por Orientador(a) "Malaquias, Luiz Cosme Cotta"
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Item Acesso aberto (Open Access) Analise da prevalência de infecção pelo Paracoccidioides brasiliensis em áreas rurais de Alfenas, Minas Gerais(Universidade Federal de Alfenas, 2013-06-24) Magalhões, Evandro Monteiro De Sá; Malaquias, Luiz Cosme Cotta; Vergara, Mário León Silva; Burger, EvaA paracoccidioidomicose é uma micose profunda, negligenciada, endêmica em áreas rurais da América Latina, considerada importante problema de saúde pública. Estudos epidemiológicos da infecção pelo Paracoccidioides brasiliensis são baseados principalmente em inquéritos com testes cutâneos com paracoccidioidina. Objetivou-se estimar a prevalência da sensibilização cutânea ao P. brasiliensis em moradores de áreas rurais do município de Alfenas/MG e verificar fatores de riscos associados à infecção. Foi realizado um estudo transversal de base populacional utilizando testes intradérmicos com paracoccidioidina em 542 indivíduos selecionados por demanda espontânea. Os participantes foram submetidos à entrevista com preenchimento de ficha cadastral com dados epidemiológicos e ao teste de intradermorreação com aplicação de 0,1 mL de paracoccidioidina no antebraço esquerdo. A leitura do teste foi realizada 48 horas após aplicação, sendo considerados reatores positivos os indivíduos com medida da induração de diâmetro igual ou maior a 5 mm. Das 542 pessoas estudadas, a prevalência de positividade ao teste cutâneo foi de 46,67%, com predomínio do gênero masculino. Observou-se um aumento da prevalência da infecção paracoccidioidica com o aumento da idade. Houve diferença estatisticamente significativa somente para gênero masculino, que foi de 56,30%. As variáveis profissão, etilismo e tabagismo não se mostraram significativas ou associadas ao risco de infecção paracoccidioídica. Há uma relevância da Paracoccidioidomicose-infecção nessas áreas rurais, portanto, sugere-se outros estudos clínico-epidemiológicos dessa micose na região Sul do Estado de Minas GeraisItem Acesso aberto (Open Access) Avaliação sorológica a antígenos do Paracoccidioides brasiliensis pelo teste de ELISA e prova intradérmica na região rural de Alfenas, MG(Universidade Federal de Alfenas, 2014-08-25) Ribeiro, Ana Paula; Malaquias, Luiz Cosme Cotta; Coelho, Luiz Felipe Leomil; Veloso, Tânia Regina GrãoA paracoccidioidomicose (PCM) micose sistêmica granulomatosa crônica, endêmica em países da América Latina, causada pelo fungo termo-dimórfico Paracoccidioides brasiliensis. A endemicidade está relacionada com regiões agrícolas, onde o fungo encontra condições ecológicas favoráveis para seu desenvolvimento. Se não diagnosticada e tratada a tempo, pode levar a formas disseminadas graves e letais, com rápido envolvimento dos pulmões, tegumento, gânglios, baço, fígado e órgãos linfóides do tubo digestivo. O surgimento da doença depende da interação entre o fungo e a resposta imune do hospedeiro, o qual pode evoluir à cura espontânea ou disseminar-se pelo organismo causando reação granulomatosa crônica. O diagnóstico da PCM é feito por exame clínico e laboratorial. Os exames laboratoriais são auxiliares no diagnóstico. Entres estes destacam a biopsia e a cultura, que visam identificar o fungo em amostras biológicas. No entanto, existe a possibilidade da ocorrência de resultado falso-positivo. Por sua vez, os testes sorológicos como imunodifusão dupla (IDD), contraimunoeletroforese (CIE), imunofluorescência indireta (IFI), ensaio imunoenzimático (ELISA) e imunoblot (IB) são auxiliares no diagnóstico e, permitem avaliar de forma indireta a presença de anticorpos do hospedeiro contra antígenos do fungo. A IDD, o teste de referência, apresenta alta sensibilidade e especificidade, no entanto, requer que o paciente apresente altos títulos de anticorpos, período onde a doença já esta instalada. O teste de ELISA é um método sensível, rápido e apropriado para análise de grande amostragem, porém, apresenta como desvantagem a reatividade cruzada entre diferentes espécies de fungos. O projeto tem como objetivo a realização de ensaios de ELISA utilizando amostras de soros de moradores da zona rural de Alfenas, Minas Gerais, na presença ou ausência de solução de ureia 6M. Comparando-se o teste de ELISA sem ureia e com ureia, pode-se observar uma redução do número de resultados positivos em todas as faixas etárias tanto no sexo feminino, quanto no sexo masculino e um aumento no número de resultados negativos em ambos os sexos, e também em todas as faixas etárias. Ao se avaliar a região rural de Alfenas, MG utilizando o teste de ELISA tratado com ureia 6M, a soroprevalência obtida foi de 55,75%.Item Acesso aberto (Open Access) Comparação entre os ensaios DOT BLOT, ELISA e Intradermorreação no levantamento da prevalência da infecção paracoccidioídica em área endêmica(Universidade Federal de Alfenas, 2014-09-01) Lima, Antonio José Araujo De; Malaquias, Luiz Cosme Cotta; Dias, Amanda Latércia Tranches; Teixeira, David Nascimento SilvaA paracoccidioidomicose (PCM) é caracterizada como uma micose profunda e que acomete, principalmente, indivíduos do sexo masculino e de regiões agrícolas. A