Doutorado em Biociências Aplicadas à Saúde

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Navegando Doutorado em Biociências Aplicadas à Saúde por Orientador(a) "Giusti, Fabiana Cardoso Vilela"

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    ItemAcesso aberto (Open Access)
    Efeitos da CO-Q10 sobre parâmetros semelhantes à depressão induzidos pela obesidade precoce
    (Universidade Federal de Alfenas, 2025-02-06) Souza, Carolina Soares Horta De; Giusti, Fabiana Cardoso Vilela; Cutti, Bruna Kalil; Vieira, Fernando Vitor; Ribeiro, Ana Cláudia Alves Freire; Garcia, Tayllon Dos Anjos
    A obesidade pode ocasionar depressão e acometer indivíduos na fase precoce da vida. O tratamento farmacológico apresenta restrições principalmente nesta fase da vida. O uso de nutracêuticos como a Coenzima Q-10 (Co-Q10), pode ser uma alternativa, uma vez que a CoQ10 apresenta importantes propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes. Com isso, aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais (0009/2021), o objetivo do trabalho foi avaliar os efeitos da Co-Q10 sobre os parâmetros do tipo depressivos de ratos com obesidade precoce induzida por redução de ninhada. Para isso, utilizou-se o protocolo de redução do tamanho da ninhada, sendo os grupos padronizados no PND1 da seguinte forma: ninhada reduzida (NR) 2 machos e 2 fêmeas, e ninhada normal (NN) 6 machos e 6 fêmeas. Entre o PND2 e PND5, foi observado o Comportamento Materno (CM) das progenitoras. No PND21 ocorreu o desmame dos filhotes, separados por sexo, em quatro grupos: NN veículo; NN CoQ10; NR veículo; e NR Co-Q10, e se deu início a suplementação, via oral, de Co-Q10 (100mg/Kg), ou de veículo (óleo de soja, 10ml/Kg) até o PND36. Na prole foram realizados: teste de Campo Aberto (PND32), de Comportamento Social de Brincar (PND33-34) e de Nado Forçado (PND35-36) nos mesmos animais, sendo n=8 animais por grupo. Os animais foram pesados a cada três dias ao longo de todo o experimento para avaliação do ganho de peso da prole. Os resultados foram avaliados utilizando software GraphPad versão 8.0 e analisados empregando-se o teste t de student ou two way ANOVA, seguida do pós-teste de Bonferroni. Com relação ao CM, houve aumento da porcentagem dos parâmetros maternais do grupo NR em relação ao grupo NN. Com relação ao ganho de peso da prole, o grupo NR apresentou maior ganho de peso corporal em relação ao grupo NN a partir do PND16, mantendo-se até o PND36. No teste de Comportamento Social de Brincar, houve diferença entre as ninhadas, sendo: os animais dos grupos NR veículo apresentaram menor tempo de interação social quando comparados aos grupos NN veículo; os animais do grupo NR Co-Q10 apresentaram menor tempo de interação social quando comparados aos animais do grupo NN Co-Q10. Porém, não houve diferença entre os grupos com relação aos tratamentos, tanto para os animas dos grupos NR quanto para os animais dos grupos NN. No teste de Nado Forçado, animais machos e fêmeas dos grupos NR veículo apresentaram maior tempo de imobilidade em relação aos grupos NN veículo; os grupos NR Co-Q10 apresentaram menor tempo de imobilidade em relação aos grupos NR veículo. Conclui-se, portanto, que a suplementação com Co-Q10 foi capaz de atenuar os parâmetros do tipo depressivo na prole, evidenciados no teste de nado forçado. Não houve diferença quanto à atividade locomotora exploratória no teste de Campo Aberto.
