Doutorado em Biociências Aplicadas à Saúde

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Acesso aberto (Open Access)
Efeitos da Maca Vermelha (Lepidium meyenii Walp.) sobre variáveis metabólicas, comportamentais e sobre a microbiota intestinal de ratas Wistar ovariectomizadas
(2025-04-28) Martins, Angela Maria; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Paula, Hudsara Aparecida de Almeida; Pereira, Marília Gabriella Alves Goulart; Ceron, Carla Speroni; Fonseca, Wesley Fernandes
A Maca tem sido amplamente utilizada na medicina complementar para tratar infertilidade, redução da libido e outros sintomas associados à menopausa. O presente estudo explorou a influência da suplementação oral com Maca Vermelha em indicadores comportamentais, metabólicos e bioquímicos associados ao hipoestrogenismo. Após aclimatação, ratas Wistar adultas foram submetidas à ovariectomia (OVX) ou cirurgia simulada (SHAM). Os animais foram então tratados por gavagem com uma suspensão de Maca Vermelha (100 mg/kg/dia) por 21 dias. Ao final do tratamento, os animais foram submetidos ao teste de campo aberto e eutanasiados para coleta do útero, hipófise, adeno-hipófise, timo, tecidos adiposos branco e marrom e do plasma para as análises de glicemia casual, colesterol total, triglicerídeos, lactato e cálcio. Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da UNIFAL/MG (protocolo 005/2022). Tanto a OVX quanto a administração da Maca Vermelha não alteraram a glicemia casual, o perfil lipídico plasmático e as concentrações de cálcio. Além disso, o tratamento com Maca Vermelha não modificou as alterações induzidas por OVX na massa corporal, índice uterino ou tamanho relativo do tecido adiposo marrom. No entanto, a Maca Vermelha preveniu a diminuição induzida pela OVX na massa relativa da hipófise, indicando um papel potencial no controle central da função gonadal. A administração de Maca Vermelha induziu ainda a um efeito ansiolítico em animais OVX, mas não em animais SHAM, o que ocorreu em paralelo com alterações do perfil da microbiota intestinal. A análise da composição da Maca Vermelha revelou quantidades significativas de flavonoides, que podem estar subjacentes à importante atividade antioxidante, conforme demonstrado por ensaios de eliminação de radicais in vitro. Portanto, a Maca Vermelha pode ser considerada um alimento funcional em potencial para gerenciar alterações associadas ao hipoestrogenismo, particularmente no comportamento e na saúde intestinal. No entanto, o uso mais prolongado deve ser avaliado por estudos futuros, a fim de validar os efeitos benéficos da Maca Vermelha em marcadores metabólicos, comportamentais e bioquímicos.
Embargo
Análise do feedforward, eletromiografia e força muscular em voluntários do grupo de risco para covid-19 submetidos a um protocolo de exercícios domiciliares: ensaio clínico randomizado, controlado, cross over
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-09-22) Silva, Roberta De Oliveira E; Carvalho, Leonardo César; Hermes, Tulio De Almeida; Oliveira, Fabricio Borges; Pegorari, Maycon Sousa; Iunes, Denise Holanda
Introdução: O Diabetes Mellitus (DM) é um distúrbio metabólico grave que leva à hiperglicemia crônica, condição patogênica que pode incluir defeitos na secreção e/ou ação da insulina. O DM tipo 2 (DM2) pode induzir a neuropatia e consequente redução da força muscular. Este estudo foi dividido em quatro etapas. Na primeira etapa objetivou-se aplicar o Questionário de Atividades de autocuidado com o Diabetes (QAD) em voluntários portadores de DM2 durante a pandemia do COVID-19; na segunda etapa foi proposto um instrumento para mensurar a força isométrica dos músculos flexores dos pododáctilos individualmente por meio de um dinamômetro isométrico específico de fácil reprodutibilidade e baixo custo; na terceira etapa o objetivo foi comparar os resultados da termografia, oximetria e baropodometria dos pés antes e após um programa de exercícios para a musculatura intrínseca dos pés em voluntários portadores de DM2; e na quarta etapa o objetivo foi avaliar os efeitos de dois protocolos de exercícios domiciliares de fortalecimento para os pés sobre os sintomas neuropáticos e as atividades de autocuidado em DM2, avaliar o tempo de resposta motora por meio do PhysioPlay e avaliar a força do músculo flexor curto dos dedos através da eletromiografia e dinamometria de ambos os pés de voluntários portadores de DM2. Método: 109 voluntários com diagnóstico prévio de DM2 foram randomizados em dois grupos: Controle (GC) e Intervenção (GI). Ambos realizaram dois protocolos de exercícios domiciliares por 30 minutos três vezes na semana para fortalecimento da musculatura intrínseca dos pés, sendo avaliados antes e após cada protocolo. Houve um período de washout de dois meses, após esse período as intervenções foram realocadas de modo cross-over. Resultados: O QAD apresentou alterações significativas no GI; no instrumento proposto os resultados demonstraram ICC excelente em todos os dedos; houve diferença estatística em alguns parâmetros da termografia principalmente no GI; a oximetria apresentou aumento no terceiro e quarto dedos esquerdo no GC e diminuição no primeiro e quarto dedos direito no GI; na baropodometria, houve aumento da pressão média em ambos os pés nos dois grupos com os olhos abertos, a pressão máxima com os olhos fechados diminuiu no pé direito no GI, os dados estabilométricos apresentaram diferença estatística na maioria dos parâmetros em ambos os grupos; o ESN apresentou sintomas leves com diminuição após exercícios em ambos os grupos; no ECN houve aumento do escore no GI; no tempo de resposta motora do GC com os olhos abertos houve diminuição do tempo na abdução do quadril direito à 10° e aumento à 20°, com os olhos fechados houve diminuição no quadril esquerdo à 10°, no GI houve aumento no quadril direto à 10°; a eletromiografia não apresentou resultados significativos; na dinamometria a força dos músculos flexores dos dedos aumentou no GC no hálux e quarto dedo direito e, no segundo, terceiro e quarto dedos esquerdo e no GI aumentou no segundo, quarto e quinto dedos direito e, segundo, terceiro e quarto dedos esquerdo. Conclusão: Os achados atendem ao objetivo do estudo evidenciando que os exercícios para o fortalecimento da musculatura intrínseca dos pododáctilos foi um fator primordial para a mudança dos parâmetros avaliados. Podemos perceber que pequenas mudanças na rotina de cuidado de voluntários diabéticos são essenciais para a melhora do enfrentamento da doença e prevenção de lesões associadas.
Acesso aberto (Open Access)
Análise da ação do canabidiol no modelo experimental de distrofia muscular de Duchenne
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-07-03) Ferreira, Laís Leite; Gamero, Angel Mauricio Castro; Ionta, Marisa; Silva, Marcelo Aparecido Da; Aissa, Alexandre Ferro; Moraes, Luís Henrique Rapucci
A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é um distúrbio genético grave, ligada ao cromossomo X, que causa degeneração progressiva da musculatura esquelética. O canabidiol (CBD) exerce diversos efeitos benéficos, incluindo propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes. Diante do potencial ação benéfica do CBD, neste estudo verificamos o efeito in vitro do óleo de CBD full spectrum na viabilidade da fibra muscular distrófica e do efeito in vivo na hepatoxicicidade, mionecrose, inflamação e estresse oxidativo do modelo de DMD. Para análise in vitro, utilizouse células distróficas de camundongos mdx, tratadas com CBD full spectrum e foi avaliada a viabilidade celular por MTT. Na análise in vivo utilizou-se duas linhagens de camundongos sendo uma C57BL/10 (BL10) e a outra linhagem de camundongo mdx, esta última dividida em três grupos, sendo o primeiro grupo tratado com salina (mdxSAL; n=7), o segundo grupo tratado com óleo de semente de uva (mdxOU; n=7) e o terceiro grupo tratado com óleo de CBD full spectrum (mdxCBD; n=7) 10mg/Kg durante 14 dias. Após o tratamento, foi analisado o biomarcador Creatina quinase (CK) pelo sangue, a histomorfometria dos hepatócitos e os níveis de glicogênio hepático, além da histopatologia dos músculos diafragma (DIA) e quadríceps (QUA), analisando fibras mionecróticas, processos inflamatórios e o estresse oxidativo. No estudo in vitro, óleo de CBD full spectrum produziu efeito citotóxico de maneira dosedependente nas células musculares de camundongos distróficos. No estudo in vivo, o tratamento com óleo de CBD full spectrum aumentou o glicogênio hepático produzindo melhorias do fenótipo distrófico do camundongo mdx. Na análise dos músculos DIA e QUA, o tratamento com óleo de CBD full spectrum, preveniu o processo da mionecrose, reduzindo os níveis séricos de CK, a presença de núcleos centrais e marcação positiva ao IgG no tecido muscular distrófico. Preveniu a inflamação, reduzindo a área inflamatória, a presença de macrófagos e os níveis de NF-κB. Além disso, preveniu o estresse oxidativo, aumentando a ação antioxidante das moléculas CAT e GSH e evitou a instalação e exacerbação precoce do estresse oxidativo ainda em estágios iniciais da doença, com a diminuição da lipofuscina no músculo distrófico dos camundongos mdx. O tratamento com de óleo de CBD full spectrum demonstrou ser seguro e eficaz na redução dos parâmetros diretos e indiretos de avaliação da miopatia da DMD em estágio iniciais da doença. Os resultados indicam que o óleo de CBD full spectrum pode representar uma nova abordagem promissora para tratamento da DMD.