infecção ocorre através da inalação de propágulos fúngicos presentes no ambiente, atingindo inicialmente os pulmões e podendo se disseminar para outros órgãos. O diagnóstico precoce da doença previne a formação de sequelas e garante que o trabalhador dê continuidade a sua atividade de vida diária. Os testes de intradermorreação, imunodifusão dupla e ELISA são os mais utilizados no diagnóstico da PCM, no entanto, podem apresentar reatividade cruzada com outras doenças, como Histoplasmose, Candidíase e Criptococose. Em ensaios de Dot Blot com gp43 purificada, foi comprovada a eficiência deste teste para o sorodiagnóstico da PCM em pacientes durante terapia antimicótica, apresentando alta sensibilidade e especificidade. Portanto, objetiva-se com este trabalho utilizar a técnica do ensaio de Dot Blot com a glicoproteína de 43 KDa como um método de diagnóstico para a PCM infecção em indivíduos expostos ao Paracoccidioides brasiliensis na área rural de Alfenas. A prevalência de positividade nos testes Dot Blot, ELISA e IDR foi 57,57% 56,71% 68,83% respectivamente. A proporção de positivos no teste de Dot Blot foi maior no gênero masculino. A maioria dos indivíduos positivos situa-se na faixa etária acima dos 30 anos. Os resultados mostram uma maior concordância entre o teste Dot Blot e ELISA. Devido à dificuldade na padronização no teste Dot Blot e a uma melhor reprodutibilidade e rapidez do teste de ELISA, os resultados sugerem que o teste de ELISA seja mais adequado para levantamento da prevalência da PCM em áreas rurais.The paracoccidioidomycosis (PCM) is characterized as a deep mycosis and that affects mainly males and agricultural regions. Infection occurs by inhalation of fungal propagules in the environment, initially reaching the lungs and may spread to other organs. Early diagnosis of the disease prevents the formation of sequels and ensures that the worker gives continuity to their activities of daily living. The intradermal tests, immunodiffusion and ELISA are the most used in the diagnosis of PCM, however, may show cross-reactivity with other diseases such as histoplasmosis, candidiasis and cryptococcosis. Therefore, the objective of this study was to use the technique of Dot Blot assay glycoprotein of 43 kDa as a diagnostic method for PCM infection in individuals exposed to P. brasiliensis in rural Alfenas. Different variables were tested in the standardization of Dot Blot assay using sera samples from patient’s positive and negative individuals. The prevalence of positivity in Dot Blot, ELISA and IDR tests was 57.57%, 56.71% and 68.83% respectively. Seropositivity in the Dot Blot test was higher in males. Most positive individuals lie in the age group above 30 years. The results show a better agreement between the Dot Blot and ELISA. Due to the difficulty in standardizing the Dot blot test a better reproducibility and speed of ELISA, the results suggest that ELISA is more suitable for survey of the prevalence of PCM in rural areas.Item Acesso aberto (Open Access) Padronização de ensaio imunoenzimático para diagnóstico da esporotricose(Universidade Federal de Alfenas, 2013-06-28) Coelho, Letícia Maria Leomil; Malaquias, Luiz Cosme Cotta; Burger, Eva; Souza, Raquel Lopes MartinsA esporotricose é uma micose causada pela inoculação traumática na pele com material contaminado com o fungo dimórfico Sporothrix schenckii. As formas clínicas mais comuns são a linfocutânea e a cutânea fixa. A prevalência é maior em área tropical e em zona temperada. No entanto, a prevalência real da esporotricose em áreas urbanas e rurais é desconhecida, pois não há notificação compulsória. O aumento do número de casos, nos últimos anos, está relacionado à transmissão feita por animais de estimação. Os métodos de diagnóstico diretos disponíveis demoram dias para serem concluídos. Por sua vez, métodos sorológicos podem gerar resultados falsos positivos ou negativos devido a reações cruzadas entre antígenos do S. schenckii com de outros fungos. Por esse motivo, é necessário o desenvolvimento de testes sorológicos, com alta sensibilidade e especificidade, que garantam um diagnóstico confiável. Este estudo teve por objetivo padronizar um ensaio imunoenzimático (ELISA), com maior sensibilidade e especificidade, para diagnóstico sorológico da esporotricose. Nesse trabalho, placas de poliestireno foram sensibilizadas com exoantígenos de cultura da forma leveduriforme de S. schenckii e testadas utilizando soros de pacientes com esporotricose, soros de pacientes com paracoccidioidomicose (PCM), assim como de indivíduos esporotriquina negativos. Duas estratégias foram utilizadas, uma tratando o antígeno com metaperiodato de sódio e outra tratando os soros com uréia 6M em diferentes tempos de incubação. Os resultados mostraram que a estratégia utilizando metaperiodato de sódio não melhorou o poder do ensaio em discriminar os soros dos pacientes com esporotricose daqueles sem esporotricose ou com PCM. No entanto, a estratégia utilizando uréia 6M melhorou significativamente o poder de discriminação do método. As melhores condições do teste foram tratamento com uréia por 5, 10 e 20 minutos e diluição dos soros a 1\800 e 1\1600.