    Obesity can cause depression and affect individuals early in life. Pharmacological treatment presents restrictions especially at this stage of life. The use of nutraceuticals such as Coenzyme Q-10 (Co-Q10) can be an alternative, since Co-Q10 has important anti-inflammatory and antioxidant properties. Therefore, approved by the Animal Use Ethics Committee (0009/2021), the objective of the work was to evaluate the effects of Co-Q10 on depressive-type parameters in rats with early obesity induced by litter reduction. For this, the litter size reduction protocol was used, with the groups standardized in PND1 as follows: reduced litter (NR) 2 males and 2 females, and normal litter (NN) 6 males and 6 females. Between PND2 and PND5, the Maternal Behavior (MC) of the mothers was observed. On PND21, the puppies were weaned, separated by sex, into four groups: NN vehicle; NN Co-Q10; NR vehicle; and NR Co-Q10, and oral supplementation with Co-Q10 (100mg/kg) or vehicle (soybean oil, 10ml/kg) began until PND36. The following were performed on the offspring: Open Field test (PND32), Social Playing Behavior (PND33-34) and Forced Swimming (PND35-36) on the same animals, with n=8 animals per group. The animals were weighed every three days throughout the experiment to evaluate the weight gain of the offspring. The results were evaluated using GraphPad software version 8.0 and analyzed using the student's t test or two-way ANOVA, followed by the Bonferroni post-test. Regarding CM, there was an increase in the percentage of maternal parameters in the NR group compared to the NN group. Regarding offspring weight gain, the NR group showed greater body weight gain compared to the NN group from PND16 onwards, maintaining this until PND36. In the Social Playing Behavior test, there was a difference between the litters, as follows: animals in the NR vehicle groups showed less social interaction time when compared to the NN vehicle groups; animals in the NR Co-Q10 group showed shorter social interaction times when compared to animals in the NN Co-Q10 group. However, there was no difference between the groups in relation to treatments, both for the animals in the NR groups and for the animals in the NN groups. In the Forced Swim test, male and female animals from the NR vehicle groups showed longer immobility time compared to the NN vehicle groups; the NR Co-Q10 groups showed shorter immobility time compared to the NR vehicle groups. It is concluded, therefore, that supplementation with Co-Q10 was able to attenuate depressive-type parameters in the offspring, evidenced in the forced swimming test. There was no difference regarding exploratory locomotor activity in the Open Field test.
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    ItemAcesso aberto (Open Access)
    Obesidade precoce induz comportamentos tipo-depressivos e altera a expressão de GFAP no córtex pré-frontal
    (Universidade Federal de Alfenas, 2023-10-27) Nones, Débora Cristina Da Cunha; Giusti, Fabiana Cardoso Vilela; Cutti, Bruna Kalil; Garcia, Tayllon Dos Anjos; Ribeiro, Ana Cláudia Alves Freire; Zavan, Bruno
    A obesidade infantil e os transtornos mentais, incluindo a depressão, crescem de forma acelerada, trazendo inúmeras consequências ao indivíduo. O objetivo do trabalho foi avaliar a influência da obesidade precoce induzida por redução de ninhada no desenvolvimento dos sintomas semelhantes aos de depressão além da expressão de proteína ácida fibrilar glial (GFAP). Utilizou-se redução de ninhada , sendo ninhada reduzida (NR) com 4 filhotes (2 machos e 2 fêmeas) e ninhada normal (NN) contendo 12 filhotes (6 machos e 6 fêmeas). Foi avaliado o comportamento materno das progenitoras entre os dias pós-parto 2 e 5. Nos testes comportamentais com a prole foi realizado o teste de campo aberto, teste de comportamento social de brincar e teste de nado forçado. Foi realizada pesagem dos tecidos retroperitoneal, perigonadal e quantificação da expressão de GFAP do hipocampo e córtex pré-frontal por Western Blotting. O trabalho foi aprovado pela comissão de ética para uso de animais sob o número 036/2021. Os resultados foram avaliados através do software GraphPad versão 8.0. Comportamento materno foi avaliado pelo teste t de student. Para o peso utilizou-se 2-way RM ANOVA seguido pelo teste de Newman-Keuls, usando ninhada (NN e NR) e dias repetidos (1 a 36). Para os testes de comportamento, gorduras e western blotting utilizou-se ANOVA de duas vias seguido pelo teste de comparação múltipla de Newman-Keuls considerando os fatores de ninhada (NN ou NR) e sexo (macho ou fêmea) como fatores e para a correlação o teste de Pearson. A redução de ninhada aumentou o parâmetro maternal de lamber o filhote e diminuiu o parâmetro não maternal de ficar fora do ninho sem explorar. Houve ganho de peso mais acentuado nos animais de NR, tanto machos quanto fêmeas, a partir do PND25 que se manteve até o PND36. Observou-se maior peso da gordura retroperitoneal dos animais de NR, tanto nos machos quanto nas fêmeas e uma maior quantidade de gordura perigonadal nas fêmeas. Não houve alteração na atividade locomotora no teste de campo aberto. No teste de comportamento social de brincar houve redução no tempo de interação nos animais de NR, tanto nos machos quanto nas fêmeas. No teste de nado forçado os animais machos da NR apresentaram maior tempo de imobilidade. Observou-se ainda aumento da expressão da proteína GFAP no córtex pré-frontal dos animais machos de NR. Encontrou-se correlação entre o peso e tecido adiposo e a expressão de GFAP e entre a expressão de GFAP e tempo de imobilidade no nado forçado. Conclui-se que a redução de ninhada aumentou o comportamento maternal e diminuiu os não maternais além de induzir o excesso de peso no período pré-púbere. Encontrando sintomas tipo depressivo acentuados em machos possivelmente por apresentarem uma astrogliose, caracterizada por maior expressão de GFAP no córtex pré-frontal.