Acesso aberto (Open Access)
Efeitos da CO-Q10 sobre parâmetros semelhantes à depressão induzidos pela obesidade precoce
(Universidade Federal de Alfenas, 2025-02-06) Souza, Carolina Soares Horta De; Giusti, Fabiana Cardoso Vilela; Cutti, Bruna Kalil; Vieira, Fernando Vitor; Ribeiro, Ana Cláudia Alves Freire; Garcia, Tayllon Dos Anjos
A obesidade pode ocasionar depressão e acometer indivíduos na fase precoce da vida. O tratamento farmacológico apresenta restrições principalmente nesta fase da vida. O uso de nutracêuticos como a Coenzima Q-10 (Co-Q10), pode ser uma alternativa, uma vez que a CoQ10 apresenta importantes propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes. Com isso, aprovado pela Comissão de Ética no Uso de Animais (0009/2021), o objetivo do trabalho foi avaliar os efeitos da Co-Q10 sobre os parâmetros do tipo depressivos de ratos com obesidade precoce induzida por redução de ninhada. Para isso, utilizou-se o protocolo de redução do tamanho da ninhada, sendo os grupos padronizados no PND1 da seguinte forma: ninhada reduzida (NR) 2 machos e 2 fêmeas, e ninhada normal (NN) 6 machos e 6 fêmeas. Entre o PND2 e PND5, foi observado o Comportamento Materno (CM) das progenitoras. No PND21 ocorreu o desmame dos filhotes, separados por sexo, em quatro grupos: NN veículo; NN CoQ10; NR veículo; e NR Co-Q10, e se deu início a suplementação, via oral, de Co-Q10 (100mg/Kg), ou de veículo (óleo de soja, 10ml/Kg) até o PND36. Na prole foram realizados: teste de Campo Aberto (PND32), de Comportamento Social de Brincar (PND33-34) e de Nado Forçado (PND35-36) nos mesmos animais, sendo n=8 animais por grupo. Os animais foram pesados a cada três dias ao longo de todo o experimento para avaliação do ganho de peso da prole. Os resultados foram avaliados utilizando software GraphPad versão 8.0 e analisados empregando-se o teste t de student ou two way ANOVA, seguida do pós-teste de Bonferroni. Com relação ao CM, houve aumento da porcentagem dos parâmetros maternais do grupo NR em relação ao grupo NN. Com relação ao ganho de peso da prole, o grupo NR apresentou maior ganho de peso corporal em relação ao grupo NN a partir do PND16, mantendo-se até o PND36. No teste de Comportamento Social de Brincar, houve diferença entre as ninhadas, sendo: os animais dos grupos NR veículo apresentaram menor tempo de interação social quando comparados aos grupos NN veículo; os animais do grupo NR Co-Q10 apresentaram menor tempo de interação social quando comparados aos animais do grupo NN Co-Q10. Porém, não houve diferença entre os grupos com relação aos tratamentos, tanto para os animas dos grupos NR quanto para os animais dos grupos NN. No teste de Nado Forçado, animais machos e fêmeas dos grupos NR veículo apresentaram maior tempo de imobilidade em relação aos grupos NN veículo; os grupos NR Co-Q10 apresentaram menor tempo de imobilidade em relação aos grupos NR veículo. Conclui-se, portanto, que a suplementação com Co-Q10 foi capaz de atenuar os parâmetros do tipo depressivo na prole, evidenciados no teste de nado forçado. Não houve diferença quanto à atividade locomotora exploratória no teste de Campo Aberto.
Obesity can cause depression and affect individuals early in life. Pharmacological treatment presents restrictions especially at this stage of life. The use of nutraceuticals such as Coenzyme Q-10 (Co-Q10) can be an alternative, since Co-Q10 has important anti-inflammatory and antioxidant properties. Therefore, approved by the Animal Use Ethics Committee (0009/2021), the objective of the work was to evaluate the effects of Co-Q10 on depressive-type parameters in rats with early obesity induced by litter reduction. For this, the litter size reduction protocol was used, with the groups standardized in PND1 as follows: reduced litter (NR) 2 males and 2 females, and normal litter (NN) 6 males and 6 females. Between PND2 and PND5, the Maternal Behavior (MC) of the mothers was observed. On PND21, the puppies were weaned, separated by sex, into four groups: NN vehicle; NN Co-Q10; NR vehicle; and NR Co-Q10, and oral supplementation with Co-Q10 (100mg/kg) or vehicle (soybean oil, 10ml/kg) began until PND36. The following were performed on the offspring: Open Field test (PND32), Social Playing Behavior (PND33-34) and Forced Swimming (PND35-36) on the same animals, with n=8 animals per group. The animals were weighed every three days throughout the experiment to evaluate the weight gain of the offspring. The results were evaluated using GraphPad software version 8.0 and analyzed using the student's t test or two-way ANOVA, followed by the Bonferroni post-test. Regarding CM, there was an increase in the percentage of maternal parameters in the NR group compared to the NN group. Regarding offspring weight gain, the NR group showed greater body weight gain compared to the NN group from PND16 onwards, maintaining this until PND36. In the Social Playing Behavior test, there was a difference between the litters, as follows: animals in the NR vehicle groups showed less social interaction time when compared to the NN vehicle groups; animals in the NR Co-Q10 group showed shorter social interaction times when compared to animals in the NN Co-Q10 group. However, there was no difference between the groups in relation to treatments, both for the animals in the NR groups and for the animals in the NN groups. In the Forced Swim test, male and female animals from the NR vehicle groups showed longer immobility time compared to the NN vehicle groups; the NR Co-Q10 groups showed shorter immobility time compared to the NR vehicle groups. It is concluded, therefore, that supplementation with Co-Q10 was able to attenuate depressive-type parameters in the offspring, evidenced in the forced swimming test. There was no difference regarding exploratory locomotor activity in the Open Field test.
Embargo
Papel do WT161, inibidor específico da hdac6, sobre a progressão tumoral e instabilidade cromossômica em glioblastoma
(Universidade Federal de Alfenas, 2025-02-07) Oliveira, Leilane Sales De; Gamero, Angel Mauricio Castro; Silva, Luciana Maria; Vieira, Társis Antônio Paiva; Leopoldino, Andreia Machado; Oliveira Júnior, Robson José De
O Glioblastoma (GBM) é considerado a forma mais agressiva e comum de tumores cerebrais em adultos, e de pior prognóstico com uma sobrevida média de cerca de quinze meses. Atualmente, o tratamento do GBM envolve ressecção cirúrgica seguido por radioterapia concomitante à administração de temozolomida (TMZ), porém a heterogeneidade genética e celular e/ou a falha das vias de reparo de DNA nesse tipo tumoral conferem elevada resistência ao quimioterápico. Dessa forma, faz-se necessário o aprimoramento das estratégias das terapias convencionais. O controle epigenético aberrante é um evento precoce da progressão tumoral, na qual a enzima histona desacetilase 6 (HDAC6) desempenha um papel crucial modulando a função de proteínas histônicas, além de proteínas não histônicas e fatores de transcrição tais como E2F, p53, c-Myc, NF-κB. Nesse contexto, surgem os inibidores de HDAC6 como possíveis agentes antitumorais, por exemplo o composto WT161, cujo potencial antiproliferativo tem sido evidenciado em alguns tipos de câncer, como retinoblastoma, osteosarcoma, mieloma múltiplo e câncer de mama. Assim, a presente pesquisa busca investigar a ação antitumoral de WT161 de forma isolada ou combinada com TMZ sobre a progressão tumoral e instabilidade cromossômica (CIN) em linhagens celulares de GBM, U251, U87 (sensíveis à TMZ) e T98G (resistente à TMZ). A avaliação da eficiência antiproliferativa de WT161 se deu utilizando o ensaio com MTT. Na análise de combinação de drogas foram empregadas diferentes estratégias de administração (simultânea e sequencial), baseadas no método de Chou-Talalay. WT161 diminuiu significativamente a proliferação celular das linhagens de GBM de forma isolada, e de forma sinérgica, quando combinado de forma simultânea com TMZ, para todas as células investigadas. Os ensaios de clonogenicidade mostraram que a capacidade das células formarem colônias foi eficientemente inibida pelo tratamento. De forma interessante, esses resultados ainda foram corroborados em modelos de cultura tridimensional (3D) das células U251 e T98G. Além disso, WT161 provocou apoptose e parada do ciclo celular na fase G2/M, além de reduzir significativamente a atividade migratória (2D e 3D) e invasiva das linhagens de GBM. Esses dados foram acompanhados com o aumento da expressão da proteína α-tubulina acetilada comprovando a efetiva inibição de HDAC6, aumento da clivagem da proteína marcadora de apoptose PARP e redução dos níveis de β-catenina, após exposição a WT161. Desde o ponto de vista cromossômico, WT161 induziu aumento significativo da quantidade de micronúcleos, pontes nucleoplasmáticas, metáfases desalinhadas e fusos multipolares, além de promover aneuploidia nas células T98G, identificados pelo ensaio de micronúcleos com bloqueio de citocinese, ensaio de erros mitóticos, e hibridização in situ por fluorescência (FISH), demonstrando o aumento da CIN dessas células após inibição de HDAC6. Finalmente, WT161 alterou a dinâmica metabólica da linhagem T98G. Destacamos assim, o importante papel biológico de HDAC6 sobre o fenótipo neoplásico, afetando especialmente os perfis de progressão tumoral e CIN, e apontamos o potencial terapêutico de WT161 como promissor agente anti-GBM.
Embargo
Avaliação pré-clínica de esteroide anabólico androgênico como indutor de distúrbios comportamentais, ovarianos, uterinos e reprodutivos
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-08-29) Barcelos, Mônica Naves; Novaes, Rômulo Dias; Lima, Graziela Domingues De Almeida; Santos, Elda Gonçalves Dos; Santos, Eliziária Cardoso Dos; Neves, Juliana Dos Santos
O consumo de forma prolongada e excessiva de Esteroides Anabolizantes Androgênicos (EAA) causa alterações patológicas em órgãos vitais, como o coração e em outros sistemas do corpo, como o sistema reprodutor, renal e hepático. Atualmente, há uma crescente ao que se refere ao uso de EAA, principalmente de forma indiscriminada, ou seja, sem acompanhamento de especialista. Apesar dos benefícios que seu uso pode proporcionar, existem evidências que comprovam que o uso excessivo de anabolizantes esteroides, ocasiona danos reversíveis e muitas vezes irreversíveis, como, óbito. O objetivo deste estudo foi avaliar a utilização do 17ȕ-ciclopentilpropionato de testosterona em distúrbio no aparelho reprodutor feminino. Para tanto, foram utilizados camundongos fêmeas que foram medicadas com o andrógeno e depois sacrificadas para que seus órgãos reprodutivos fossem analisados. Doses de 5, 10 e 20 mg/kg de 17ȕ-ciclopentilpropionato de testosterona foram aplicadas nos camundongos fêmeas e os resultados mostraram a influência deste no sistema reprodutor feminino. Palavras-chave: Esteroides anaboli
Acesso aberto (Open Access)
Participação do receptor cb1 nas respostas homeostáticas induzidas por estresse de contenção
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-06-11) Chagas, Luana Aparecida; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Godoy, Lívea Dornela; Pereira, Marília Gabriella Alves Goulart; Fonseca, Wesley Fernandes; Ventura, Renato Rizo
Os distúrbios relacionados ao estresse estão se tornando cada vez mais comuns e frequentemente associados a deficiências cognitivas. Neste contexto, o sistema endocanabinóide (SEC), particularmente o receptor canabinóide tipo 1 (CB1), parece desempenhar um papel decisivo na restauração da homeostase corporal. Há evidências consistentes na literatura de que a interrupção da neurotransmissão mediada por CB1 pode, em última análise, contribuir para doenças relacionadas ao estresse. Portanto, o presente estudo teve como objetivo avaliar a participação dos receptores CB1 na integridade das respostas periféricas e comportamentais induzidas pelo estresse. Para tanto, ratos Wistar machos adultos foram submetidos a contenção física (1h/dia, durante 7 dias), seguida de administração única de rimonabanto (antagonista do receptor CB1, 3mg/Kg, intraperitonial) ao final do protocolo de estresse. Os animais foram então submetidos à avaliação das respostas neuroendócrinas, testes comportamentais e quantificação da imunorreatividade do Iba-1 (microglial) nas subdivisões parvocelulares do núcleo paraventricular do hipotálamo (PVN). Não foram detectados efeitos do estresse de contenção ou da administração de rimonabanto na variação da massa corporal. No entanto, o estresse aumentou significativamente a massa relativa adrenal e a secreção de corticosterona e reduziu o tamanho relativo do timo. Os efeitos do estresse no tamanho da adrenal e nos níveis plasmáticos de corticosterona estavam ausentes em ratos tratados com rimonabanto, mas o tamanho do timo foi ainda mais reduzido no grupo de restrição com rimonabanto. O estresse por restrição também induziu anhedonia e reduziu o índice de reconhecimento de objetos, indicando comprometimento da recuperação da memória. O tratamento com o antagonista CB1 reverteu significativamente a anedonia induzida pelo estresse e o déficit de memória. No PVN, o estresse de restrição reduziu o número de células positivas para Iba-1 na região parvocelular medial de animais tratados com veículo, mas não com rimonabanto. Tomados em conjunto, estes resultados indicam que a inibição aguda da via endógena mediada por CB1 restaura comportamentos semelhantes à depressão induzidos pelo stress e perda de memória, sugerindo um papel para os endocanabinóides na interacção neuroimune-endócrina tanto a nível periférico como hipotalâmico.
Acesso aberto (Open Access)
Impact of trypanothione reductase inhibitor on Trypanosoma Cruzi and host cell antioxidant defenses chagas heart disease
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-04-29) Domingues, Elisa Liz Belli Cassa; Novaes, Rômulo Dias; Santos, Eliziária Cardoso Dos; Lima, Graziela Domingues De Almeida; Santos, Elda Gonçalves Dos; Soares, Evelise Aline
Introdução e objetivo: As fenotiazinas inibem as enzimas antioxidantes nos tripanossomatídeos. No entanto, a homologia entre as enzimas antioxidantes do agente patogénico e da célula hospedeira é uma preocupação central na utilização destes fármacos no tratamento da miocardite infecciosa induzida pelo Trypanosoma cruzi. Assim, a interação da tioridazina (TDZ) com as enzimas antioxidantes do T. cruzi e dos cardiomiócitos, e o seu impacto na infeção celular e cardíaca foi investigada in vitro e in vivo. Métodos: Cardiomiócitos e tripomastigotas em cultura, ecamundongos tratados com TDZ e benznidazol (Bz, droga antiparasitária de referência) foram submetidos a análises microestruturais, bioquímicas e moleculares. Resultados: O TDZ foi mais citotóxico e menos seletivo contra o T. cruzido que o Bz in vitro. Os cardiomiócitos tratados com TDZ desenvolveram um aumento da taxa de infeção, da produção de espécies reativas de oxigénio (ROS),da oxidação lipídica e proteica; atividade semelhante da catalase (CAT) e da superóxido dismutase (SOD), e atividade da glutationa reduzida (peroxidase - GPx, S-tranferase - GST, e redutase - GR) do que as células infectadas não tratadas. O TDZ atenuou a atividade da tripanotiona redutase no T. cruzi e a capacidade antioxidante das proteínas nos cardiomiócitos, tornando estas células mais susceptíveis ao estresse oxidativo induzido por H2O2. In vivo, o TDZ potenciou o parasitismo cardíaco, a produção total de ROS, a miocardite, a oxidação lipídica e proteica, bem como reduziu as atividades da GPx, GR e GST em comparação com os animais não tratados. O benznidazol diminuiu o parasitismo cardíaco, a produção total de ROS, a inflamação cardíaca, a oxidação lipídica e proteica em animais infectados com T. cruzi. Conclusões: Os nossos resultados indicam que o TDZ interage simultaneamente com alvos antioxidantes enzimáticos nos cardiomiócitos e no T. cruzi, potenciando a infeção ao induzir fragilidade antioxidante e aumentando a suscetibilidade dos cardiomiócitos e do coração ao parasitismo, inflamação e dano oxidativo.