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    ItemAcesso aberto (Open Access)
    Síndrome metabólica ou diabetes acentua os sintomas semelhantes ao transtorno do estresse pós-traumatico e a ativação glial
    (Universidade Federal de Alfenas, 2020-06-12) Ribeiro, Ana Cláudia Alves Freire; Giusti, Fabiana Cardoso Vilela; Silva, Josie Resende Torres Da; Paula, Hudsara Aparecida De Almeida; Graceli, Jones Bernardes; Kirsten, Thiago Berti
    A alteração psiquiátrica desencadeada após uma experiência ou evento traumático, é caracterizado como o transtorno do estresse pós-traumático (TEPT). Estudos demonstram que o TEPT pode modificar o metabolismo, porém se o metabolismo alterado pode modificar seu desenvolvimento ainda não é esclarecido. Assim, o presente trabalho investigou as influências do desenvolvimento do TEPT nas alterações metabólicas, síndrome metabólica (SM) e diabetes. Experimento 1: foi investigado a caracterização da SM nos animais que ingeriram a solução 10% de frutose ou da diabetes nos animais que receberam dose única de aloxana (150 mg/Kg) pela via intraperitoneal. Experimento 2: após caracterização (SM ou diabetes) os grupos de animais foram expostos ou não ao choque inescapável e isolamento social (14dias) e foram avaliados nos seguintes testes comportamentais: aparato do campo aberto, teste de interação social, nado forçado, aparato de labirinto em cruz elevado e teste de reconhecimento de objetos. Além, da verificação de quantificação de proteínas (técnica de Western Blotting) para avaliação da expressão da proteína fibrilar ácida da glia (GFAP) e molécula adaptadora de ligação de cálcio ionizada 1 (Iba-1) no hipocampo e córtex. Os resultados demonstram que os animais SM TEPT e Controle TEPT apresentaram um aumento no tempo de congelamento, aumento da imobilidade no teste do nado forçado (sugerindo um comportamento tipo depressivo), aumento no tempo nos braços fechados e redução do tempo nos braços abertos (sugerindo um comportamento tipo ansioso), redução na interação social e déficit de memória dos animais comparados aos seus respectivos controles (Controle não TEPT e SM não TEPT). Os animais Diabetes TEPT e Controle TEPT comparados aos seus respectivos controles (Controle não TEPT e Diabetes não TEPT) apresentaram resultados semelhantes aos encontrados em animais com SM. Além disso, vale ressaltar que essas alterações foram mais acentuadas nos animais SM TEPT e Diabetes TEPT comparado aos seus respectivos Controles TEPT. Em relação a ativação glial foi observado um aumento da expressão de GFAP e Iba-1 nos animais SM TEPT e um aumento da expressão de GFAP nos animais diabetes TEPT. Portanto, é possível concluir que a SM ou diabetes preexistente acentua os sintomas relacionados ao TEPT. E nos animais SM TEPT as alterações observadas podem estar relacionadas com a ativação glial.