Acesso aberto (Open Access)
Efeitos da fotobiomodulação em um modelo de lesão pulmonar em ratos
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-01-19) Figueiredo, Rafaella Rocha; Silva, Marcelo Lourenço Da; Garcia, Tayllon Dos Anjos; Oliveira, Ricardo De; Carvalho, Ravena Carolina De; Kosour, Carolina
Introdução: A fotobiomodulação tem capacidade de modular a resposta inflamatória, reduzindo o infiltrado de células do sistema imune. Sua potencial ação de redução do processo inflamatório poderia ser usada como adjuvante no tratamento da síndrome do desconforto respiratório agudo, umas das principais causas de internações hospitalares. Objetivo: Analisar como a fotobiomodulação atua no recrutamento de neutrófilos, citocinas, mecânica ventilatória, atividade da Mieloperoxidase e histologia do tecido pulmonar em um modelo de inflamação pulmonar aguda em ratos. Métodos 288 ratos Wistar machos tiveram a lesão pulmonar induzida por Lipopolissacarídeo de Escherichia Coli através da instilação traqueal e posteriormente foram submetidos a radiação LED 430 nm, Laser 660 nm e Laser 880 nm. Após 24 horas os animais foram ventilados mecanicamente para análise da resistência, viscância, elastância e histesividade e o pulmão retirado para análise. Resultados: Dentre as fototerapias utilizadas, o laser vermelho 660 nm foi a única capaz de reduzir todas as variáveis da mecânica ventilatória, bem como a atividade da mieloperoxidase, marcadores inflamatórios na análise do RT-QPCR com repercussão visível na análise da histologia pulmonar, sendo capaz de atenuar o processo patológico da Lesão Pulmonar. O mesmo não ocorreu com a aplicação do LED que alterou somente marcadores inflamatórios e com o Laser infravermelho (808 nm) que foi capaz de reduzir somente o fator de necrose tumoral e interleucina seis, com repercussão no corte histológico. Conclusão: O Laser vermelho 660 nm foi capaz de modular o processo inflamatório reduzindo a tempestade de citocinas em animais com lesão pulmonar induzida por Lipopolissacarídeo de Escherichia Coli com repercussão na mecânica ventilatório e visível na análise da histologia pulmonar.
Acesso aberto (Open Access)
Desfechos gestacionais associados ao uso de antidepressivos na gestação de mulheres acompanhadas na atenção primária a saúde e busca experimental de uma alternativa medicamentosa
(Universidade Federal de Alfenas, 2023-11-14) Gonçalves, Aline Mara; Paffaro, Andrea Mollica De Amarante; Leitão, Silvia Graciela Ruginsk; Zavan, Bruno; Araújo, Bianca Bacelar Assis; Roman, Silvane
O tratamento de patologias psiquiátricas na gestação compreende um paradigma, considerando seus riscos e benefícios para mãe e feto. O presente estudo se deu em duas vertentes, sendo a primeira, uma pesquisa quantitativa, descritiva, em humanos; que objetivou avaliar o uso de antidepressivos por mulheres grávidas e suas possíveis consequências no nascimento. Para tanto, a coleta de dados se deu a partir de dados secundários colhidos nos prontuários de gestantes que realizaram acompanhamento pré-natal em três unidades de um município de do Sul de Minas Gerais, nos períodos de janeiro de 2019 a setembro de 2022. Foram registrados os dados sociodemográficos, histórico clínico/obstétrico e informações sobre o parto e o neonato. Os dados obtidos foram transcritos e submetidos às análises pertinentes. A segunda vertente do trabalho se deu pela experimentação animal, com o objetivo de realizar uma análise experimental comparativa dos efeitos da sertralina (SER) e da venlafaxina (VEN) na gestação de camundongos e suas consequências para a mãe e para a prole até sua vida adulta. Fêmeas de camundongos Swiss foram divididas em três grupos experimentais que receberam diariamente, por gavagem orogastrica, 20mg/Kg/dia de sertralina (GSER), 80mg/Kg/dia de venlafaxina (GVEN) e o grupo controle (GC) recebeu solução salina. O tratamento iniciou dez dias antes do acasalamento e durante este período foi avaliada a influência do tratamento no ciclo estral das fêmeas. O acasalamento ocorreu com machos da mesma linhagem e o 1o dia de gestação (ddg) foi marcado pela presença do tampão vaginal. A resistência a prenhez foi avaliada e as fêmeas prenhes foram eutanasiadas no 8o, 11o, e 15o ddg para análise dos cornos uterinos. Nas gestações que chegaram a termo, a prole foi padronizada em oito filhotes e foi avaliado o desenvolvimento físico e neurológico. Os filhotes foram destinados, no primeiro mês de vida, a estudos de memória, ansiedade, depressão e socialização. Observou-se que a SER está entre os psicotrópicos mais utilizados e que este grupo de medicamentos parece ter repercussões negativas nos parâmetros antropométricos e condições de nascimento em humanos. Em camundongos, o tratamento com a SER acarretou ciclos estrais mais longos; alterações nos cornos uterinos como hemorragias, restrição do crescimento intra-uterino, alterações do peso placentário além de redução de peso da prole no nascimento. O tratamento com VEN resultou em alterações no peso placentário. Nos testes comportamentais, a SER causou uma diminuição do comportamento social. A VEN foi associada a comportamentos preditivos de ansiedade na prole e aumento da exploração e sociabilidade. Desta maneira, de acordo com os dados deste trabalho, conclui-se que o tratamento com antidepressivos resulta em piores desfechos gestacionais em humanos, sendo a SER um dos psicotrópicos mais utilizados. No modelo experimental adotado, a VEN apresentou melhor risco- benefício relacionado ao tratamento pré-natal, em relação a SER. No entanto, quando avaliado o comportamento, o efeito ansiogênico da VEN na prole pode ser preocupante. Baseado nos dados descritos, concluiu-se que outros estudos são necessários para avaliações de mais parâmetros relacionados às repercussões destes tratamentos, bem como novas alternativas terapêuticas.
Acesso aberto (Open Access)
Obesidade precoce induz comportamentos tipo-depressivos e altera a expressão de GFAP no córtex pré-frontal
(Universidade Federal de Alfenas, 2023-10-27) Nones, Débora Cristina Da Cunha; Giusti, Fabiana Cardoso Vilela; Cutti, Bruna Kalil; Garcia, Tayllon Dos Anjos; Ribeiro, Ana Cláudia Alves Freire; Zavan, Bruno
A obesidade infantil e os transtornos mentais, incluindo a depressão, crescem de forma acelerada, trazendo inúmeras consequências ao indivíduo. O objetivo do trabalho foi avaliar a influência da obesidade precoce induzida por redução de ninhada no desenvolvimento dos sintomas semelhantes aos de depressão além da expressão de proteína ácida fibrilar glial (GFAP). Utilizou-se redução de ninhada , sendo ninhada reduzida (NR) com 4 filhotes (2 machos e 2 fêmeas) e ninhada normal (NN) contendo 12 filhotes (6 machos e 6 fêmeas). Foi avaliado o comportamento materno das progenitoras entre os dias pós-parto 2 e 5. Nos testes comportamentais com a prole foi realizado o teste de campo aberto, teste de comportamento social de brincar e teste de nado forçado. Foi realizada pesagem dos tecidos retroperitoneal, perigonadal e quantificação da expressão de GFAP do hipocampo e córtex pré-frontal por Western Blotting. O trabalho foi aprovado pela comissão de ética para uso de animais sob o número 036/2021. Os resultados foram avaliados através do software GraphPad versão 8.0. Comportamento materno foi avaliado pelo teste t de student. Para o peso utilizou-se 2-way RM ANOVA seguido pelo teste de Newman-Keuls, usando ninhada (NN e NR) e dias repetidos (1 a 36). Para os testes de comportamento, gorduras e western blotting utilizou-se ANOVA de duas vias seguido pelo teste de comparação múltipla de Newman-Keuls considerando os fatores de ninhada (NN ou NR) e sexo (macho ou fêmea) como fatores e para a correlação o teste de Pearson. A redução de ninhada aumentou o parâmetro maternal de lamber o filhote e diminuiu o parâmetro não maternal de ficar fora do ninho sem explorar. Houve ganho de peso mais acentuado nos animais de NR, tanto machos quanto fêmeas, a partir do PND25 que se manteve até o PND36. Observou-se maior peso da gordura retroperitoneal dos animais de NR, tanto nos machos quanto nas fêmeas e uma maior quantidade de gordura perigonadal nas fêmeas. Não houve alteração na atividade locomotora no teste de campo aberto. No teste de comportamento social de brincar houve redução no tempo de interação nos animais de NR, tanto nos machos quanto nas fêmeas. No teste de nado forçado os animais machos da NR apresentaram maior tempo de imobilidade. Observou-se ainda aumento da expressão da proteína GFAP no córtex pré-frontal dos animais machos de NR. Encontrou-se correlação entre o peso e tecido adiposo e a expressão de GFAP e entre a expressão de GFAP e tempo de imobilidade no nado forçado. Conclui-se que a redução de ninhada aumentou o comportamento maternal e diminuiu os não maternais além de induzir o excesso de peso no período pré-púbere. Encontrando sintomas tipo depressivo acentuados em machos possivelmente por apresentarem uma astrogliose, caracterizada por maior expressão de GFAP no córtex pré-frontal.
Acesso aberto (Open Access)
Extrato rico em galactoglucomanana (GGM) inibe proliferação celular, atenua estresse oxidativo e lesões pré-neoplásicas em ratos induzidos à carcinogênese colorretal
(Universidade Federal de Alfenas, 2023-09-19) Pedreira, Fernanda Rafaelly De Oliveira; Azevedo, Luciana; Paffaro Junior , Valdemar Antonio; Carmo, Mariana Araujo Vieira Do; Silvério, Alessandra Cristina Pupin; Almeida Junior, Luciano Aparecido De
A galactoglucomanana (GGM) é a hemicelulose predominante em árvores coníferas como o abeto da Noruega. O presente estudo investigou os efeitos bioativos de um extrato aquoso rico em GGM em modelos experimentais. A GGM passou pelo processo de digestão gastrointestinal simulada in vitro e as frações resultantes das fases oral, gástrica e intestinal foram submetidas à análise química para investigação do teor de compostos fenólicos, bioacessibilidade e atividade antioxidante. Os extratos foram testados em linhagens celulares cancerosas para avaliação do efeito antiproliferativo, citotóxico e antioxidante. O papel da GGM frente a lesões pré- neoplásicas no cólon e a modulação da microbiota intestinal foi investigado em ratos Wistar induzidos quimicamente ao câncer colorretal (CCR). Os resultados da análise química apontaram que o trato gastrointestinal diminuiu o teor de compostos fenólicos totais (de 33,12 para 19,06mg AGE/g) reduzindo a sua bioacessibilidade para 57,54% em relação ao bruto e, consequentemente, diminuindo sua capacidade antioxidante (FRAP = de 96,12 para 10,52mg de AAE/g; DPPH = de 77,01 para 10,30mg de AAE/g). Porém, a análise celular não apoiou este achado e constatou ação antioxidante da GGM. Os resultados de IC50 (entre 21,34 e >200μg AGE/mL), IG50 (entre 1,97 e 126,4μg AGE/mL) e LC50 (entre 24,72 e > 200μg AGE/mL) apontaram um comportamento antiproliferativo, citotóxico e letal da GGM nas linhagens cancerosas testadas. A GGM atenuou o início e a progressão do câncer de cólon, diminuindo os focos de criptas aberrantes nos animais e foi capaz de modificar a microbiota intestinal desregulando o equilíbrio entre os filos Firmicutes/Bacteroidetes. Com essas evidências, é possível sugerir que a GGM fornece proteção quimiopreventiva contra o desenvolvimento do câncer de cólon e opera como um agente antioxidante intracelular.
Acesso aberto (Open Access)
Efeito dos diferentes percentuais de carga de treinamento (40% e 80% de 1 repetição máxima) utilizados em exercícios resistidos até falha concêntrica em indivíduos fisicamente ativos : estudo clínico controlado randomizado
(Universidade Federal de Alfenas, 2024-04-29) Massahud, Anderson Ranieri; Carvalho, Leonardo César; Borges, Juliana Bassalobre Carvalho; Penoni, Álvaro César De Oliveira; Mansur, Henrique Novais; Silva , Giuliano Roberto Da
A comunidade científica reconhece a força muscular como um importante componente da aptidão física relacionada à melhora e à manutenção da saúde. Neste contexto, o treinamento proposto para ganho de força muscular é de grande interesse para profissionais da saúde e para pesquisadores. Existem várias formas de se desenvolver força muscular, sendo o treinamento resistido a mais comum. Dentre os diversos métodos de treinamento resistido, o método de treino resistido até a falha concêntrica vem se popularizando a cada dia. Porém, a falha concêntrica é um fenômeno multifatorial, ainda não totalmente elucidado pelo método científico. Dessa forma, o objetivo do estudo 1 foi comparar o efeito de diferentes intensidades de treinamento até a falha concêntrica, 80% vs. 40% repetição máxima (RM), nas adaptações musculares em indivíduos fisicamente ativos. Foi realizado um estudo clínico randomizado e controlado com indivíduos do sexo masculino. Sessenta participantes foram alocados três grupos. O primeiro grupo realizou o protocolo de treinamento com intensidade de carga de treinamento de 40%RM. (G40, n=20); o segundo, um treinamento com 80% RM (G80, n=20) e o terceiro, grupo controle (GC, n=20), não realizou nenhuma intervenção. Para os grupos G40 e G80 foi aplicado um programa de treinamento com exercícios resistidos para extensores e flexores de joelho até a falha concêntrica, com duração de oito semanas e frequência de três vezes por semana com intervalo mínimo de 48 horas entre as sessões. A ordem do treinamento foi exercícios no Leg Press, na cadeira extensora e na mesa flexora realizados na Clínica do Exercício da Universidade Vale do Rio Verde - UNINCOR. Realizaram-se três séries de cada exercício com o intervalo de recuperação entre as séries de 2 minutos e, somente após as três séries no mesmo exercício, executava-se a sequência no exercício posterior. Os participantes foram avaliados por meio de exame de ultrassonografia para avaliar a espessura do músculo vasto lateral; teste de avaliação de força dos extensores e flexores do joelho por meio da contração isométrica voluntária máxima avaliada por um dinamômetro de tração e força dinâmica máxima avaliada por meio dos testes de uma repetição máxima; e testes de desempenho funcional (Single/Triple Hop Test e Vertical Jump). Os resultados demonstraram que os grupos G40 (Δ=0,73cm) e G80 (Δ=0,56cm) apresentaram ganhos similares de espessura muscular do vasto lateral. Ambos os grupos apresentaram diferenças significativas em relação ao grupo controle GC (Δ=-0,33cm; p=0,0001). Para os ganhos de força muscular, dos músculos extensores de joelho, avaliado por meio de um dinamômetro de tração (CIVM - Contração Isométrica Voluntária Máxima) foram observados ganhos de força nos grupos intervenção G40 (Δ=5,82kg) e G80 (Δ=8,37kg). Ambos os grupos apresentam diferenças significativas em relação ao GC (-0,015kg; p=0,0001). Não foram observadas diferenças significativas na avaliação dos flexores de joelho (p=0,1251). Já na avaliação de força dinâmica (1RM) o G80 apresentou os maiores ganhos de força quando comparado ao G40 e ao GC (p<0,0001). Essas diferenças foram observadas nos exercícios de Leg Press (Δ=65,42kg), cadeira extensora (Δ=13,52kg) e mesa flexora (Δ=7,89kg). Na avaliação funcional através da distância alcançada foram encontradas diferenças significativas entre os grupos, sendo que o grupo G80 apresentou os maiores ganhos de distância quando comparados ao G40 e GC no Single Hop Test (p=0,0001), Triple Hop Test (p=0,0001) e Vertical Jump (p=0,0001). Podemos concluir que o treinamento resistido até a falha concêntrica realizado com altas ou baixas intensidades de carga geram ganhos de hipertrofia muscular semelhante. Já para o ganho de força máxima dinâmica, isométrica voluntária máxima e para os testes de desempenho funcional, as intensidades de cargas altas são mais eficazes quando comparada às intensidades de cargas baixas. O estudo 2 teve como objetivo avaliar os efeitos agudos em uma sessão de treinamento resistido até a falha concêntrica com diferentes intensidades de carga (40% vs. 80% RM) sobre o metabolismo mineral (sódio, potássio, magnésio, cálcio, fósforo, zinco), marcadores indiretos de estresse e danos musculares (creatina quinase, transaminase oxalacética, termografia infravermelha, lactacidemia). Foi realizado um estudo experimental com indivíduos fisicamente ativos do sexo masculino entre 18 a 25 anos. Preencheram os requisitos de inclusão no estudo 28 homens, sendo quatorze em cada grupo. O primeiro grupo realizou o protocolo de treinamento com intensidade de carga de treinamento de 40%RM (G40). O segundo grupo realizou o treinamento com 80%RM (G80). O programa de treinamento com exercícios resistidos até a falha concêntrica consistia em realizar três séries dos exercícios de Leg Press, cadeira extensora e mesa flexora com intervalo de 2 minutos entre as séries. De acordo com os resultados houve diferença significativa entre os dois grupos para a concentração de sódio (p=0,026), potássio (p=0,0001), cálcio (p=0,0021), lactato (p=0,011) e transaminase oxalacética (p=0,011). Podemos concluir que o treinamento resistido até a falha concêntrica com maior intensidade de carga leva a um maior estresse metabólico e danos musculares quando comparados ao treinamento com menor intensidade de carga. O estudo 3 teve como objetivo avaliar os efeitos hemodinâmicos agudos do treinamento resistido até a falha concêntrica com diferentes intensidades de carga (40% vs. 80%RM). Foi realizado um estudo experimental com indivíduos fisicamente ativos do sexo masculino com idade entre 18 a 25 anos com experiência em treinamento resistido. Preencheram os requisitos de inclusão no estudo 28 homens, sendo quatorze em cada grupo. O primeiro grupo realizou o protocolo de treinamento com a intensidade de carga com 40%RM (G40), enquanto o segundo grupo com 80%RM (G80). A sessão de treinamento até a falha concêntrica foi realizada no exercício de extensão de joelho (cadeira extensora). Realizaram-se três séries do exercício com 2 minutos de intervalo entre elas. Os participantes foram avaliados através do comportamento da pressão arterial sistólica, pressão arterial diastólica, frequência cardíaca e do duplo-produto. Os valores de pressão arterial e frequência cardíaca foram avaliados, nas últimas repetições de cada exercício e após 5 e 15 minutos. Os resultados mostraram que em nenhuma das situações de treinamento avaliadas houve interações significativas entre os fatores de pressão arterial sistólica (p=0,172), pressão arterial diastólica (p=0.298) frequência cardíaca (p=0,376) e duplo produto (p=0,214). A média do duplo produto, importante parâmetro de risco cardiovascular, apresentou valores médios máximos de: G40=12363,6 mmHg x bpm e G80=11363,6 mmHg x bpm . Sendo assim, podemos afirmar que o treinamento resistido até a falha concêntrica com 40 e 80%RM são seguros, pois, segundo as diretrizes do American College of Sports Medicine (2014), valores até duplo produto iguais ou acima de 30.000 mmHg x bpm (milímetros de mercúrios/batimentos por minutos), são indicativos de risco cardiovascular
Acesso aberto (Open Access)
relationship between advanced glycosylation end products, inflammation and oxidative stress in patients with end-stage renal disease undergoing hemodialysis
(Universidade Federal de Alfenas, 2023-02-15) Silva, Paula Corrêa Silveira Da; Novaes, Rômulo Dias; Neves, Juliana Dos Santos; Soares, Evelise Aline; Santos, Eliziária Cardoso Dos; Sarandy, Mariaurea Matias
O controle de efetores pró-inflamatórios e pró-oxidantes sistêmicos é essencial para mitigar o risco cardiovascular e a mortalidade em pacientes com doença renal terminal (ESRD). No entanto, monitorar esses processos ainda é desafiador devido à alta incerteza sobre seus determinantes e preditores sensíveis e específicos. Assim, investigamos a relação entre produtos finais de glicosilação avançada (AGE), estado pró-inflamatório e pró-oxidante em pacientes com doença renal terminal (DRT) em hemodiálise (HD). Além do perfil nutricional e da eficiência de diálise, AGE, citocinas, quimiocinas, proteína C reativa (PCR), capacidade antioxidante total (TAC) e não proteica (npAC), oxidação lipídica e proteica foram analisados em amostras de sangue de 49 pacientes em HD. AGE, PCR, citocinas (TNF, IL-6 e IL-10), quimiocinas (CCL2, MIP-1α e MIP-1B), proteínas carbonildas e malondialdeído foram regulados positivamente, enquanto TAC e npAC foram regulados negativamente em pacientes em HD comparação com indivíduos de saúde. A eficiência da diálise foi reduzida, enquanto a contagem de leucócitos, uréia pré- e pós-HD foram aumentadas em pacientes com maior acúmulo de AGE. Os níveis séricos de PCR, proteínas carboniladas, malondialdeído e todas as citocinas e quimiocinas analisadas foram correlacionados com os níveis circulantes de AGE. Os níveis de AGE foram inversamente correlacionados com IL-10, TAC e npAC em pacientes com maior acúmulo de AGE. Além disso, a AGE apresentou valor preditivo acentuado (coeficiente de determinação) para explicar a variabilidade da PCR, citocinas, quimiocinas, proteínas carbonildas, malondialdeído, TAC e npAC em pacientes com níveis mais elevados de AGE. Em conjunto, nossos achados fornecem evidências de que o acúmulo de AGE está associado a importantes efetores pró-inflamatórios e pró oxidantes em pacientes com DRT submetidos à HD. Assim, o monitoramento de AGE pode ser relevante para predizer o estresse inflamatório sistêmico e o equilíbrio entre o estado oxidante e antioxidante nesses pacientes.
Acesso aberto (Open Access)
Antiparasitic and cytotoxic effect of benznidazole and new metronidazole/eugenol hybrids on Trypanosoma cruzi-induced infection in vitro and in vivo
(Universidade Federal de Alfenas, 2023-02-17) Santos, Elda Gonçalves Dos; Novaes, Rômulo Dias; Carneiro , Deila Rosély; Costa, Manuella Carvalho Da; Santos, Eliziária Cardoso Dos; Sarandy, Mariaurea Matias
Apesar de sua descoberta há mais de um século, a escassez de fármacos e os efeitos colaterais das terapias disponíveis permanecem como desafios para o tratamento da doença de Chagas. Nossa investigação primária foi por meio de uma revisão crítica detalhada da evidência sobre a relevância e a aplicabilidade do benznidazol em diferentes estágios da doença. Nossos achados demonstraram que o benznidazol exibe alta biodisponibilidade após administração oral em adultos e crianças. Porém, a posologia e o tempo de duração do tratamento recomendados muitas vezes são dissociados dos achados farmacodinâmicos. Além disso, os múltiplos métodos analíticos utilizados em acompanhamento pós-terapêutico de longo prazo suportam a evidência de que a maior eficácia terapêutica é obtida quando o tratamento com benznidazol é administrado em infecções agudas, piorando gradualmente à medida que a infecção se torna crônica. Diante de falha terapêutica, o tratamento com benznidazol nem sempre garante melhor prognóstico, podendo o paciente desenvolver a Cardiomiopatia Chagásica assim como pacientes não tratados. Como a evidência atual indica a necessidade de novas estratégias para o tratamento da doença de Chagas, em nossa abordagem secundária avaliamos a relevância antiparasitária in vitro e in vivo de dois novos híbridos moleculares de metronidazol e eugenol na infecção por T. cruzi. Nossos achados mostraram que os híbridos possuem efeito antiparasitário direto sobre o parasito atenuando o a taxa de infecção celular, a biossíntese de espécies reativas e o estresse oxidativo em cardiomiócitos infectados in vitro. Além disso, os híbridos foram bem tolerados em camundongos infectados por T. cruzi, não sendo relacionados à mortalidade ou hepatotoxicidade. Essas novas moléculas também induziram um efeito antiparasitário relevante ao atenuar a parasitemia e a miocardite in vivo. Diante dos resultados, um dos híbridos, denominado AD07 (híbrido metronidazol/dihidroeugenol nitrado na posição orto à hidroxila), destacou-se como candidato potencialmente relevante para o desenvolvimento de novos regimes medicamentosos mais seguros e eficazes para o tratamento da infecção por infecção T. cruzi.