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    ItemAcesso aberto (Open Access)
    Transtorno do estresse pós-traumático aumenta a sensibilidade à dor por reduzir a modulação descendente serotoninérgica e noradrenérgica
    (Universidade Federal de Alfenas, 2020-12-15) Domingues, Jádina Santos Vieira; Giusti, Fabiana Cardoso Vilela; Souza, Giovane Galdinio De; Reis, Luciana Maria Dos; Silveira, Anderson Luiz Bezerra Da; Crunfli, Fernanda
    Estresses psicológicos crônicos têm afetado grande parte da população mundial, promovendo mudanças negativas a curto e a longo prazo. Um tipo de estresse que vem sendo estudado é a PTSD (Post Traumatic Stress Disorder) ou Desordem do Estresse Pós-Traumático, caracterizada por alterações psiquiátricas crônicas desencadeadas após uma experiência traumática. Dentre as principais características clínicas dessa desordem, destacam-se o medo, isolamento social, depressão e ansiedade, reduzindo de alguma forma a sensibilidade nociceptiva. A fisiopatologia dessas manifestações envolve déficits de serotonina e noradrenalina, responsáveis também pela modulação na via descendente modulatória da dor. Sendo assim, o presente trabalho teve como objetivos verificar o desenvolvimento da PTSD em animais expostos ao choque, avaliar a resposta nociceptiva desses animais e investigar o envolvimento e participação da via descendente modulatória da dor. Antes de iniciarem os experimentos, os procedimentos experimentais foram previamente encaminhados e obtiveram aprovação do CEUA da UNIFAL-MG com protocolo nº50/2016. Foram utilizados ratos Wistar machos, submetidos ao choque de 0,8 mA por 5 vezes aleatórias seguido por isolamento social. Para indução da PTSD, os animais foram reexpostos à caixa indutora de choque sob retenção e isolamento social por 7, 14 e 21 dias, divididos em grupos diferentes. Para confirmação do desenvolvimento da PTSD foi avaliado o comportamento em freezing e realizados os testes de campo aberto, labirinto em cruz elevado, interação social, memória, avaliação do número de bolos fecais e peso das glândulas adrenais. Para avaliação do limiar nociceptivo e mecânico, foram realizados os testes de formalina e Von Frey com filamentos. Para o estudo da participação do sistema descendente inibitório da dor, foram utilizadas Fluoxetina e Desipramina administradas por via intratecal previamente ao teste de formalina. Após os testes, os animais foram perfundidos e o Núcleo Dorsal da Rafe, Locus Coeruleus (LC) e medula espinal (L4-L6) foram dissecados para imunohistoquímica para avaliar o número de neurônios imunorreativos para c-Fos, triptofano hidroxilase c-Fos/triptofano hidroxilase, c-Fos/tirosina hidroxilase respectivamente. Nossos resultados demonstraram um aumento do tempo em freezing dos animais expostos ao choque quando comparados aos não expostos, aumento do tempo de permanência nos braços fechados frente ao teste de labirinto em cruz elevado, redução da interação social, prejuízo nas memórias de curta e longa duração, aumento do número do peso das glândulas adrenais e do número de bolos fecais quando comparados ao grupo não exposto ao choque. Observamos ainda uma redução da distância percorrida nos animais expostos ao choque sob retenção de 21 dias quando comparados aos não expostos. Os animais com PTSD apresentaram diminuição do limiar mecânico e aumento da sensibilidade à dor em todos os períodos de retenção nos testes de Von Frey com filamentos e formalina respectivamente, quando comparados aos seus respectivos controles. Foi observado que os animais com PTSD demonstraram uma diminuição do número de neurônios serotoninérgicos e noradrenérgicos e proteína c-fos imunorreativas no Núcleo Dorsal da Rafe e Locus Coeruleus respectivamente. Além disso, foi avaliado o número de ativações neuronais no corno dorsal da medula espinal e observado uma redução do número de c-FOS ativados. Diante de todos os dados apresentados, conclui-se que a Desordem do Estresse Pós Traumático (PTSD) aumentou a sensibilidade à dor através da redução da atividade de neurônios serotoninérgicos e noradrenérgicos no Núcleo Dorsal da Rafe e Locus Coeruleus respectivamente e através da redução da ativação neuronal (c-FOS no corno dorsal da medula espinal, possivelmente influenciando na via descendente modulatória da dor.