Acesso aberto (Open Access)
A curcumina atenua os déficits cognitivos e o estresse oxidativo em animais sobreviventes a sepse
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-12-15) Reis, Letícia; Paiva, Alexandre Giusti; Costa, Heloisa Helena Vilela; Ribeiro, Deidiane Elisa; Garcia, Tayllon Dos Anjos; Lima, Graziela Domingues De Almeida
A sepse é caracterizada por um conjunto de reações sistêmicas em resposta ao agente infeccioso. O seu desfecho clínico induz lesões cerebrais irreversíveis, as quais podem culminar em danos cognitivos de longo prazo em pacientes sobreviventes à sepse. A propriedade neuroprotetora da Cúrcuma longa (curcumina), tem sido amplamente investigada em diversos distúrbios neuropsiquiátricos. Frente a isso, o presente trabalho propôs avaliar o efeito da curcumina sobre as alterações cognitivas e neurodegenerativas induzidas pela sepse. Inicialmente, dividimos aleatoriamente ratos Wistar machos em dois grupos experimentais: controle (Sham) e sépticos (CLP), os quais foram submetidos a indução da sepse pela cirurgia de ligação e perfuração cecal. A caracterização do comportamento cognitivo foi realizada 10, 20 ou 30 dias após a indução da sepse por meio dos testes comportamentais de campo aberto, reconhecimento de objetos e labirinto aquático de Morris. Outra leva de animais foi submetida à cirurgia de ligação e perfuração cecal e ao tratamento por gavagem com veículo ou curcumina (50 mg/kg) durante sete dias consecutivos, e o comprometimento cognitivo foi avaliado no décimo dia após a indução da sepse por meio dos testes comportamentais supracitados. Imediatamente após o término desses testes, os animais foram eutanasiados, e o hipocampo discecado para avaliação do estado redox por meio dos níveis de ROS (pela técnica de fluorescência relativa de lucigenina), nitrosilação proteica, porcentagem de trap, GSH livre e total, TBARS e GSSG (pela técnica de captura de resíduos S-nitrosotióis). As análises do comportamento exploratório mostraram a ausência de prejuízo locomotor nos testes de campo aberto e labirinto aquático de Morris em todos os grupos e dias testados. Como resultado da caracterização do comportamento cognitivo, foi observado um acentuado déficit de cognição e das memórias de reconhecimento e espacial 10 dias após a indução da sepse, os quais permaneceram de forma tempo-dependete a essa condição clínica. Esse déficit cognitivo foi caracterizado pelo aumento do tempo de exploração ao objeto familiar e uma redução do tempo de exploração ao objeto novo e do índice de reconhecimento após 2h e 24h no teste de reconhecimento de objetos, além do aumento das latências para chegar à plataforma e para chegar ao quadrante alvo e pela redução do tempo de permanência no quadrante alvo no teste de labirinto aquático de Morris, quando comparado ao grupo Sham. Quanto aos animais que receberam o tratamento oral com curcumina (50 mg/kg), foi notada uma redução significativa dos prejuízos cognitivos e das memórias de reconhecimento e espacial, 10 dias após a indução da sepse quando comparado ao grupo CLP+veículo. Além disso, foi observado um intenso estresse oxidativo em animais CLP tratados com veículo, apontado pelo aumento expressivo de ROS, nitrosilação proteica e TBARS, além da redução dos parâmentros antioxidantes Trap e GSH livre e total quando comparado ao grupo controle, e o tratamento com curcumina foi eficazmente capaz de atenuar esses parâmetros. A análise do parâmetro GSSG não apontou diferença estatisticamente significativa entre os grupos testados.
Acesso aberto (Open Access)
Análise dos efeitos agudos e tardios da cirurgia de reconstrução do ligamento cruzado anterior com tendão flexor na cinemática, ativação muscular, equilíbrio e funcionalidade subjetiva dos membros inferiores
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-12-09) Oliveira, Marcelo Lima De; Carvalho, Leonardo César; Iunes, Denise Hollanda; Simão, Adriano Prado; Carvalho, Eduardo Elias Vieira De
A ruptura do ligamento cruzado anterior (LCA) tem sido cada vez mais comum em esportes recreacionais e de alto desempenho. Existem algumas técnicas que foram desenvolvidas para a reconstrução de LCA, todas elas com seus pontos positivos e negativos. Dentre elas vão se destacar a técnica com enxerto autólogo do terço medial do tendão patelar, e a técnica com enxerto autólogo de tendão da musculatura flexora de joelho, mais especificamente dos músculos grácil e semitendinoso. Apesar de uma literatura abundante a respeito da cirurgia de reconstrução de LCA e seus resultados, existem poucos dados comparando diretamente os efeitos agudos de ambas às técnicas cirúrgicas em se tratando de eletromiografia, principalmente da musculatura proximal de quadril, cinemática de membros inferiores e sua funcionalidade. Foram realizados 3 estudos, onde, o objetivo do estudo 1 foi investigar as alterações cinemáticas agudas, estratégias de equilíbrio corporal e distribuição de peso nos membros operados e não operados no seguimento de curto prazo, no período pósoperatório (15 dias). O estudo 2 teve como objetivo investigar os efeitos imediatos ou agudos da reconstrução do LCA na ativação muscular dos membros inferiores. O objetivo do estudo 3 foi investigar as alterações cinemáticas, eletromiográficas, do equilíbrio e funcionalidade subjetiva no período de 3 meses após cirurgia de reconstrução do LCA. A avaliação simultânea da cinemática tridimensional, eletromiografia e equilíbrio dos membros inferiores em apoio bipodal (por baropodometria) foi realizada durante o miniagachamento com os olhos abertos e fechados, em três momentos: pré e pós-operatórios (15 dias e 3 meses). Os resultados destes estudos indicam que após a lesão do LCA e, posteriormente a reconstrução cirúrgica, foram encontradas importantes alterações biomecânicas de membros inferiores, tanto na articulação do quadril quanto na articulação do joelho, no membro operado e no membro não operado. Ao longo do processo de reabilitação, foi demonstrado uma melhora no padrão de movimento, melhora na ativação muscular, melhora do equilíbrio, menor distribuição de peso no membro operado e uma melhora na função subjetiva e sintomatologia do joelho.
Acesso aberto (Open Access)
Lipidoma e expressão gênica de oócitos obtidos de doadoras de genótipos leiteiros bos taurus, Bos indicus e Bos taurus/indicus
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-09-28) Lopes, Asafe Costa; Nogueira, Ester Siqueira Caixeta; Paffato Junior, Valdemar Antonio; Silva, Rubia Bueno Da; Neves, Jairo Pereira; Fernandes, Carlos Antônio De Carvalho
Nos últimos anos observou-se um aumento expressivo do uso da produção in vitro de embriões (PIVE) em raças leiteiras. É conhecido que diferenças no potencial de desenvolvimento oocitário entre fêmeas de raças taurinas (Bos taurus) e zebuínas (Bos indicus) afetam consideravelmente a eficiência e a viabilidade econômica da PIVE e que o metabolismo lipídico pode estar relacionado a variações individuais no potencial de desenvolvimento oocitário, o presente estudo teve por objetivo avaliar o conteúdo e o perfil lipídico, além da expressão de genes envolvidos no metabolismo lipídico em oócitos de doadoras das raças Gir (Bos indicus), Holandesa (Bos taurus) e mestiças 1/2 Holandês x 1/2 Gir (Bos taurus/indicus). Os complexos cumulus-oócitos (COCs) foram recuperados por aspiração folicular e processados para separar os oócitos das células do cumulus. Os oócitos foram então direcionados para as seguintes análises: avaliação semi-quantitativa das gotas lipídicas citoplasmáticas através da coloração por Sudan Black B, análise do perfil lipídico através da espectrometria de massas utilizando o monitoramento de reações múltiplas (MRM) e análise da abundância do RNAm de genes envolvidos no metabolismo lipídico através da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. A concentração de triacilgliceróis, éster de colesterol, diacilglicerol, fosfatidilinositol e ceramida não variou entre as diferentes raças. Entretanto, a abundância total de fosfatidilcolina foi maior nos oócitos das doadoras Gir comparado com as Holandesas e mestiças, e a abundância de esfingomielina e fosfatidiletanolamina foi maior nos oócitos Gir comparado com as Holandesas, enquanto as mestiças não diferiram das demais raças. A análise discriminante por mínimos quadrados parciais (PLS-DA) mostrou que houve estratificação entre as raças considerando os lipídios de membrana, indicando que a raça teve efeito no perfil dos lipídios de membrana nos oócitos e, a ANOVA determinou que 19 espécies lipídicas foram diferentes entre as raças. O nível de RNAm da SPHK2, ACSL3 e CPT2 foi maior nos oócitos imaturos das doadoras Gir e mestiças, enquanto a abundância do RNAm da LRAT foi maior nos oócitos imaturos dos animais Gir em relação as Holandesas, tendo os oócitos dos animais mestiços uma abundância intermediária de LRAT. A expressão de ATX, CPT1B, ACADL e CD36 foi maior nos oócitos imaturos de Gir comparado com as Holandesas. Em relação aos oócitos maturados in vitro, a abundância de ATX, CPT1B e CD36 foi maior nos oócitos das vacas Gir e mestiças comparada com as Holandesas, enquanto a abundância do RNAm da LRAT e ACADL foi maior nos oócitos dos animais Gir em relação as Holandesas, tendo os oócitos dos animais mestiços uma abundância intermediária. Além disso, a expressão de SPHK1 e CPT1A também foi maior nos animais Gir em relação aos Holandeses. O perfil lipídico e transcricional pôde ser mais claramente discriminado entre os oócitos das raças puras, Gir e Holandesa. A maior concentração de lipídios de membrana nos oócitos Gir, associada à maior abundância de genes que metabolizam esses lipídios, indicam haver condições metabólicas que favoreçam a geração de mensageiros químicos importantes para o desenvolvimento do oócito nos animais Gir em relação aos Holandeses.
Acesso aberto (Open Access)
Piperine-chlorogenic acid hybrids modulate critical regulators of the cell cycle and inhibit the proliferation of melanoma cells
(Universidade Federal de Alfenas, 2022-08-26) Pressete, Carolina Girotto; Ionta, Marisa; Lima, Graziela Domingues De Almeida; Antunes , Lusânia Maria Greggi; Oliveira, Pollyanna Francielli De; Miyazawa, Marta
O melanoma é considerado a forma mais agressiva de câncer de pele devido ao seu alto potencial metastático. Apesar da introdução de novas abordagens terapêuticas, como imunoterapia e terapias direcionadas, a taxa de mortalidade permanece alta. A resistência tumoral (intrínseca e adquirida) representa um desafio para o tratamento do melanoma independentemente do esquema de tratamento adotado. Nesse cenário, é importante identificar novos candidatos a fármacos para melhorar as propostas terapêuticas para o melanoma. É importante ressaltar que os produtos naturais têm sido usados como protótipos para o desenvolvimento de novos candidatos à fármacos antineoplásicos. No presente estudo, foi investigado o potencial antitumoral de uma série de híbridos piperina-ácido clorogênico. As substâncias sintetizadas foram obtidas por hibridização molecular envolvendo os grupos farmacofóricos da piperina (1) e do ácido clorogênico (2), os quais foram unidos por um espaçador N-acilhidrazona (3). Os compostos foram testados frente as linhagens celulares derivadas de melanoma (SK- MEL-147, WM-1366, CHL-1), as quais são representativas de diferentes subtipos de melanoma. O ensaio de viabilidade celular revelou que a linhagem SK-MEL-147 foi mais responsiva aos tratamentos em relação às linhagens WM-1366 e CHL-1. Com base nos valores de IC 50 , as substâncias PQM-277, PQM 281 e PQM 286 foram as mais ativas da série. Estudos adicionais mostraram que PQM-277 induz bloqueio do ciclo celular na transição G2/M, enquanto os compostos PQM 281 e PQM 286 inibem a progressão do ciclo na transição G1/S. Os resultados referentes a investigação dos mecanismos moleculares associados à atividade antiproliferativa dessas substâncias sobre a linhagem SK-MEL-147 mostraram que PQM-277 foi capaz de modular a expressão de reguladores críticos da transição G2/M e progressão pelas fases iniciais da mitose. Houve redução da abundância de mRNA para CCNB1 (ciclina B1), CDK1, AURKA (Aurora A), AURKB (Aurora B) e PLK1. Por outro lado, os níveis de expressão de mRNA de CDKN1A (p21), um regulador negativo do ciclo celular, aumentaram nas amostras tratadas com PQM-277 quando comparados aos grupos controle. Com relação à atividade antiproliferativa de PQM 281 e 286, nós demonstramos que essas substâncias inibem a progressão do ciclo celular por reduzir os níveis de expressão das ciclinas D e E. Além disso, nós evidenciados que as substâncias PQM 277, PQM 281 e PQM 286 tem atividade pró-apoptótica frente a linhagem SK-MEL-147. Houve aumento dos níveis de expressão de BAX com concomitante redução na abundância de RNA mensageiro para Bcl-2 em amostras tratadas com PQM 277, indicando que houve ativação da apoptose pela via intrínseca. Tomados em conjunto, os dados obtidos no presente estudo demonstram que os híbridos de piperina e ácido clorogênico são promissores protótipos antitumorais e devem ser considerados em futuras investigações envolvendo modelos animais.
Acesso aberto (Open Access)
Mecanismos associados à atividade antiproliferativa de derivados n-acilidrazônicos sobre linhagens derivadas de carcinoma hepatocelular
(Universidade Federal de Alfenas, 2021-10-08) Silva, Guilherme Álvaro Ferreira Da; Ionta, Marisa; Fernandes , Patrícia Dias; Carvalho, Juliana Lott De; Paschoalin , Thaysa; Oliveira , Pollyanna Francieli De
O câncer de fígado constitui a segunda principal causa de morte por câncer entre homens, sendo que o carcinoma hepatocelular (CHC) é o câncer primário de fígado mais comumente diagnosticado. Apesar da introdução de novas modalidades terapêuticas para o CHC em estágio avançado (terapias alvo-dirigidas e imunoterapia), as taxas de mortalidade continuam altas. A ineficácia do tratamento, em geral, está associada à resistência primária ou adquirida das células tumorais aos fármacos disponíveis. Dessa forma, é relevante identificar novos agentes com atividade antitumoral para ampliar o arsenal terapêutico para o CHC. Estudos mostram que inibidores seletivos de histonas desacetilases (HDACs) podem ser úteis como agentes antineoplásicos. Em um estudo prévio, derivados N-acilidrazônicos foram obtidos (LASSBio-1909, 1911, 1935 e 1936) com a proposta de atuarem como inibidores seletivos para as HDACs 6/8. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar o potencial antiproliferativo dessas substâncias sobre linhagens derivadas de CHC e investigar os possíveis mecanismos de ação da substância mais ativa. Os resultados mostraram que os derivados NAH (LASSBio-1911 e 1935, principalmente) efetivamente inibiram a proliferação e induziram morte celular nas linhagens HepG2 e Hep3B. Além disso, as substâncias foram seletivas para as células tumorais em relação às células normais. LASSBio-1911 induziu bloqueio do ciclo celular na transição G2/M, o qual foi associado à sua capacidade de causar lesões no DNA e ativar o checkpoint G2/M. Foi observado aumento nos níveis de expressão de CDKN1A (p21) e ativação sustentada de ERK em culturas de HepG2 e Hep3B tratadas com LASSBio-1911. A substância LASSBio-1911 induziu apoptose nas linhagens nas linhagens de CHC, sendo que essa atividade foi mais efetiva na linhagem HepG2 em relação a Hep3B. A atividade pró-apoptótica foi correlacionada com aumento na razão Bax/Bcl-2. Além disso, LASSBio-1911 inibiu a capacidade de migração e induziu senescência na linhagem Hep3B. Os dados apresentados no presente estudo mostram que LASSBio-1911 tem promissora atividade antitumoral contra o CHC. Os efeitos dessa substância sobre o comportamento proliferativo e migratório das linhagens testadas foram correlacionados com a inibição de HDAC6, uma vez que houve aumento significativo na expressão de alfa-tubulina acetilada, um importante alvo de HDAC6. Assim, nós demonstramos que a inibição de HDAC6 em células de CHC representa uma estratégia promissora para o tratamento do CHC.
Liver cancer is the second leading cause of cancer death among men, with hepatocellular carcinoma (HCC) being the most commonly diagnosed primary liver cancer. Regardless of the introduction of new therapeutic modalities for HCC advanced-stage (target-directed therapies and immunotherapy), mortality rates remain high. The ineffectiveness of the treatment is generally associated with primary or acquired resistance of tumor cells to available drugs. Therefore, it is relevant to identify new drugs with antitumor activity to improve the therapeutic arsenal for HCC. It is known that selective inhibitors of histone deacetylases (HDACs) can be useful as antineoplastic agents. In a previous study, N-acylhydrazonic derivatives were obtained (LASSBio-1909, 1911, 1935 and 1936) with the proposal of acting as selective inhibitors for HDACs 6/8. In this way, the aim of the present study was to evaluate the anti-proliferative potential of these substances on HCC-derived cell lines and to investigate the mechanisms of action of the most active compound. The results showed that NAH derivatives (mainly LASSBio-1911 and 1935) effectively inhibited the proliferation and induced cell death in the HepG2 and Hep3B cell lines. Furthermore, the substances were selective for tumor cells when compared to normal cells. LASSBio-1911 induced cell cycle arrest at the G2/M transition which was associated with its ability to cause DNA damage and activate the G2/M checkpoint. Increased levels of expression of CDKN1A (p21) and sustained activation of ERK were observed in cultures of HepG2 and Hep3B treated with LASSBio-1911. The substance LASSBio-1911 induced apoptosis in HCC cell lines, and this activity was more expressive on HepG2 when compared to Hep3B. The pro-apoptotic activity was correlated with an increase in the Bax/Bcl-2 ratio in both cell lines. Moreover, LASSBio-1911 inhibited the migration capacity and induced senescence in Hep3B. The data here presented show that LASSBio-1911 has promising antitumor activity against HCC. The effects of this substance on the proliferative and migratory behavior of the HepG2 and Hep3B cell lines were correlated with the inhibition of HDAC6, since there was a significant increase in the expression of acetylated alpha-tubulin, an important target of HDAC6. Therefore, we demonstrate that inhibition of HDAC6 is a promising strategy for HCC treatment.